HPLC法同时测定地呋乳膏中呋喃西林和醋酸地塞米松的含量

尹怀文，罗晓梅(遂宁市中心医院药剂科，四川遂宁629000)

地呋乳膏系医院常用制剂，以呋喃西林和醋酸地塞米松为主药，为局部抗菌药，用于神经性皮炎、慢性湿疹、虫咬性皮炎及瘙痒性皮肤病的治疗，在临床上使用较为广泛。由于目前尚未见同时测定呋喃西林和醋酸地塞米松含量的方法报道，且其处方中基质成分复杂，故笔者参考有关文献[1-3]，建立以高效液相色谱(HPLC)法同时测定地呋乳膏中上述2个组分含量的方法。经过试验，证实该方法快速、简便，重复性好，结果可靠，可用于地呋乳膏的质量控制。

1 仪器与试药

LC-20 AD型HPLC仪，包括LC-20 AD型泵、SIL-20 A型自动进样器、SPD-M20 A型二极管阵列检测器(190～800 nm)(日本岛津公司)；AUW 220 D型双量程分析天平(日本岛津公司，感量:0.1 mg/0.01 mg)。

呋喃西林对照品(苏州第五制药厂有限公司，批号:20110205)；醋酸地塞米松对照品(中国食品药品检定研究院，批号:100122-200805)；地呋乳膏(自制，批号:110701、110708、110712、110715，规格:每10 g含呋喃西林20 mg与醋酸地塞米松5 mg)；甲醇(美国天地公司，色谱纯)；水为自制重蒸馏水。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

Agilent TC-C18柱(4.6 mm×250 mm，5 μm)；流动相:甲醇-水(60∶40)；流速:0.8mL·min－1；检测波长:240nm；柱温:30℃；进样量:10 μL。

2.2 溶液的配制

混合对照品溶液:取呋喃西林、醋酸地塞米松对照品适量，精密称定，加流动相溶解并稀释制成每1 mL约含呋喃西林40 μg、醋酸地塞米松10 μg的混合溶液，即得。

供试品溶液:取本品适量(约相当于呋喃西林2 mg、醋酸地塞米松0.5 mg)，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50 mL，称定重量，置70℃水浴中加热至完全溶解，放冷至室温，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，置冰浴中放置1 h，滤过，取续滤液，即得。

空白对照溶液:按地呋乳膏处方制备不含呋喃西林和醋酸地塞米松的阴性样品，再按照供试品溶液的制备方法制备空白对照溶液。

2.3 空白干扰试验

按“2.1”项下色谱条件，取呋喃西林和醋酸地塞米松混合对照品溶液、供试品溶液、空白对照溶液各10μL，分别注入HPLC仪，记录色谱，见图1。由图1可知，供试品溶液色谱图中在与对照品溶液色谱图主峰相应的位置上有相同的色谱峰，而空白对照溶液色谱图中在与对照品溶液色谱图主峰相应的位置上无相同的色谱峰，说明空白对照溶液无干扰。

2.4 线性关系考察

精密称取醋酸地塞米松对照品12.55 mg，置于10 mL量瓶中，用流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品贮备液Ⅰ。精密称取呋喃西林对照品10.11 mg，再精密量取对照品贮备液Ⅰ1 mL，置于50 mL量瓶中，用流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品贮备液Ⅱ。精密量取对照品贮备液Ⅱ0.5、1、2、3、5 mL，分别置于10 mL量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，配制成系列溶液。分别取上述系列溶液及对照品贮备液Ⅱ各10 μL，进样测定。以峰面积(A)为纵坐标，浓度(C)为横坐标，绘制标准曲线，得呋喃西林回归方程为A＝43203C－18997(r＝0.9999，n＝6)，醋酸地塞米松回归方程为A＝104101C－14183(r＝0.9999，n＝6)。结果表明，呋喃西林和醋酸地塞米松检测浓度分别在10.11～202.20μg·mL－1和2.51～50.20 μg·mL－1范围内与峰面积积分值呈良好的线性关系。

