矽肺患者血清白介素-8和血小板衍生生长因子-AA 的变化

胡爱根，李清祥，周美英，雷 震

（1.丰城矿物局职工总医院检验科，江西 丰城 331141；2.南昌市第三医院检验科，南昌 330009；3.南昌市第九医院检验科,南昌 330002）

矽肺是由于长期吸入含二氧化硅粉尘导致肺组织弥漫性纤维化而引发的一种慢性疾病，其发病机制尚未完全清楚。肺损伤纤维化是一个复杂的病理过程，早期特征是肺泡炎性水肿，继之出现肺间质增生和肺纤维化，最终导致呼吸功能的完全丧失[1],许多细胞因子参与其反应，但这方面的研究多限于动物实验[2]。为此，本研究检测矽肺患者血清白介素－8（IL-8）和血小板衍生生长因子-AA（PDGF-AA）含量，探讨其在矽肺发病机制中的作用，为寻找新的疗效观察指标和治疗途径提供依据。

1 对象与方法

1.1 研究对象

选择2008年1月至2012年6月在丰城矿物局职工总医院进行体检、住院及门诊随访者为研究对象。以健康体检者为对照组（n=110），年龄（49.6±5.3）岁。某铸造厂接触矽尘作业、工龄在1年以上者211名（清砂工88例、型砂工100例、其他工种23例）接尘工人为接尘组，年龄（50.2±5.9）岁。矽肺患者155例为矽肺组，其中Ⅰ期矽肺74例、Ⅱ期56例，Ⅲ期25例清砂工120例、型砂工26例、其他工种9例，年龄（51.6±6.4）岁。48例非矽肺患者为作业观察对象（0＋）（观察对象组，即指粉尘作业人员健康检查发现X射线胸片有不能确定的尘肺样影像学改变，其性质和程度需要在一定期限内进行动态观察者），清砂工27例、型砂工13例、其他工种8例，年龄（53.0±5.2）岁。各组对象均为男性。剔除心脏病、高血压病、糖尿病、肾脏病、肝脏病、血液病、风湿免疫系统疾病、肿瘤患者等。所有研究对象均未从事过各类辐射和有毒作业，也未长期接触过各类农药和毒物；营养和消化吸收功能良好，在受检前1个月内均未服用维生素C、银杏叶制剂和茶多酚等抗氧化药物。各组对象的年龄比较差异无统计学意义（P>0.05）,具有可比性。

采用问卷调查方法，了解研究对象的粉尘接触史、吸烟史、既往史、家族史。由研究人员填写问卷。

1.2 矽肺的诊断

根据国家尘肺X线诊断标准，参考受检者的系列胸片和该单位矽肺发病情况，由丰城矿物局总医院尘肺诊断小组依据GBZ70-2002和 GBZ70－2009《尘肺病诊断标准》[3－4]进行诊断、分期。

1.3 试剂与仪器

ELISA检测试剂盒（美国Biosource公司），全自动生化分析仪（美围Beckman公司），spiro IabⅡ型便携式肺功能仪（意大利MIR公司）。

1.4 IL-8和PDGF-AA的检测

清晨空腹抽取外周静脉血5 mL。置于EDTA的干燥试管中，立即混匀。 2 500 r·min－1离心 10 min，分离血清，于-80℃保存待测。所有操作步骤由专人完成，严格按照试剂盒提供的方法操作。

1.5 统计学方法

2 结果

与对照组比较，接尘组、观察对象组和矽肺组IL-8水平明显升高（P<0.01）；与接尘组比较，观察对象组和矽肺组IL-8水平明显升高（P<0.05或P<0.01）。与对照组和接尘组比较，观察对象组和矽肺组PDGF-AA水平明显升高（P<0.05或P<0.01）。见表1。

表 1 各组对象 IL-8和PDGF-AA 的比较 ±s，ρ/ng·L－1

表 1 各组对象 IL-8和PDGF-AA 的比较 ±s，ρ/ng·L－1

△P＜0.01与对照组比较，#P＜0.05与对照组和接尘组比较。

组别 n IL-8 PDGF-AA对照组 110 6.55±1.94△ 26.38±10.14接尘组 211 49.66±5.42△ 27.31±12.22观察对象组 48 111.07±10.08△ 56.26±14.35#矽肺组 155 226.45±19.03△ 65.16±11.94#

