丽江玛咖不同提取物对小鼠性行为及性激素的影响
2012-08-03薛润光顾鉴秋
曹 东,薛润光,顾鉴秋
(1.云南中医学院,云南 昆明 650500;2.云南省农业科学院高山经济植物研究所,云南 丽江 674100)
玛咖(Maca)属于十字花科植物玛咖独行菜(Lepidium meyenii Walp.)一年生草本植物,原产于秘鲁海拔3500m以上的安第斯山区。数千年来,作为当地土著居民的重要食物来源之一,因其具有丰富的营养价值和药用功效,尤其是在增强精力和生育力等方面的功能,被人们视为安第斯山神赐予的珍贵礼物。以玛咖为主要原料的保健品受到了世界各国的广泛青睐。秘鲁玛咖主要含玛咖酰胺、玛咖烯、生物碱、芥子油苷、挥发油成分、类固醇物质及多种氨基酸,药理研究表明,秘鲁玛咖能增强雄性性行为及增加精子数量,抗应激,调节内分泌、提高免疫、抗肿瘤、预防前列腺肥大、抗骨质疏松及增强营养等作用[1~2]。我省丽江和会泽两地因海拔和地理环境与玛咖原产地相似,玛咖的种植已获得成功[3],云南省农业科学院高山经济植物研究所在海拔4000m左右的丽江高山地区,于2003年引种玛咖成功,至今已有8年的历史,目前丽江玛咖已有片剂、酒等上市,但其生药学、化学、药理等基础研究,仍属空白。本实验用丽江玛咖为原料,筛选其增强雄性动物性行为的主要活性部位,为进一步深入研究其化学成分和药效之间的相关性,为开发利用丽江玛咖打基础。
1 材料
1.1 药物与试剂 丽江玛咖(Lepidium meyenii Walp.)饮片,由云南省农业科学院高山经济植物研究所提供;丽江玛咖石油醚、乙酸乙酯、正丁醇和水提取物,自制;万艾可:辉瑞制药有限公司,批号:95883011;复方锁阳口服液(每毫升相当于生药0.6g),由陕西关爱制药有限公司提供(批号:20081101);苯甲酸雌二醇,上海通用药业股份有限公司,批号:090502;石油醚,分析纯,广东华光化学厂有限公司,批号:20090911;乙酸乙酯,分析纯,上海申博化工有限公司,批号:00912001;正丁醇,分析纯,上海申博化工有限公司,批号:090706101;睾丸酮试剂盒,北京北方生物技术研究所,批号:110120;雌二醇试剂盒,北京北方生物技术研究所,批号:110120。
1.2 仪器 旋转蒸发仪:A-1000S日本EYELA公司;AUW220型电子天平(上海精密科学仪器有限公司);LG-2.4A高速离心机,北京医用离心机厂;微量移液器,上海大龙医疗设备有限公司;SN-695B型智能放免γ测量仪,上海原子核研究所日环仪器一厂。
1.3 动物 昆明种小鼠,清洁级,雌雄各半,体重18~22g,四川省医学科学院实验动物研究所动合格证号:SCXK(川)2008-14;
2 方法
2.1 对雄性小鼠性行为的影响 参照文献方法[4],选择雄性性成熟小鼠正常饲养,随机分为对照组(0.9%生理盐水)、万艾可组(0.013g/kg)、复方锁阳口服液组(12g生药/kg)、石油醚提取物组(13g生药/kg)、乙酸乙酯提取物组(13g生药/kg)、正丁醇提取物组(13g生药/kg)、水提取物组(13g生药/kg),除万艾可组于试验前1h灌胃给药外,其余各组均连续灌胃给药28d,灌胃容积均为0.2mL/10g。实验前48h雌鼠皮下注射苯甲酸雌二醇(0.02mg/只),使动情期相同,试验于晚上7~11时进行,将雄性小鼠单独放入笼中(55cm×35cm×20cm)5min,使其适应环境,然后每笼加入1只雌鼠,观察记录捕捉潜伏期(自雌鼠投入至雄鼠第1次捕捉雌鼠的时间)、20min内雄鼠捕捉雌鼠的次数、交配潜伏期(自雌鼠投入至雄鼠第1次与雌鼠交配的时间)、20min内交配次数,结果见表1。
2.2 对雄性小鼠血清睾丸酮、雌二醇的影响 行为学指标测定后,各组雄鼠用10%水合氯醛腹腔注射麻醉,眼部取血,3000r/min,离心15min,取上清液,-20℃分装冷藏,用SN-695B型智能放免γ测量仪测定血清睾丸酮,雌二醇含量,采用放射免疫试剂盒测定,操作依照试剂盒说明书,结果见表2。
3 结果
3.1 对雄性小鼠性行为的影响 见表1。