2.5 精密度试验

精密量取“2.2”项下的对照品溶液，连续进样5次测定。结果，呋喃西林峰面积的RSD＝0.71%，醋酸地塞米松峰面积的RSD＝0.48%，表明仪器精密度良好。

2.6 重复性试验

取同一批(批号:110701)样品6份，按照“2.2”项下方法平行处理样品并测定。结果，呋喃西林含量为标示含量的99.11%，RSD＝0.83%；醋酸地塞米松含量为标示含量的100.50%，RSD＝0.49%，表明该方法重复性良好。

2.7 稳定性试验

取“2.2”项下的供试品溶液1份，于室温(20～25℃)下放置，在不同时间点(0、2、4、8、12、16、24h)分别进样测定。结果，呋喃西林峰面积的RSD＝0.91%，醋酸地塞米松峰面积的RSD＝1.57%，说明供试品溶液在24 h内含量保持稳定。

2.8 加样回收率试验

取已知含量的地呋乳膏(批号:110701)粉末9份，每份约0.5 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，分别精密加入呋喃西林、醋酸地塞米松混合对照品溶液(浓度分别为0.21、0.055 mg·mL－1)4、5、6 mL，各3份，混合均匀后再按“2.2”项下方法制备供试品溶液，测定其含量并计算加样回收率，结果见表1。

表1 加样回收率试验结果(n＝9)Tab 1Results of recovery tests(n＝9)

2.9 样品含量测定

取不同批号的地呋乳膏，按“2.2”项下方法制备供试品溶液，测定呋喃西林和醋酸地塞米松的含量，结果见表2。

表2 样品含量测定结果(n＝5)Tab 2 Content determination of samples(n＝5)

3 讨论

从呋喃西林和醋酸地塞米松的紫外吸收光谱图可知，呋喃西林分别在波长260、371 nm处具有最大吸收，醋酸地塞米松在波长240 nm处具有最大吸收，由于处方中呋喃西林的量约为醋酸地塞米松的4倍，且根据图谱数据结果显示，呋喃西林色谱峰明显高于醋酸地塞米松色谱峰。为提高醋酸地塞米松的检测灵敏度，使2个成分色谱峰匹配，试验选择240 nm作为紫外检测波长，以优化2个成分的响应值。

[1-3]，本试验最终选用的流动相为甲醇-水(60∶40)，组成简单，呋喃西林与醋酸地塞米松2个主成分峰之间分离度良好。同时，发现2个主成分峰之间有一色谱峰，保留时间约为8.2min，经研究证实为基质中羟苯乙酯的色谱峰。此峰与2个主成分峰分离度良好。

使用SPD-M20 A型二极管阵列检测器对样品峰的起点、顶点和终点进行3点峰纯度检查。结果，呋喃西林与醋酸地塞米松的峰纯度因子均大于0.9999，表明两峰均为纯峰，辅料及杂质对测定无干扰。

留样观察中发现，制剂中醋酸地塞米松性质不稳定，贮存时样品中醋酸地塞米松含量有降低趋势，经研究分析是制剂中醋酸地塞米松分解成地塞米松的缘故。因此，该制剂应注意低温避光保存，并且留样观察含量测定结果，制定合理的有效期。

参考文献

[1]倪晓霞，郑绍衷.高效液相色谱法测定醋酸地塞米松乳膏中醋酸地塞米松含量[J].海峡药学，2010，22(11):64.

[2]曲彩红，苏向阳，张平，等.高效液相色谱法测定复方尿素地米乳膏中醋酸地塞米松的含量[J].儿科药学杂志，2010，16(1):47.

[3]胡毅坚，吴春芳.高效液相色谱法测定复方醋酸地塞米松霜中2组分的含量[J].中国药房，2006，17(20):1585.