枯草芽孢杆菌对地面平养和笼养肉仔鸡生产性能及血液指标的影响

程志斌 吴淑云 张红兵 杨建发 李晓珍 苏子峰

（1.云南农业大学，云南昆明 650201；2.陕西省铜川市动物疫病预防控制中心，陕西铜川 727031；3.云南西南集团，云南昆明 650224；4.大理学院农学与生物科学学院，云南大理 671003）

近年来已有很多动物试验和文献综述显示，枯草芽孢杆菌(Bacillus Subtilis)是一种替代饲用抗生素使用的安全畜禽饲用微生态制剂，具有广阔的商业价值和潜力(解广勤等,2011；张博等,2011；张红兵等，2011；卞国顺等，2012；侯玉洁等，2012；杨光宇，2012；周映华等，2012a、b)。本课题组前期针对我国云南省肉鸡养殖业相对落后的大量地面平养的实际情况（程志斌等，2011a；程志斌等，2012a、b；苏子峰等，2012），开展了日粮添加枯草芽孢杆菌对不同饲养方式（地面平养或笼养）肉鸡生长性能影响的初步研究（廖国周等，2011），结果显示，无论是地面平养还是笼养方式，枯草芽孢杆菌替代抗生素对改善肉鸡的生长性能具有良好效果。良好的生长性能取决于畜禽对饲料营养物质的充分消化吸收与高效代谢利用（Cheng等，2006a；刘影等，2010；程志斌等，2011b、c、d）。已有报道证明，枯草芽孢杆菌能够补充畜禽肠道多种内源酶不足（解广勤等，2011；黄璠等，2012；侯玉洁等，2012），综合提高肉鸡对饲料营养物质的消化与利用（张博等，2011；卞国顺等，2012；杨光宇，2012）。然而，过去的试验结果和报道大多是在模拟肉鸡现代化规模养殖的笼养生产条件下获得。本课题组发现（廖国周等，2011），以地面平养为代表的肉鸡传统散养模式，与现代化规模养殖的笼养模式相比，肉鸡的生产性能和健康状况差异很大。在提倡环保养殖与安全饲料及饲料添加剂使用日益高涨的今天（程志斌等，2011e、f、g），以我们的前期工作为基础，深入研究枯草芽孢杆菌改善肉鸡、尤其是地面平养肉鸡生长性能的作用机理十分必要，这对指导当前云南省地面平养肉鸡的生产实际有重要意义和经济价值。因此，本试验重点研究枯草芽孢杆菌饲料添加剂对地面平养和笼养肉仔鸡生长性能、养分利用率及血液生化指标的影响。

1 材料与方法

1.1 试验动物与分组

本试验选择1日龄新出生的罗斯 308（ROSS 308）肉仔鸡240只，按照饲养方式（地面平养或笼养）和枯草芽孢杆菌的添加不同，分成4个试验处理组，试验处理组设计见表1。每个处理组设6个重复，每个重复10只，公母各半。

表1 试验处理组设计

1.2 试验日粮

参考农业部标准《鸡饲养标准（NY/T 33—2004）》，并结合云南省肉鸡养殖实际情况，配制1～21日龄肉仔鸡试验饲料，基础日粮配方及营养水平见表2。处理组1和处理组2肉仔鸡日粮添加饲用抗生素金霉素，并遵守农业部发布的《饲料药物添加剂使用规范》；处理组3和处理组4肉仔鸡日粮替代抗生素使用枯草芽孢杆菌饲料添加剂，添加量为5×1011cfu/kg全价日粮，枯草芽孢杆菌由云南师范大学生命科学学院提供。试验肉仔鸡饲料中均不使用饲用植酸酶，试验饲料在65℃低温加工成颗粒饲料，由云南西南集团(云南西尔南饲料有限公司)生产。

表2 试验基础日粮配方及营养水平

1.3 饲养管理

笼养采用三层重叠式肉鸡笼，水泥地面平养为每个重复一个小圈,放置食料桶和饮水桶。所有试验鸡均饲养于同一有窗鸡舍内,专人负责饲养与记录。自然光照辅以人工照明,光照时间22 h。按常规免疫程序进行免疫。试验在云南农业大学试验鸡场进行，从2012年5月3日开始，试验周期21 d。