3 讨论

正常情况下，肺泡上皮细胞接受来自环境的颗粒和微生物刺激，巨噬细胞和上皮细胞分泌化学增活素和细胞因子以调节粒细胞和淋巴细胞聚集、渗出，清除各种刺激影响，但广泛的组织损伤可导致肺组织炎症、异常组织修复、纤维化发生。矽肺目前在我国接尘工人中发病率很高，危害严重[1]。矽肺的发生机制目前还不十分清楚，但SiO2刺激机体分泌多种细胞因子等生物活性物质导致肺组织纤维化是肯定的，如果能够早期检测到这些细胞因子的变化，并找到某个或某些细胞因子作为相对特异的观察指标，将对矽肺的早期监测及接尘人群的普查具有重要意义[5]。 已有研究[6]表明，多种细胞因子参与了尘肺病的发生、发展过程，其中转化生长因子β1（transforming growth factor β1,TGF β1）、胰岛素样生长因子（insulinlike growth factor,IGF1）和结缔组织生长因子（connective tissue growth factor,CTGF）等对调控肺成纤维细胞的分裂、增殖及胶原蛋白的合成与降解起着十分重要的作用。

本研究发现，矽肺患者血清IL-8和PDGF-AA水平升高在肺纤维化的发生、发展过程中起着重要作用。IL-8可趋化单核细胞、中性粒细胞、淋巴细胞在诱导素（如刀豆素A）作用下合成与释放，并且具有时间和剂量依赖性，不同细胞类型对诱导剂反应各异，以单核细胞产量最高。另外，PDGF是刺激细胞生长的主要致分裂原，对成纤维细胞有趋化作用，PDGF具有多种形式的二聚体结构，通常所说的PDGFI即PDGF-AA可以与肺成纤维细胞及肺内其他多种细胞PDGFα亚单位受体相结合，从而诱导成纤维细胞的趋化、分裂[7]。因此，接尘工人、观察对象以及矽肺患者的IL-8和PDGF-AA呈较高水平。接触矽尘作业工人的防护措施不当导致SiO2刺激机体，使细胞因子相互作用，造成肺纤维化，观察对象组介于矽肺的发病前期。本研究结果提示观察对象组和矽肺组的IL-8和PDGF-AA明显高于接尘组，表明接尘工人中在X线胸片未达到矽肺诊断标准的“观察对象”时，即可出现IL-8和PDGF-AA含量升高，提示IL-8和PDGF-AA含量可作为矽肺早期生物标志物之一。由于血清IL-8和PDGF-AA含量采用ELISA测定，方法成熟、简便可靠，标本易于取得，具有良好的可重复性和可操作性，适合在基层单位及职业健康监护中使用。

[1] Brown T.Silica exposure，smoking，silicosis and lung cancer-complex interactions[J].Occup Med（Lond），2009，59（2）:89-95.

[2] 高晓方，崔社怀.干扰素γ对实验大鼠肺纤维化的治疗作用及机制的初步研究[J].第三军医大学学报，2005,27（2）:143-145.

[3] 中华人民共和国卫生部.GBZ 70-2002．尘肺病诊断标准[S]．北京：人民卫生出版社，2002.

[4] 中华人民共和国卫生部.GBZ 70-2009尘肺诊断标准[S].北京：人民卫生出版社，2009.

[5] 张雪涛，倪为民,缪荣明，等．矽肺患者氧化应激指标及外周血单核细胞NF-κB的变化[J]．中华劳动卫生职业病杂志，2011,29（4）:251-253.

[6] Wintersberger E.Regulation and biological function of thymidine kinase[J].Biochem Soc Trans，1997，25（1）：303-308.

[7] Reist R H，Dey R D，Durham J P，et al.Inhibition of proliferative activity of pulmonary fibroblasts by tetrandrine[J].Toxicol Appl Pharmacol，1993,122（1）:70-76.