uPA和FAK在髓母细胞瘤中的表达及临床意义

王勇 梁庆华 史锡文

uPA和FAK在髓母细胞瘤中的表达及临床意义

王勇 梁庆华 史锡文

目的研究尿激酶型纤溶酶原激活剂(urokinase-type plasminogen，uPA)和粘着斑激酶(Focal Adhesion Kinase，FAK)在髓母细胞瘤中的表达及临床意义。方法应用免疫组化法检测80例髓母细胞瘤中uPA和FAK的表达，结合临床随访，使用Cox回归统计分析和Spearman相关分析。结果uPA和FAK的染色定位于肿瘤细胞。Cox回归分析显示uPA和FAK是影响生存时间的独立的预后因子，它与预后存在高度负相关关系。Spearman相关分析显示uPA和FAK存在正相关关系。结论uPA和FAK可能是预测髓母细胞瘤预后的独立的预后因子。uPA和FAK两者存在正相关关系。

髓母细胞瘤;uPA FAK;预后

髓母细胞瘤是中枢神经系统一种高度恶性的神经上皮性肿瘤。肿瘤细胞的侵袭性生长是一个多步骤的复杂过程，有多种生物化学因子参与其中。我们通过免疫组织化学方法研究髓母细胞瘤中uPA和FAK的表达情况，同时结合随访资料，以评估两者与预后的关系及两者之间的相关性。

1 材料与方法

1.1 一般资料 1999～2010年河南省人民医院神经外科收治的髓母细胞瘤患者98例，其中随访、病理和病历资料完整者80例。男47例;女33例。年龄3～47岁(平均12.6岁)。病程0.5～12个月(平均2.8个月)。切除范围:全切除63例;次全切除15例;部分切除2例。75例行术后常规放疗。外伤或深部手术中必须切除的浅部正常小脑组织10例。

1.2 试剂与方法 本实验采用LSAB法。单克隆抗体为Oncogene science公司产品，工作浓度为10 μg/ml。FAK多克隆抗体购自武汉博士德公司，工作浓度为1∶100。结果评定标准:由有经验的病理科医师对染色结果进行评定。记录观察结果(包括阳性细胞种类、阳性染色程度)。在光镜下，以肿瘤细胞胞浆出现棕黄色颗粒为阳性。每张切片在相同放大倍数下，各选取阳性细胞最集中的10个视野，每个视野数100个细胞，计算出每张切片上阳性细胞的百分率。据此百分率分为高表达组和低表达组。

1.3 统计学方法 Cox比例风险模型用于预后单因素和多因素分析，Spearman相关分析，SPSS13.0软件做统计处理。

2 结果

2.1 染色结果 在全部切片中，uPA和FAK免疫组化染色从完全不染色到广泛深染均可见。两者的阳性细胞是肿瘤细胞。正常小脑组织未见uPA和FAK染色。

2.2 随访结果 本组5年生存率为52.4%。uPA高、低表达组的例数分别为47和33例;其平均生存期分别为12.6和61.3个月。FAK高、低表达组的例数分别为52和28例;其平均生存期分别为11.8和60.6个月。

2.3 统计分析结果 Spearman相关分析:通过对年龄、病程、肿瘤体积、切除范围、放疗、uPA、FAK、生存时间运用Spearman相关分析，发现切除范围、放疗、uPA、FAK与生存时间相关(P＜0.05)，而且uPA与FAK也存在相关性(P＜0.05)。Cox分析结果:单因素分析结果表明，对于生存时间来说，切除范围、放疗、uPA、FAK与预后相关(P＜0.05)。年龄、性别、病程、肿瘤体积与预后无明显相关(P＞0.05)。但多因素分析结果表明，对于生存时间来说，只有uPA、FAK是独立的预后因子(P＜0.05)，其参数为正值，说明它是一个危险因子。它们呈高表达，则患者的生存期短。

