PCNA及Mina53表达与非小细胞肺癌放射敏感性的关系

赵光日

（广州医学院附属肿瘤医院，广东 广州 510095）

PCNA及Mina53表达与非小细胞肺癌放射敏感性的关系

赵光日

（广州医学院附属肿瘤医院，广东 广州 510095）

本研究探讨增殖细胞核抗原（Proliferating Cell Nuclear Antigen，PCNA）与 Mina53在非小细胞肺癌中的表达极其与放疗患者疗效的相关性，从而为早期预测非小细胞肺癌放疗敏感性提供依据，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择2009年1月至2010年1月我院收治的非小细胞肺癌患者共59例。男41例，女18例。年龄51－77岁，平均62.5±9.3岁。病理类型中鳞癌26例，腺癌28例，鳞腺癌3例，大细胞癌2例。患者病理分期按UICC1997年肺癌术后病理分期标准划分：Ⅰ期23例，Ⅱ期19例，Ⅲ期17例。伴有淋巴结转移者21例，无淋巴结转移者38例。高分化13例，中分化31例，低分化15例。所有入选患者符合以下条件：1）无手术指征或者未接受过放疗。3）患者经临床纤支气管镜或穿刺活检证实为非小细胞肺癌。3）患者预计生存期＞3个月。

1.2 放疗方法

放疗设备：美国瓦里安公司，模拟机Acuity，计划系统Eclipse，加速器Varian 23EX。对所有患者进行C4-L2椎体下缘行螺旋CT增强扫描，确定肉眼肿瘤区以及周围正常组织的范围，再进一步确定临床靶区、计划靶区以及需要保护的敏感器官。行常规分割放疗，治疗总剂量为60－70Gy／30－35f，6周完成放疗。

1.3 免疫组化处理

所有切片来自于非小细胞肺癌患者行病理活检后的标本，福尔马林固定后行石蜡包埋并制成4μm厚的切片。每份标本分别行PCNA与Mina53蛋白免疫组化染色。鼠抗PCNA单克隆抗体购自福州迈新生物技术有限公司。鼠抗人Mina53单克隆抗体购自美国Invitrogen公司。抗原微波修复后进行免疫组织化学染色，PBS代替一抗作为阴性对照。PCNA与Mina53蛋白的表达均位于细胞核中，其中阳性细胞核为棕黄色。每例选取5个高倍视野，镜下每视野中选取100个肿瘤细胞中的阳性细胞数，其中未见阳性细胞表示（－）、阳性细胞＜25%为（＋）、阳性细胞在25%～50%为（＋＋）、阳性细胞＞50%为（＋＋＋）。

1.4 疗效评估

根据WHO的疗效评估标准，放疗结束后1－2个月行胸部增强CT检查肿瘤消退情况，分为完全缓解（CR）、部分缓解（PR）、无变化（NR）以及病情进展（PD），CR＋PR／总数＊100%为计算有效率。

1.5 统计学处理

应用统计软件SPSS13.0对59例非小细胞肺癌患者与放疗敏感相关性进行分析，资料以均数±标准差（±s）表示；资料采用卡方检验和非参秩和Mann-Whitney U检验，P＜0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 非小细胞肺癌患者放疗有效率

所有59例患者中CR12例（20.3%），PR22例（37.3%），NR16例（27.1%），PD9例（15.3%），其中患者总放疗有效率为54.8%。见表1。

表1 非小细胞肺癌患者放疗有效率

2.2 PCNA蛋白表达与放疗疗效的相关性

PCNA蛋白表达按照染色结果（－）、（＋）、（＋＋）、（＋＋＋）分组显示，放疗后患者有效率依次为27.3%、46.1%、64.7%、77.8%，组间对比差异有统计学意义，P＜0.05。表示PCNA蛋白表达与放疗疗效呈正相关。见表2。

表2 PCNA蛋白表达与放疗疗效的相关性

2.3 Mina53蛋白表达与放疗疗效的相关性

Mina53蛋白表达与放疗疗效的相关性对比，患者按染色结果（－）、（＋）、（＋＋）、（＋＋＋）分组显示，放疗后患者有效率依次为83.3%、66.7%、42.8%、33.3%，组间对比差异有统计学意义，P＜0.05。表示Mina53蛋白表达与放疗疗效呈负相关。见表3。

