不同企业非洛地平片的体外溶出度研究*

朱静毅，尹 萌，孟月兰

非洛地平是对血管有较高选择性作用的二氢吡啶类钙通道拮抗剂，可通过减少外周血管阻力而降低动脉血压，在临床上用于高血压、心绞痛、充血性心衰的防治，因其疗效确切，不良反应较轻，且对各期高血压均有效，临床应用十分广泛，在国外被作为老年高血压患者的首选药。目前，全国范围内非洛地平片的生产企业7家，药品批准文号11个，各药厂因生产工艺不同等因素，其产品内在质量水平亦不相同。

溶出度试验是评价口服固体制剂内在质量的一个重要手段，多种pH值溶出介质中溶出曲线的测定是先进国家药物评审评价机构评价口服固体制剂内在质量的一个重要环节。由于非洛地平在丙酮、甲醇或乙醇中易溶，在水中几乎不溶，《中国药典》2010年版选用0.3%十二烷基硫酸钠溶液为溶出介质［1］。为了进一步模拟人体内环境，本实验参照日本“药品品质再评价”工程在溶出度研究中所拟定的模拟人体消化道内体液的4种基本介质［2］，采用《中国药典》2010年版方法，对5家药厂生产的非洛地平片的溶出度进行测定，考察不同药厂药品的内在质量，为临床用药提供参考。

1 仪器、试剂与试药

天大天发RCZ-8B型全自动取样溶出系统;日本岛津LC20AB高效液相色谱仪，色谱柱：AlltimaTMC18(150 mm ×4.6 mm，5 μm);AG135 型电子分析天平(瑞士梅特勒公司)。

甲醇(色谱纯)，乙腈(色谱纯)，其他试剂均为分析纯;水为超纯水;对照品：非洛地平(由中国药品生物制品检定所提供，批号130452-200902);5家药厂的非洛地平片均为市售品，见表1。

2 方法与结果

2.1 色谱条件与系统适应性 依照高效液相色谱法(附录ⅤD)测定，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以甲醇-乙腈-水(50∶15∶35)为流动相;流速为1.0 ml/min;检测波长为238 nm;进样量20 μl。理论板数按非洛地平峰计算不低于3 500，非洛地平与相邻杂质峰的分离度应符合要求。

表1 5家不同药厂的非洛地平片

2.2 测定方法的建立及验证

2.2.1 溶出介质的配制 溶出介质Ⅰ(水)：超纯水(含0.02%吐温 -80)。溶出介质Ⅱ(pH 1.2盐酸溶液)：取氯化钠2.0 g，加水适量使溶解，加盐酸7 ml，再加水稀释至1 000 ml，即得(含0.02%吐温-80)。溶出介质Ⅲ(pH 4.0醋酸盐缓冲液)：0.05 mol/L醋酸溶液 -0.05 mol/L 醋酸钠溶液(16.4∶3.6)(含 0.02%吐温-80)。溶出介质Ⅳ(pH 6.8磷酸盐缓冲液)：取磷酸二氢钾3.4 g和无水磷酸氢二钠3.55 g，加水适量使溶解后，定容至1 000 ml，再用水稀释1倍，即得(含0.02%吐温-80)。溶出介质Ⅴ：0.3%十二烷基硫酸钠溶液(见《中国药典》2010年版)。

2.2.2 标准曲线的制备 称取非洛地平对照品约10 mg，精密称定，用甲醇定量稀释制成20 μg/ml的对照品储备液。精密量取一定体积对照品储备液，分别用上述 5 种溶出介质稀释制成 0.2、1.0、2.0、5.0、10.0和20.0 μg/ml的标准溶液。按上述色谱条件分别测定，得不同溶出介质下的标准曲线方程，结果在0.2～20.020 μg/ml范围内线性关系良好。在介质Ⅰ～介质Ⅴ中的回归方程分别为：A=33 972 C-487.05(r=1.000 0)、A=33 856 C-1 032.19(r=0.999 9)、A=342 58 C-719.42(r=1.000 0)、A=34 737 C-629.53(r=1.000 0)和 A=35 564 C-231.82(r=1.000 0)。

2.2.3 精密度试验 取“2.2.2”项下各介质制备的浓度为 0.2、5.0 和 20.0 μg/ml的非洛地平对照品溶液，分别重复进样6次，测定峰面积，RSD均＜1.0%。

2.2.4 稳定性试验 取“2.2.2”项下各介质制备的浓度为 0.2、5.0 和 20.0 μg/ml的非洛地平对照品溶液，分别在0、1、2、4、8、12 和 24 h 进样，测定峰面积，结果表明5种溶液在24 h内稳定，RSD均＜2.0%。

2.2.5 回收率试验 取已知含量的各厂家非洛地平片10片(2.5 mg规格取20片)，精密称定，研细，精密称取适量，分别用5种介质溶解并定容成10 μg/ml的样品溶液。分别取对照品储备液2.0、2.5和3.0 ml至10 ml量瓶中，各精密加入样品溶液5 ml，用相应介质稀释至刻度，制备成低、中、高3种浓度的供试品溶液，每种浓度制备3份。照“2.1”项下方法测定，计算加样回收率，结果A厂非洛地平回收率均在99.02% ～101.18%，B厂非洛地平回收率均在 98.25% ～101.83%，C厂非洛地平回收率均在 98.57% ～101.69%，D厂非洛地平回收率均在 98.31% ～101.24%，E厂非洛地平回收率均在 98.33% ～101.07%，RSD 均 ＜2.0%。