3 讨论

肿瘤发生侵袭转移是一个复杂的多步骤的肿瘤细胞与宿主细胞相互作用的连续过程。首先肿瘤细胞与细胞外基质成分发生粘附，之后肿瘤细胞分泌多种蛋白降解酶，以降解细胞外基质和基底膜成分。FAK在肿瘤细胞与细胞外基质成分粘附及信号传导中起关键作用;而uPA在降解细胞外基质中发挥重要作用。

关于FAK与髓母细胞瘤的关系中，Guessous等［1］通过研究髓母细胞瘤的细胞系发现:FAK在肿瘤细胞的增殖、侵袭、转移中起重要作用。在我们［2］的前期工作中，发现uPA在髓母细胞瘤中高表达。而本次研究中发现，髓母细胞瘤中的肿瘤细胞都可表达uPA和FAK。结合随访资料显示，uPA或FAK高表达的患者，其平均生存时间均较低表达者短。随后又发现，uPA、FAK两者都为高表达的平均生存时间小于两者之一为高表达者，后者的平均生存时间又小于两者均为低表达者。通过Spearman相关分析，发现切除范围、放疗、uPA、FAK与生存时间相关(P＜0.05)。但在Cox比例风险回归分析中，未发现患者的年龄、性别、病程、肿瘤体积、切除范围、放疗与生存时间有关(P＞0.05)。上述结果亦表明切除范围、放疗不是敏感的预后指标。因此，若术中全切除可能有很大风险时，应残留部分瘤组织。同样，若术后情况不允许立即放疗，可适当延缓进行放疗的时间。多因素Cox模型分析显示，uPA和FAK分别作为独立指标最终进入模型(P＜0.05)，结合单因素分析结果，表明uPA和FAK可作为预测髓母细胞瘤预后的指标。两者的表达水平与患者的生存时间呈高度负相关关系。

关于uPA和FAK的关系，我们通过相关分析发现两者具有相关性(P＜0.05)。两者之间可能通过 uPA的受体(uPAR)起作用。Nalla等［3］发现在髓母细胞瘤的细胞系中，uPAR超表达可启动FAK信号系统;而下调uPAR，可通过抑制FAK的磷酸化而减少肿瘤细胞的侵袭活动。

综上所述，uPA和FAK表达水平同髓母细胞瘤患者的预后密切相关，提示uPA和FAK在肿瘤浸润转移过程中起着重要作用。

［1］ Guessous F，Yang Y，Johnson E，et al.Cooperation between c-Met and focal adhesion kinase family members in medulloblastoma and implications for therapy．Mol Cancer Ther，2012，11(2):288-297．

［2］ 王勇，毛伯镛，程宏伟，等.uPA和KDR在髓母细胞瘤中的表达及意义.中华神经外科杂志，2003，19(2):106-108．

［3］ Nalla AK，Asuthkar S，Bhoopathi P，et al.Suppression of uPAR retards radiation-induced invasion and migration mediated by integrin β1/FAK signaling in medulloblastoma．PLoS One，2010，24(9):13006．

Expression and significance of urokinase-type plasminogen activator and FAK inmedulloblastoma

WANG Yong，LIANG Qing-hua，SHI Xi-wen.Department of Neurosurgery，Henan Provincial People's Hospital，Zhenzhou 450003，China

ObjectiveTo detect the expression and evaluate the clinical significance of urokinase-type plasminogen activator(uPA)and FAK inmedulloblastoma.MethodsLSAB(labelled streptavidin biotin method)immunohistochemical technique was applied for detecting the expression ofuPAand FAK in 80 patients withmedulloblastoma.The results were summarized by follow-up survey with Cox regression analysis and Spearman correlation analysis.ResultsThe staining for uPAand FAK was localized on tumor cells.Cox regression analysis showed that uPAand FAK were independent prognostic factor affecting survival，and they had a negative correlation with the prognosis.Moreover，UPA had a positive correlation with FAK.ConclusionuPA and FAK appears to be an independent marker for predicting the prognosis ofmedulloblastom.UPA had a positive correlation with FAK．

Medulloblastom;uPA;FAK;Prognosis

河南省医学科技攻关项目(项目编号:201003116)

450003河南省人民医院神经外科