红花水提物对急性心肌缺血模型大鼠的保护作用研究

陈俊萍，李向阳（1.西宁市第二人民医院，西宁810003；.青海大学医学院，西宁810001）

缺血性心脏病是严重危害人类健康的疾病，如冠心病、心绞痛等。其发病率逐年上升，寻求抗心肌缺血的天然药物已成为近年来的研究热点。红花为菊科植物Carthamus tinctoriusL.的干燥花，又称草红花，性温、味辛，归心、肝经。其气香行散，入血具有活血通经、祛瘀止痛的功效，对于痛经、经闭、产后血晕、瘀滞腹痛、胸痹心痛、血积、跌打瘀肿、关节疼痛、中风瘫痪、斑疹紫暗有一定作用[1]。临床常以复方制剂形式用于心脑血管类疾病的治疗，如芪丹通脉片（由黄芪、丹参、当归、红花、桂枝组成）、心舒口服液（由当归、川芎、红花组成）、回天再造丸（由山羊血、穿山甲、红花等60味中药组成）。但红花单独使用对心肌缺血的保护作用究竟如何则少见报道。本文就红花水提物对垂体后叶素（Pit）复制急性心肌缺血模型大鼠保护作用进行研究，为其临床用药提供理论依据。

1 仪器与材料

1.1 仪器

RM-6280型多道生理记录仪、TDL-5型离心机（上海安亭医疗器械有限公司）；UV 755B型分光光度计（上海分析仪器总厂）；恒温水浴箱（上海荣计达实验仪器有限公司）。

1.2 试药

红花购自西宁市第二人民医院中药房，由笔者鉴定为真品；硝酸异山梨酯片（山东鲁南贝特制药有限公司，批号：040925）；Pit注射液（南京新百药业有限公司，批号：081101）；超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、三磷酸腺苷（ATP）测试盒均购自南京建成生物工程研究所；水为双蒸水。

1.3 动物

清洁级SD大鼠60只，♂，体重150～180g，由中国医学科学院实验动物研究所提供（动物使用合格证号：SCXK（京）11-00-0006）。

2 方法

2.1 红花水提物的制备

取干燥至恒重红花100g，置2000mL烧瓶中，加入10倍量水，加热回流1.5h，重复3次，抽滤，合并滤液减压浓缩成膏状，再真空干燥，研磨成粉，贮藏，备用。实验时配成相应浓度溶液。

2.2 复制模型与分组、给药

实验分为6组，即正常对照（等容生理盐水）、模型（等容生理盐水）、硝酸异山梨酯（15mg·kg－1）和红花水提物高、中、低剂量（100、50、25g（生药）·kg－1）组。ig给药，每天1次，连续15d，于末次给药后1h ipPit（20u·kg－1）以复制急性心肌缺血大鼠模型。

2.3 指标的测定

2.3.1 心电图的测定 末次给药1h后，ip 3%戊巴比妥钠（1mL·kg－1）麻醉正常对照组大鼠，背位固定，多道生理记录仪的针状电极分别插入皮下，先连续观察并记录一段正常心电图；复制模型后，检测其余各组大鼠心电图ST段与T波。

2.3.2 心肌SOD活性和MDA含量的检测 取各组大鼠心室肌，冰水中匀浆，1000r·min－1离心5min，取上清液作为样品。用TBA法测心肌MDA含量，用邻苯三酚法测SOD活性。

2.3.3 心肌ATP的测定 取各组大鼠心室肌剪碎，氮冷却下研成粉末，称重后立即加1mL丙酮，室温放置15min，90℃水浴中约4min 挥干丙酮，加入5mL 2mmol·L－1MgSO4，沸水煮15min 后冷却，1000r·min－1离心10min，取上清液作为样品。通过生物发光法测定样品ATP的含量。

2.4 统计学方法

3 结果

3.1 红花水提物对模型大鼠心电图的影响

与正常对照组比较，模型组大鼠心电图ST段明显抬高，T波高尖明显，表明急性心肌缺血模型复制成功；红花水提物高、中剂量组大鼠心电图ST段略有抬高，红花水提物低剂量组大鼠心电图ST段明显抬高，表明高、中剂量红花水提物对模型大鼠心电图ST段有改善作用。

