口蹄疫病毒3ABC抗体检测结果分析

侯生库

（青海省果洛州玛沁县兽医站，青海 玛沁814000）

口蹄疫（FMD）是一种高度接触性传染病，对国际贸易具有深远的影响，世界动物卫生组织（OIE）和联合国粮农组织（FAO）将口蹄疫列为A类烈性传染病之首。控制和消灭FMD策略包括疫苗免疫和屠宰可疑畜群。可疑畜群就是被FMDV感染动物和带毒动物。只有将感染动物和隐性带毒动物与疫苗免疫动物加以区分才能为FMD的控制和消灭提供科学的依据。3ABC－I－ELISA方法不但可以检测隐性感染动物而且可以区分感染动物和免疫动物。

1 材料与方法

1.1 待检血清 血清来源地多年用口蹄疫O型、亚洲Ⅰ型二价灭活疫苗春秋两季注射成年牦牛。秋季注苗后21d采血高倍离心后提取血清，达日46份，久治30份。

1.2 检测试剂 口蹄疫O型正向血凝抗原，批号：100408，来源于中国农业科学院兰州兽医研究所。检测牛血清专用的口蹄疫病毒非结构蛋白3ABC抗体检测ELISA试剂盒，由中国农业科学院兰州兽医研究所国家口蹄疫参考实验室研制，中国农业科学院兰州兽医研究所生产，批号：2010012208。

1.3 检测方法 按照青海省动物疫病实验室检测技术培训班教材中的O型口蹄疫正向间接血凝试验中的操作进行。按检测牛血清专用的口蹄疫病毒非结构蛋白3ABC抗体检测ELISA试剂盒使用说明书进行。

2 检测结果

2.1 正向间接血凝试验 在对照孔合格的前提下，待检血清免疫抗体效价达到1∶32呈现“＋＋”凝集判定为免疫合格，血清合格率为100%。

2.2 3ABC抗体检测ELISA试验 通过试验得到标准阴性血清OD值为0.488，标准阳性血清OD值为0.053 5。按照判定标准公式：样品OD值＜0.2（阳性OD值－阴性OD值）＋阴性OD值（即0.140 3）为阴性；样品OD值＞0.3（阳性OD值－阴性OD值）＋阴性OD值（即0.183 85）为阳性；它们之间为可疑。对76份为被检血清OD值进行了比对。结果共检出阳性血清4份，可疑血清14份，阴性血清58份。

3 结果分析

用两种试验检测免疫牛血清76份，正向间接血凝试验血清免疫合格率100%，说明被检血清来源的牛能够抵御FMDV的侵袭，不再是带毒动物。3ABC抗体检测ELISA试验检出阳性血清4份，阳性率5.2%，可疑血清14份，说明有4份血清来源的牛已经感染了FMDV或曾经感染过FMDV并产生了抗体；其他阴性血清来源的牛已被进行了疫苗预防，得到了合格的免疫抗体。

4 讨论及建议

对正向间接血凝试验阳性率为100%，血清通过口蹄疫病毒非结构蛋白抗体检测试验，出现阳性血清4份，其原因：一是注射疫苗后感染了FMDV；二是长期注射疫苗且剂量过大，疫苗中残留的非结构蛋白抗体有所显现；三是血清来源于感染FMDV后已消灭了病毒的动物；四是动物正处于隐性感染期。建议加强本地区检疫防疫工作，排查FMDV的带毒动物，严防对传染源留有死角。另一方面改进血清学试验，使其能够可靠地确定动物是否已感染了FMD病毒，不管它们是否注射过疫苗。最好还应当能把感染后已经消灭了病毒的动物与形成持续性感染的动物区分开。