电针呼循穴区对心律失常模型大鼠的影响*

王珊珊 李开春 李青润 石玉迎 张明章 潘 锋 张露芬

（1.三峡大学第一临床医学院宜昌市中心人民医院，湖北 宜昌 443003；2.云南省昆明夕阳红老年病医院，云南 昆明 650031；3.宁夏回族自治区中医研究院，宁夏 银川 750021；4.中日友好医院，北京 100029；5.承德医学院附属医院，河北 承德 067000；6.云南省曲靖市中医院，云南 曲靖 655000；7.北京中医药大学，北京 100029）

心律失常指心脏冲动的起源部位、频率、节律、传导速度与激动次序的异常，临床症状多有心悸、胸闷、气急、心前区疼痛等，属中医学“心悸”、“怔忡”、“胸痹”、“心痛”等范畴。 针灸治疗心律失常以手厥阴、手少阴经穴为主，随症配穴［1］。头针作为针灸体系的重要组成部分，治疗心律失常的疗效不容忽视；而头部腧穴除“头针穴名标准化方案”还有多种流派，非标准化流派在临床也很常用。本实验选取方云鹏头针穴名体系中治疗心血管疾病的常用穴区——“呼循穴区”为研究对象，旨在探寻其对心律失常的影响，并初步揭示其部分作用机制，为临床应用头皮针治疗心律失常提供实验依据。

1 材料与方法

1.1 动物 健康成年雄性Wistar大鼠，由维通利华实验动物中心提供，体质量（200±20）g，清洁级，动物房符合SPF屏障系统，温度25℃，相对湿度45%，气压保持在适宜范围内。实验过程中，所有动物在同等条件下饲养，自由饮水和摄食。动物适应性饲养3 d后进行正式实验，避免实验误差。

1.2 试药与仪器 0.4%BaCl2溶液（0.1 mL/100 g）、20%乌拉坦（0.65 mL/100 g）、0.5%利多卡因（0.1 mL/100 g）均为北京化学试剂公司产品。大鼠环磷酸腺苷（cAMP）试剂盒（产品编号：E0003r）、大鼠环磷酸鸟苷（cGMP）试剂盒（产品编号：E0577r）均为北京博惠嘉业科技有限公司产品。G-6805电刺激仪（上海医用电子仪器厂）；BL-420E生物机能实验系统 （成都泰盟科技有限公司）；智能离心机（上海化工机械厂）；13 mm×0.25 mm毫针（环球针灸针）。

1.3 分组与造模 采用随机对照实验研究，选取大鼠50只，按体质量排序，采用随机数字表分为5组，每组10只：空白对照组、模型组、额旁1线组、呼循穴区组、药物对照组。用20%乌拉坦（0.65 mL/100 g）腹腔注射麻醉大鼠后，用针状电极刺入大鼠四肢皮下，按人体标准导联（Ⅱ）连接生物机能实验系统，记录心电图。待心电图稳定后，各组大鼠均经舌下静脉快速注射0.4%BaCl2溶液0.1 mL/100 g，注射后数秒至5 min内心电图出现室性早搏、短暂或连续的室性心动过速等改变和动脉血压的变化，视为造模成功［2］。

1.4 干预方法 额旁1线组：在头部双侧“额旁1线”区域（参照“头皮针穴名国际标准方案”分区方法），将两根毫针沿帽状腱膜相距约3 mm向下针刺［3］。呼循穴区组：在大鼠颅骨的矢状正中线与对耳线的水平面交点向外1～2 mm之间，向下0～2 mm之间，两者构成的长方形区域［4-5］。额旁1线组、呼循穴区组针刺后连接G-6805电刺激仪，选用疏密波，时间间隔为1.9～2.0 s，频率15Hz，强度为2mA，以引起肢体或头部轻微颤动为度。药物对照组：造模成功后5 min，经舌下静脉注射0.5%利多卡因0.1 mL/100 g。空白对照组、模型组不进行干预。

1.5 标本采集与检测 （1）室温下（18～25℃）记录各组大鼠造模前及干预措施后 1、5、10、15、20、25、30 min 各时刻的心电图。（2）干预结束后所有动物腹主动脉采血，取血1～2 mL，注入试管中，放入4℃冰箱内静置4 h后，4℃下1500 r/min离心10 min，分离血浆，置于-20℃冰箱保存，待测cAMP、cGMP水平。

1.6 统计学处理 应用SAS8.2统计软件。计量资料以（±s）表示，进行正态分布检验，计量资料进行ANOVA方差分析，多组均数之间行Q检验比较。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 电针呼循穴区对心律失常大鼠模型心率改变的影响 见表1。与麻醉时比较，造模后大鼠心率明显加快（P＜0.001），模型组造模15 min以后心率明显减慢（P＜0.001），说明有自复率趋向，但30 min内不会完全恢复。与造模5 min时比较，各干预组心率随时间的变化逐渐减慢（P＜0.001）；与模型组相同时刻心率比较，各干预组减缓幅度明显增大（P＜0.05），说明电针呼循穴区、额旁1线及0.5%利多卡因能减慢心律失常大鼠心率。呼循穴区组与额旁1线组间心率变化比较无明显差异（P＞0.05），但在5、10 min没有药物对照组减慢迅速（P＜0.05）。说明电针呼循穴区能减慢心律失常大鼠的心率，效应与额旁1线相当，但是没有0.5%利多卡因强。