3.2 红花水提物对模型大鼠心肌SOD活性和MDA含量的影响

与正常对照组比较，模型组大鼠心肌SOD活性显著减弱，MDA含量显著升高（P＜0.01），表明大鼠心肌抗氧化能力减弱。与模型组比较，红花水提物高、中剂量组大鼠心肌SOD活性显著增强，MDA含量显著降低（P＜0.01或P＜0.05），而低剂量红花水提物对大鼠心肌SOD活性和MDA含量有改善趋势，但无显著性差异（P＞0.05）。表明红花水提物有一定的抗氧化作用，且呈量效关系。红花水提物对模型大鼠心肌SOD活性和MDA含量的影响见表1。

3.3 红花水提物对模型大鼠心肌ATP含量的影响

与正常对照组比较，模型组大鼠心肌ATP含量显著降低（P＜0.01），表明大鼠心肌供能异常。与模型组比较，红花水提物高、中剂量组大鼠心肌ATP含量显著升高（P＜0.01或P＜0.05），而低剂量红花水提物对大鼠心肌ATP含量有改善趋势，但无显著性差异（P＞0.05）。表明红花水提物有一定改善心肌供能异常的作用，且呈量效关系。红花水提物对模型大鼠心肌ATP含量的影响见表2。

表1 红花水提物对模型大鼠心肌SOD活性和MDA含量的影响Tab 1 Effect of water extract from C.tinctorius on activity of SOD and content of MDAin model rats

表2 红花水提物对模型大鼠心肌ATP含量的影响Tab 2Effect of water extract from C.tinctorius on content ofATPin model rats

4 讨论

Pit是从动物脑垂体中提取的物质，内含有加压素（抗利尿素）和催产素，加压素能直接使血管，特别是毛细血管和小动脉收缩，可使冠状动脉痉挛、收缩从而使心肌缺血缺氧。笔者ip Pit引起冠状动脉痉挛以复制大鼠急性心肌缺血模型[2，3]。急性心肌缺血出现异常心电图改变，主要反映在ST段、T波异常。本研究表明，红花水提物可改善模型大鼠心电图异常情况，以起到保护心肌作用。

在急性心肌缺血过程中，超氧阴离子自由基（·O2-）的大量形成和脂质过氧化的增加是细胞损伤的主要病理过程之一。SOD广泛存在于生物体内与细胞氧代谢密切相关的蛋白质，可高度专一性地催化对机体有害的·O2-的歧化反应，而排除·O2-对机体细胞、组织的损害，对抗缺血缺氧性疾病的损伤、缺血缺氧再灌注组织损伤有重要的保护作用。MDA是脂质过氧化反应的稳定代谢物，测定MDA含量可反映心肌组织中·O2-的含量及其引发的脂质过氧化反应程度，间接反映细胞受自由基氧化损伤的程度。本研究表明，高、中剂量红花水提物可显著增强模型大鼠心肌SOD活性，降低MDA含量，从而保护受损心肌。

ATP系一种辅酶，参与机体蛋白质、脂肪、糖、核酸、核苷酸等代谢，又是机体能量的主要来源[4]，其代谢异常可反映机体供能异常。本研究表明，高、中剂量红花水提物可显著增强模型大鼠心肌ATP含量，从而保证受损心肌的供能充足。

综上所述，红花水提物对急性心肌缺血模型大鼠可起到保护作用，其机制可能与改善心脏ST段、T波和抗氧化，增强机体供能有关。

[1] 国家药典委员会.中华人民共和国药典（二部）[S].2010年版.北京：中国医药科技出版社，2010：156.

[2] 尚正录，尚 云，卫洪昌.黄芪保心汤预防实验性大鼠急性心肌缺血的研究[J].上海中医药杂志，2004，38（11）：47.

[3] 王振宇，钱瑞琴，关树宏，等.冠心Ⅱ号抗缺血性心肌损伤的自由基机理实验研究[J].中国中西医结合杂志，2003，23（5）：363.

[4] 张俊武.新编实用医学词典[M].北京：北京医科大学中国协和医科大学联合出版社，1994：126.