2.3 溶出度测定及结果 分别取“2.2.1”项下的溶出介质 1 000 ml，采用《中国药典》方法［1］，转速为 50 r/min，将5 批样品随机取样 6 片，分别在 5、10、15、30、45、60、90、120、180、240 和 360 min 吸取溶出液 3 ml，同时补充同体积空白溶出介质，其间，当连续两点溶出率均＞85%，且差值在5%以内时，试验则可提前结束。照“2.1”项下方法测定，计算不同时间的累积溶出率，溶出曲线见图1。

2.4 数据处理及分析 采用美国FDA推荐使用的相似因子法［3-5］。从溶出曲线可以看出，A厂家在上述5种介质中均具有较高和较稳定的溶出率，故将其作为参比制剂，评价其余4家药厂产品的相似性。若供试制剂与参比制剂的溶出曲线间相似因子50≤f2≤100，可判断为两者相似。统计分析结果见表2。

表2 其他各药厂制剂的值

由表2可以看出，C药厂制剂与A药厂制剂在5种介质中溶出曲线均相似，D药厂制剂与A药厂制剂在参照日本“药品品质再评价”采用的4种介质方法下均相似，但在《中国药典》2010年版规定的方法下不相似，B药厂和E药厂制剂与A药厂制剂仅在其中一个溶出介质中相似，其余均不相似，说明A药厂、C药厂和D药厂生产的非洛地平片质量水平相似，但B药厂和E药厂与上述3个药厂制剂的质量水平有显著差异。

图1 5家药厂的非洛地平片在不同溶出介质中的溶出曲线

3 讨论

3.1 增溶剂种类及浓度的选择，参考日本橙皮书，非洛地平在pH 1.2盐酸溶液、pH 4.0醋酸盐缓冲液、pH 6.8磷酸盐缓冲液和水中的溶解度(37℃)分别为0.000 72、0.000 79、0.000 68 和 0.000 58 mg/ml，在上述四种溶液分别含 0.5%吐温 -80中的溶解度(37 ℃)分别为 0.19、0.22、0.21 和 0.22 mg/ml。故本实验选择吐温-80作为增溶剂，同时，分别加入不同浓度吐温 -80(0.02%、0.05%、0.1%、0.5%)对样品进行测试，结果表明加入0.02%和0.05%吐温-80结果相似，所以选择0.02%吐温-80作为溶出介质。

3.2 由不同溶出介质的溶出曲线可以看出：按照《中国药典》2010年版的方法，除D药厂外，其余药厂的非洛地平片在45 min时的累积溶出量均超过80%;参照日本“药品品质再评价”采用的4种介质，各药厂的非洛地平片在45 min时的累积溶出量仅为30%～60%，远远低于国外产品(45min溶出量均达80%以上)的溶出量，说明国外生产的非洛地平片制剂工艺与国产药品不相同，并不适于作为国产非洛地平片的参比制剂。故本试验采用国产制剂之间相似度的比较，以A药厂作为参比制剂，考察各企业产品的相似程度。

3.3 有文献报道［6］，采用乙腈-甲醇-磷酸盐缓冲液为流动相分别考察4家不同药厂非洛地平片在参照日本“药品品质再评价”采用的4种溶出介质中的体外溶出情况，并与《中国药典》2005年版规定的非洛地平片溶出方法进行比较，结果4个厂家非洛地平片在《中国药典》(2005年版)方法下均相似，在其他介质中均不相似。通过实验比较可以看出，《中国药典》2010年版规定的非洛地平片溶出方法更为合理，色谱系统更为简单，且该溶出介质对各企业产品溶出度有较好的区分作用。

3.4 按照《中国药典》2010年版的方法，D药厂的非洛地平片在45 min时的累积溶出量仅为55%，主要由于该企业产品检验标准为《国家食品药品监督管理局新药转正标准》第三十八册，溶出度测定以“0.1 mol/L盐酸溶液-异丙醇(3∶2)”为溶出介质，异丙醇的使用，提高了药物的溶解度，增加了药物的溶出速率，但建议该厂家改进生产工艺，按照新版药典标准检验。

3.4 非洛地平口服吸收完全并经历广泛的首过代谢，主要由肝脏代谢、消除，这种代谢为一级动力学过程，代谢速率与其血浆浓度成正比。因此，临床应用非洛地平产品时，应根据不同产品的不同动力学特征结合患者的实际病情选择应用，包括价格因素，保证用药的安全、有效、经济。

1 中国药典.二部.2010：454，455

2 谢沐风.简介日本“药品品质再评价”工程——溶出度研究系列.中国药品标准，2005，6(6)：42

3 俞慧群，卓开华.6厂家多潘立酮片的溶出度考察.中国药师，2010，13(1)：74

4 江莹，江明，胡敏，等.不同厂家艾司唑仑片的体外溶出度比较.医药导报，2011，30(3)：358

5 吴啉，李慧义，丁丽霞，等.国产尼莫地平片的溶出度比较.药物分析杂志，2009，27(3)：195

6 戴幼琴，毛荣荣.4家药厂的非洛地平片溶出度比较.药学实践杂志，2009，27(3)：195