HPLC法测定复方新诺明的含量

2012-08-15夏河山

郑州铁路职业技术学院学报 2012年1期

夏河山，程萍

(郑州铁路职业技术学院，河南郑州 450052)

复方新诺明是磺胺甲噁唑(SMZ)和甲氧苄啶(TMP)的复方制剂，为抗菌药，临床主要用于生殖、尿路、呼吸道、胃肠道及皮肤感染等的治疗。复方磺胺甲噁唑片含量的测定方法很多，有双波长薄层扫描法、高效毛细管电泳法、HPLC法、一阶导数光谱法等。本文采用HPLC法对其两种成分的含量进行测定，结果准确，方法简便。

1 仪器与试剂

岛津LC—20AB型高效液相色谱仪，AG204电子天平(瑞士METTLER—TOLEDO公司)，容量瓶，吸量管。

甲氧苄啶对照品(中国药品生物检定所提供);磺胺甲噁唑对照品(中国药品生物检定所提供);复方磺胺甲噁唑片(吉林恒河药业股份有限公司);辅料均为药用;乙腈为色谱纯;氢氧化钠，盐酸，三乙胺，试剂为分析纯。

2 方法与结果

2．1 色谱条件

色谱柱:十八烷基硅烷键合硅胶柱4．6mm×25cm。流动相:水—乙腈—三乙胺(799∶200∶1，配制方法:2000ml容量瓶中，加入1400ml水，400ml乙腈，2ml三乙胺，平衡至室温，用稀冰醋酸溶液调节溶液的pH为5．9±0．1，再用水稀释至刻度)。检测波长:240nm，流速:1．2ml/min，柱温:40℃，进样量:20μl。

首先记录空白基线，再记录色谱图。基线无任何波动，理论板数按甲氧苄啶计算不低于4000，两种成分峰分离度应符合规定。

2．2 溶液的制备

2．2．1 对照储备液的制备

取甲氧苄啶40mg，磺胺甲噁唑200mg，精密称定，同置于50ml容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，备用。

2．2．2 对照品溶液的配制

精密量取上述储备液2ml，置50ml容量瓶中，加流动相稀释至刻度，得浓度约为0．032mg/ml的甲氧苄啶和浓度约为0．16mg/ml的磺胺甲噁唑对照品溶液。

2．2．3 供试品溶液的配制

取样品10片，精密称定，得其平均片重，粉碎，精密称取此粉末适量(约相当于磺胺甲噁唑44mg)，置100ml容量瓶中，加适量甲醇，振摇，使充分溶解，再加入甲醇至刻度，摇匀，得供试品溶液。

2．3 线性关系

精密量取对照品储备液 0．2ml、0．4ml、0．6ml、0．8ml、1．0ml，分别置 10ml容量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，分别进样20μl，按上述色谱条件测定样品峰的面积。结果表明，甲氧苄啶对照品溶液浓度在3～15μg/ml范围内与峰面积呈线性关系，r=0．9995;磺胺甲噁唑对照品溶液浓度在15～75μg/ml范围内与峰面积呈线性关系，r=0．9993。

2．4 回收率实验

精密称取磺胺甲噁唑对照品150mg和甲氧苄啶对照品30mg置25ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀。分别量取对照品溶液和辅料溶液(按处方量精密称取混合辅料17．25mg，置50ml量瓶中，加甲醇适量，超过10min使溶解，加甲醇稀释至刻度摇匀，过滤，弃去初滤液，取续滤液，即得)，取0．5、1．0、1．5、2．0ml分别置 50ml量瓶中，加流动相置刻度，摇匀(每个浓度取2份)，分别进样20μl。另取上述对照品溶液2．5ml，置50ml量瓶中，加流动相置刻度，摇匀。作为对照品溶液，同法测定。按外标法以峰面积计算，即得。测定结果:磺胺甲噁唑平均回收率为 99．1%，RSD=0．58(n=8)，甲氧苄啶平均回收率为 98．9%，RSD=0．34%(n=8)。

2．5 重复性试验

精密称取同一批号(20090529)的样品6份，按“2．7”项下的方法对样品测定，结果磺胺甲噁唑与甲氧苄啶的含量平均值分别为97．4%和96．2%，RSD分别为 0．47%和 0．61%(n=6)。

2．6 稳定性试验

取对照品溶液与供试品溶液于室温下立即测定与放置4、6、8、10、12、24h 测定，其峰面积几乎无变化。对照品溶液磺胺甲噁唑峰面积的积分值的RSD为0．15%(n=6)、甲氧苄啶峰面积的积分值的RSD为0．42%(n=6)，供试品溶液磺胺甲噁唑峰面积的积分值的RSD为0．24%(n=6)、甲氧苄啶峰面积的积分值的RSD为0．49%(n=6)。说明本品的测定溶液在24h内稳定。