1.4 测定指标

1.4.1 生长性能

测定试验肉仔鸡出生重和末重、饲料消耗，统计死亡肉仔鸡数量，计算肉仔鸡平均日增重、平均日采食量、料重比（饲料转化效率）等生长性能指标。

1.4.2 饲料养分利用率

采用Cr2O3指示剂法测定肉仔鸡对饲料营养物质养分的表观代谢率，具体操作过程与分析测定方法参考丁雪梅等（2011）报道方法：试验肉仔鸡15～21日龄进行代谢试验，期间试验日粮添加0.4%的Cr2O3指示剂。预饲4 d，随后3 d是正式试验期，每天定时收集部分排泄物，用于分析代谢能、粗蛋白、粗脂肪、粗纤维、钙、磷的表观利用率。

1.4.3 血液生化指标

试验肉仔鸡21日龄早晨空腹称重后，每个试验重复组随机抽取2只健康肉仔鸡(1公、1母)，心脏采血后制备血清。使用全自动生化分析仪(Olympus Au 600型)测定相关血液生化指标，分析测定在云南省动物营养与饲料科学重点实验室完成。

1.5 数据处理

试验数据采用双因素（因素1：枯草芽孢杆菌；因素2：饲养方式）方差分析，分别比较枯草芽孢杆菌、饲养方式及其互作对肉仔鸡生长性能、养分利用率及血清生化指标的影响。同时，4个处理组间各测定指标进行多重比较分析。数据统计显著性均表示为P＜0.05。

2 结果

2.1 枯草芽孢杆菌对地面平养和笼养肉仔鸡生长性能的影响（见表3）

表3 枯草芽孢杆菌对地面平养和笼养肉仔鸡生长性能的影响

表3结果显示：枯草芽孢杆菌显著影响（P＜0.05）肉仔鸡平均日增重、料重比指标。处理组4显著优于（P＜0.05）处理组1，处理组2和处理组3之间差异不显著（P＞0.05）。末体重、平均日采食量指标，所有处理组之间无显著差异（P＞0.05）。

2.2 枯草芽孢杆菌对地面平养和笼养肉仔鸡饲料养分表观代谢率的影响（见表4）

表4结果显示：枯草芽孢杆菌显著影响（P＜0.05）肉仔鸡对饲料粗蛋白的表观代谢率，饲养方式显著（P＜0.05）影响代谢能的表观利用率。2个指标均显示：处理组4肉仔鸡显著大于（P＜0.05）处理组1，处理组2和处理组3之间差异不显著（P＞0.05）。

表4 枯草芽孢杆菌对地面平养和笼养肉仔鸡饲料养分表观代谢率的影响（%）

2.3 枯草芽孢杆菌对地面平养和笼养肉仔鸡血清生化指标的影响（见表5）

表5结果显示：枯草芽孢杆菌、饲养方式及其互作显著影响肉仔鸡血清白蛋白、尿酸的浓度(P＜0.05)。肉仔鸡血清白蛋白浓度指标，处理组4和处理组2之间无显著差异(P＞0.05)，且二者都显著大于（P＜0.05）处理组1。血清尿酸浓度指标，处理组4肉仔鸡的尿酸浓度最低（P＜0.05），处理组 1最高（P＜0.05），处理组 2和处理组3之间差异不显著（P＞0.05）。枯草芽孢杆菌显著（P＜0.05）影响肉仔鸡的血糖浓度，处理组4血糖浓度显著低于（P＜0.05）处理组1，处理组2和处理组3之间差异不显著（P＞0.05）。

表5 枯草芽孢杆菌对地面平养和笼养肉仔鸡血清生化指标的影响

3 讨论

3.1 枯草芽孢杆菌对地面平养和笼养肉仔鸡生长性能的影响

在所有处理组肉鸡采食量无显著差异基础上，枯草芽孢杆菌显著影响肉仔鸡的平均日增重和料重比（见表3），其中以笼养方式并采食添加枯草芽孢杆菌日粮的处理组4肉仔鸡生产性能最佳。这一结果与我们的前期试验（廖国周等，2011）结果一致，说明枯草芽孢杆菌替代抗生素对改善肉仔鸡的生长性能具有良好效果。