表1 各组不同时相心率比较（次/min，±s）

表1 各组不同时相心率比较（次/min，±s）

与本组麻醉时比较，*P＜0.001；与本组造模5 min比较，△P＜0.001；与模型组同时相比较，▲P＜0.05。

组 别 n 麻醉时 造模5min 干预后5min 10min 15min 20min 25min 30min空白对照组 10 353±49模型组 10 354±51 540±55* 530±56 513±57 488±57 451±54 433±47 399±50额旁 1线组 10 353±58 539±59*▲ 484±60▲△ 440±54▲△ 364±59▲△ 359±56▲△ 354±59▲△ 354±55▲△呼偱穴区组 10 346±63 532±61*▲ 470±64▲△ 409±64▲△ 353±57▲△ 351±57▲△ 346±57▲△ 346±61▲△药物对照组 10 347±56 538±62*▲ 439±77▲△ 383±69▲△ 348±64*▲△ 347±65▲△ 348±64▲△ 347±63▲△

2.2 电针呼循穴区对心律失常大鼠心电图复律时间的影响如表2显示，各干预组大鼠心率逐渐恢复，呼循穴区组与额旁1线组比药物对照组慢（P＜0.05），呼循穴区组与额旁1线组比较无明显差异（P＞0.05）。表示电针呼循穴区、额旁1线和0.5%利多卡因对心律失常大鼠有复律作用；电针呼循穴区、额旁1线复律效果相当，但不如0.5%利多卡因快。

2.3 血浆cAMP、cGMP、cAMP/cGMP水平的变化 见表3。结果示与空白对照组相比，模型组血浆中cAMP、cAMP/cGMP水平有显著升高（P＜0.001）。与模型组比较，各干预组组血浆中cAMP、cAMP/cGMP水平显著降低 （P＜0.001）。 各各干预组 cAMP、cGMP、cAMP/cGMP 水平无明显差异（（P＞0.05）。

表2 各干预组大鼠心电图恢复时间比较（min，±s）

表2 各干预组大鼠心电图恢复时间比较（min，±s）

与药物对照组比较，*P＜0.05。

组别 n 心电图恢复时间额旁1线组 10 19.7±5.355*呼偱穴区组 10 18.1±6.172*药物对照组 10 14.3±3.831

表3 大鼠血浆中 cAMP、cGMP、cAMP/cGMP水平比较（±s）

表3 大鼠血浆中 cAMP、cGMP、cAMP/cGMP水平比较（±s）

与模型组比较，▲P＜0.001。

组 别 n cAMP（pmol/mL） cGMP（pmol/mL） cAMP/cGMP空白对照组 10 30.202±4.555▲ 18.692±2.829 0.0224▲模型组 10 41.843±5.862 18.796±3.422 0.2484额旁 1线组 10 32.342±6.840▲ 18.643±2.928 0.0264▲呼偱穴区组 10 32.057±6.360▲ 18.529±2.601 0.0268▲药物对照组 10 31.936±4.119▲ 18.503±4.082 0.0315▲

3 讨 论

方云鹏头针穴名体系是以颅脑功能核团在头皮上的投影定位、结合临床实践经验所创立的。“呼循穴区”是呼吸、循环中枢在头皮的投影区，位于延髓，上接桥脑，下连颈髓，位于枕骨外粗隆尖下5 cm，旁开4 cm处［4］。大鼠的呼吸、循环中枢和人一样在延髓，由疑核、孤束核、腹外侧核等几个核团控制。本实验结果显示，电针呼循穴区能显著降低心律失常大鼠心率，缩短心律失常持续时间。可能是通过针刺这个部位，调节自主神经系统的功能状态，影响支配心脏的心交感神经和心迷走神经的功能状态，实现对心血管活动的调节，达到改善心功能和异常心电图改变［6］。另一方面，由于经络内连脏腑外络肢节，沟通内外，贯穿上下，运行气血濡养周身，头面部又是经气汇集部位，所以电针也可以通过针刺头皮特定部位起到疏通气血、调理阴阳、防治疾病的作用。

环核苷酸是体内具有广泛调节机能的生物活性物质，主要为cAMP、cGMP，其将第一信使传来的信息由细胞膜传向细胞内，影响细胞内酶的活性，进而调节细胞的各种功能。BaCl2诱发心律失常的机制可能为增加心肌蒲氏纤维Na+、Ca2+内流，抑制了K+流出，并增加内源性肾上腺素的释放［7］。当肾上腺素释放增加，激活细胞膜上腺苷酸环化酶，致使细胞内cAMP浓度升高，cAMP升高又可加速细胞对钙的摄取和转运，从而改变细胞兴奋性，使心肌细胞电生理特性发生紊乱［8］；cAMP含量增加还可使自由脂肪酸生成增加，导致心肌耗氧量增加，对心律失常心肌能量代谢造成更大障碍［9］。本实验结果表明，电针“呼循穴区”抑制心肌细胞内cAMP升高，从而调节cAMP/cGMP比值的失衡。因此，推测电针呼循穴区对心律失常的影响机制是通过抑制心肌细胞内cAMP升高，使cAMP/cGMP比值趋于平衡，而减缓细胞对钙的摄取和转运，以及游离的脂肪酸增加，减低心肌耗氧，调整心脏收缩和舒张功能，达到抗心律失常作用。

综上所述，电针“呼循穴区”能减慢心律失常大鼠心率、缩短复律时间，降低血浆cAMP、cAMP/cGMP水平，电针“呼偱穴区”与“额旁1线”效果相当，药物对照组效果最强。电针“呼循穴区”对心律失常大鼠有明显的改善作用，其作用机制可能与经络、自主神经系统，血浆cAMP、cGMP水平有关。

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