表3 Mina53蛋白表达与放疗疗效的相关性

3 讨论

PCNA是由Miyachi于1978年在系统性红斑狼疮患者的血清中首次发现并命名，其因只存在于正常增殖细胞及肿瘤细胞内而得名。PCNA是一种36kDa的酸性无组蛋白细胞核多肽，其表达与细胞增殖周期密切相关，可以反映细胞增殖程度以及所处的周期，并用于对良恶性肿瘤鉴别及肿瘤恶性程度的评估［1］。既往研究表明PCNA指数与放疗敏感性呈现正相关，本研究通过探讨发现PCNA在非小细胞肺癌中免疫组化的阳性表达率与放疗敏感性的相关性，研究结果显示患者按染色结果（－）、（＋）、（＋＋）、（＋＋＋）分组显示，放疗后患者有效率分别为27.3%、46.1%、64.7%、77.8%。组间对比差异有统计学意义，P＜0.05。表示PCNA蛋白表达与放疗疗效呈现正相关。其可能的原因在于PCNA增殖指数较高的肿瘤组织中进入细胞增殖周期的肿瘤细胞数量较多，而此类进入增殖周期的细胞对放疗更加敏感。

Mina53是分子量为53KD的一个新基因，其表达由C-myc直接诱导［2，3］。研究报道，人类结肠癌、胃癌、食管癌、淋巴结瘤、肺癌以及肾细胞癌中均存在着 Mina53的表达［4］，谭小平等人［5］研究 Mina53在结肠癌中的表达及与各临床病理特征和肿瘤增殖活性的关系中，运用PCR分别检测51例结肠癌、19例结肠腺瘤和20例正常结肠组织Mina53mRNA的表达，结果显示结肠癌组织Mina53mRNA的表达明显高于结肠腺瘤及正常结肠组织；而与肿瘤的组织分化程度、临床分期、远处转移和淋巴结转移均相关，表明Mina53的表达与肿瘤的恶性程度密切相关。而Mina53与非小细胞肺癌放疗敏感性的相关性研究国内外并未涉及，本研究Mina53蛋白表达与放疗疗效的相关性对比中，患者按染色结果（－）、（＋）、（＋＋）、（＋＋＋）分组显示，放疗后患者有效率分别为83.3%、66.7%、42.8%、33.3%，组间对比差异有统计学意义，P＜0.05。表示Mina53蛋白表达与放疗疗效呈现负相关。

综上所述，本研究探讨了PCNA和Mina53蛋白在59例非小细胞肺癌组织中的表达及其与放疗疗效的相关性。结果显示PCNA蛋白表达的增加放疗效果较好，Mina53蛋白表达的增强放疗效果较差，PCNA和Mina53蛋白在预测非小细胞肺癌的放疗疗效中均有一定的作用，从而为非小细胞放疗敏感性的早期诊断提供依据。

［1］Zhao Y，Li XJ，Sui X，et al.Expression and significance of PCNA and Caspase-3in the tissue of lung cancer［J］.Xi Bao Yu Fen Zi Mian Yi Xue Za Zhi，2010，26（2）：154.

［2］Tsuneoka M，Koda Y，Soejima M，et al.A novel myc target gene，mina53，that is involved in cell proliferation［J］.J Biol Chem，2002，277（38）：35450.

［3］Fukahori S，Yano H，Tsuneoka M，et al.Immunohistochemical expressions of Cap-43and mina53proteins in neuroblastoma［J］.J Pediatr Surg，2007，42（11）：1831.

［4］Kazutoshi Komiya，Naoko Sueoka-Aragane，Akemi Sato，et al.Mina53，a novel c-Myc target gene，is frequently expressed in lung cancers and exerts oncogenic property in NIH／3T3cells［J］.Journal of Cancer Research and Clinical Oncology，2010，136（3）：465.

［5］谭小平，何长华，朱燕妮，等.Mina53在结肠癌组织中的表达意义及与肿瘤增殖的关系［J］.世界华人消化杂志，2011，4：421.

1007－4287（2012）02－0310－02

2011－06－20）