采用地面平养方式的处理组3肉鸡虽然也采食添加枯草芽孢杆菌的饲料，但处理组3肉鸡的料重比指标与饲用抗生素组的处理组1和处理组2相比无显著差异（P＜0.05），但数据统计分析结果显示有一定的改善趋势（0.05＜P＜0.1），且试验期处理组 3 肉仔鸡的死亡率较低。这些结果与我们的前期试验（廖国周等，2011）报道一致，说明在传统肉鸡地面平养方式下，枯草芽孢杆菌具有替代饲用抗生素的潜能。

3.2 枯草芽孢杆菌对地面平养和笼养肉仔鸡饲料养分利用率的影响

肉鸡良好的生长性能取决于对饲料营养物质的充分消化、吸收与利用（Kalmendal等，2009；程志斌等，2011e、f、g），采用 Cr2O3指示剂法测定的饲料养分表观代谢率能够客观地反映肉鸡对日粮营养的消化与利用状况（丁雪梅等，2011）。本试验采用了“玉米-豆粕-鱼粉”典型日粮（见表2），排除了基础饲料原料对本试验的干扰。表4结果显示：枯草芽孢杆菌显著影响肉仔鸡对饲料粗蛋白的利用率，处理组4肉仔鸡的饲料粗蛋白利用率最高，显著大于处理组1（P＜0.05）；处理组2和处理组3之间差异不显著。这些结果综合说明：枯草芽孢杆菌有利于提高肉仔鸡对饲料蛋白的利用率，增加饲料蛋白质的摄入量，从而提高肉仔鸡生长性能；且枯草芽孢杆菌在笼养肉仔鸡上的使用效果明显优于地面平养肉仔鸡。以上得到的结论也印证了过去关于枯草芽孢杆菌具有补充或维持动物肠道多种消化酶，提高营养利用率而改善畜禽生长性能的机理（卞国顺等，2012；黄璠等，2012；周映华等，2012a、b；杨光宇，2012）。

本次试验没有发现枯草芽孢杆菌对饲料代谢能、粗脂肪、粗纤维、磷等养分利用率的改善效果，其原因可能与本次试验的日粮营养水平一致以及低纤维、高消化率的优质基础饲料原料（玉米、豆粕、鱼粉）选择有关。此外，饲养方式显著影响肉仔鸡饲料代谢能的表观利用率（见表4），总体而言，笼养方式的处理组4和处理组2肉仔鸡代谢能的表观利用率数值大于地面平养的处理组1和处理组3的肉仔鸡。显然，这与肉鸡生活空间不同、运动造成的能量消耗差异有关。当然，我们也不排除地面平养肉鸡由于疫病、应激等因素造成的能量额外消耗，这可以从表3鸡的死亡率初步判断。为此，我们进一步分析反映肉仔鸡营养物质代谢利用的主要血液生化指标(见表5)。

3.3 枯草芽孢杆菌对地面平养和笼养肉仔鸡血清生化指标的影响

血液生化指标是反映畜禽体内物质代谢变化和某些组织器官机能状态变化的指标，可以作为机体营养代谢利用、应激、健康状态的综合表征（姚浪群等，2003；Cheng，2006b；Woyengo 等,2010；成廷水等,2010；李芳林等，2012）。血清总蛋白包括白蛋白与球蛋白，血清白蛋白由肝脏合成，是机体蛋白质营养需求的主要来源，用于修补组织器官和提供能量（姚浪群等，2003；Cheng，2006b；李芳林等，2012）。此外，血清白蛋白还具有维持血浆渗透压及作为其他营养物质的载体等多种功能（姚浪群等，2003；Cheng，2006b；Woyengo等，2010）。因此，测定血清白蛋白的浓度可以作为畜禽蛋白质营养摄入和代谢利用的主要指标之一（姚浪群等，2003；李芳林等，2012）。表5结果显示：枯草芽孢杆菌显著影响肉仔鸡血清白蛋白浓度，处理组4肉仔鸡血清白蛋白浓度为12.1 g/l,显著高于处理组1（10.4 g/l），这与处理组4肉鸡对饲料蛋白利用率大于处理组1的结果（见表4）相符。由此可见，笼养条件下，添加枯草芽孢杆菌的处理组4肉仔鸡摄入了更多的蛋白质，反映在血清白蛋白浓度适度较高，且主要用于生长发育，促使处理组4肉仔鸡获得更好的生长性能。