表1 丽江玛咖不同提取物对雄性小鼠性行为的影响(±s,n=10)
表1 丽江玛咖不同提取物对雄性小鼠性行为的影响(±s,n=10)
注:与对照组比较,*P<0.05,**P<0.01
0对照组 13136.2±14.148.4±2.17 316.2±15.674.1±1.5万艾可组 0.01395.0±12.15** 12.4±1.65** 252.5±20.57* 8.0±1.41*复方锁阳口服液 12121.2±9.24* 11.3±1.84* 283.2±9.87* 7.4±1.18*石油醚提取物组 13132.8±14.948.9±1.73 322.2±13.834.8±13.98乙酸乙酯提取物组 13131.0±12.648.7±1.57 316.0±15.294.4±1.07正丁醇提取物组 13120.6±9.97* 10.5±1.72* 301.5±10.31* 6.5±1.27*水提取物组 13122.7±11.30*10.7±1.49* 296.7±13.44* 6.9±0.99*
试验结果表明,丽江玛咖石油醚、乙酸乙酯提取物对雄性小鼠捕捉潜伏期、捕捉次数、交配潜伏期、交配次数均无明显影响,与对照组比较,经统计学处理,P>0.05,差异无显著性意义;丽江玛咖正丁醇提取物能缩短雄性小鼠捕捉潜伏期(P<0.05),增 加 捕 捉 次 数 (P<0.05),缩 短 交 配 潜 伏 期(P<0.05),能明显增加20min内交配次数(P<0.01);水提取物能明显缩短雄性小鼠捕捉潜伏期(P<0.05),增加捕捉次数(P<0.05),能明显缩短交配潜伏期(P<0.05),明显增加20min内交配次数(P<0.01);阳性对照药万艾可能明显缩短雄性小鼠捕捉潜伏期、明显增加捕捉次数、显著缩短交配潜伏期、明显增加20min内交配次数,经统计学处理,P<0.01,差异有非常显著性意义,复方锁阳口服液也能缩短雄性小鼠捕捉潜伏期(P<0.05),增加捕捉次数(P<0.05),缩短交配潜伏期(P<0.05)、明显增加20min内交配次数(P<0.01)。
3.1 对雄性小鼠血清睾丸酮、雌二醇的影响 见表2。
表2 丽江玛咖不同提取物对雄性小鼠血清睾丸酮、雌二醇的影响(±s,n=10)
表2 丽江玛咖不同提取物对雄性小鼠血清睾丸酮、雌二醇的影响(±s,n=10)
注:与对照组比较,*P<0.05
组别 剂量(g/kg) 睾丸酮含量(ng/dl) 雌二醇含量(pg/ml)13 11.05±2.33 8.45±2.89复方锁阳口服液 12 16.48±4.67* 7.65±2.17石油醚提取物组 13 11.09±1.78 8.63±2.98乙酸乙酯提取物组 13 11.28±2.15 7.82±2.0正丁醇提取物组 13 11.96±2.10 8.46±2.48水提取物组对照组13 12.06±2.12 7.90±1.89
试验结果表明,丽江玛咖四种提取物对雄性小鼠血清睾丸酮、雌二醇含量均无明显影响,复方锁阳口服液灌胃28d,可升高雄性小鼠血清睾丸酮含量(P<0.05),对雌二醇含量无明显影响。
4 讨论
本次试验结果表明,丽江玛咖四种提取物中,正丁醇和水提取物能明显提高雄性小鼠性行为,对捕捉潜伏期、捕捉次数、交配潜伏期、交配次数均有明显影响,而石油醚、乙酸乙酯提取物对所有指标均无明显影响,说明丽江玛咖正丁醇和水提取物是其增强性行为的活性物质,为进一步研究丽江玛咖的化学与药效的相关性打基础。但丽江玛咖四种提取物对雄性小鼠血清睾丸酮、雌二醇含量均无明显影响,说明其增强性行为的作用与性激素调节无关,作用机制有待进一步研究。
[1]肖伟 .秘鲁特产药用植物玛卡研究的新进展[J].世界科学技术—中医药现代化,2007,9(3):102~103.
[2]金文闻 .药食两用植物玛咖(Lepidium meyenii)的功效物质研究[C].华中科技大学博士论文:1~5.
[3]李培清 .会泽县引进美国特种中药材——玛卡试验成功[J].云南科技管理 .2006;(3):75.
[4]杨菊 .西地那非衍生物对雄性家兔和小鼠性行为的影响研究[J].中国药房 .2007;18;(16).