尿酸是禽类动物体内氨基酸及核苷酸等含氮化合物代谢的终产物,也是禽类动物排出体内多余氨,维持机体正常机能的重要方式之一(陈家祥等,2011)。日粮粗蛋白水平、日粮氨基酸平衡状况、动物的生理代谢、健康状况等多种因素综合影响禽类血清尿酸浓度(陈家祥等，2011)。一般认为，较低血清尿酸浓度表征禽类对饲料蛋白质和氨基酸的良好代谢利用，有利于禽类的生长发育和健康(陈家祥等，2011)。本试验在日粮粗蛋白、氨基酸等营养水平和饲养管理相同的前提下，处理组4肉仔鸡的血清尿酸浓度为38.6mg/l，较处理组1肉鸡血清尿酸浓度52.5mg/l有了较大幅度地降低（见表5）；结合处理组4肉仔鸡的饲料蛋白表观代谢率最高结果（见表4），综合说明：枯草芽孢杆菌不仅使肉仔鸡提高对饲料蛋白的消化率，而且减少了氮（尿酸）排放而增加机体蛋白沉积，饲料蛋白的综合利用率的提高促进了肉鸡生长性能改善。此外，地面平养方式饲养的处理组3和处理组1肉仔鸡血清尿酸浓度相比，采食添加了枯草芽孢杆菌日粮的处理组3肉仔鸡显著低于处理组1（见表5）。这一结果与处理组3肉仔鸡的料重比、饲料蛋白表观代谢率等指标，具有优于处理组1肉仔鸡的趋势相符。因此，综合以上分析：无论是传统的肉鸡地面平养方式还是现代的规模化肉鸡笼养方式，添加优质枯草芽孢杆菌饲用微生态制剂，可以有效替代饲用抗生素，改善肉仔鸡生长性能，其作用机理与提高饲料蛋白的消化和代谢利用率有关。

血清中葡萄糖、甘油三酯和总胆固醇综合反映了畜禽对饲料蛋白、糖类、脂质营养物质的消化及其在机体内的代谢利用（李焰等，2007；陈家祥等，2011；李芳林等，2012），这些指标易受到日粮营养水平（尤其是氨基酸种类、含量）、饲料原料选择（谷物、油脂等能量饲料）、血清激素水平（主要是甲状腺素、胰岛素、胰高血糖素、生长激素、糖皮质激素等）、肝脏脂质相关代谢酶（脂肪酸合成酶、乙酰辅酶A羧化酶、激素敏感性甘油三酯脂酶、肝脂酶、脂蛋白脂酶等）、动物日龄、健康状况等多种因素影响（李焰等，2007；李芳林等，2012）。表5结果显示：枯草芽孢杆菌显著影响肉仔鸡血糖浓度，处理组4肉仔鸡血糖浓度为11.2 mmol/l，低于处理组1肉仔鸡的12.9 mmol/l。我们推测，在日粮营养水平一致和良好饲养管理条件下，由于枯草芽孢杆菌增加了饲料蛋白和氨基酸的摄入量，血液中较高浓度的蛋白和(或)氨基酸，激发了甲状腺素和(或)胰岛素分泌。经典的动物生理学和内分泌学知识提示我们，这2种激素均有增加血清蛋白向机体组织沉积，以及适当降低血糖浓度的作用，以符合机体组织正常对营养物质及能量的代谢需求（姚浪群等，2003）。当然，这一推测有待于进一步试验分析相关指标。

此外，本试验没有发现枯草芽孢杆菌对肉仔鸡血清甘油三酯及总胆固醇浓度的影响，这可能与肝脏脂质相关代谢酶的活性有关。

4 小结

本试验证明，无论是传统的肉鸡地面平养方式还是现代的规模化肉鸡笼养方式，添加微生态制剂枯草芽孢杆菌，可有效替代饲用抗生素，改善肉仔鸡生长性能，其作用机理主要是提高饲料蛋白质的利用率。

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