豚鼠大叶性肺炎的诊断
2012-06-02王雪松李常国
王雪松 李常国
(辽宁省食品药品检验所,沈阳 110023)
肺炎是指肺组织发生的急性渗出性炎症,为呼吸系统的一种常见疾病。它可以是原发的独立性疾病,也可以是其他疾病的并发症。按照病因,可将肺炎分为细菌性肺炎,病毒性肺炎,霉形体性肺炎,立克次氏体性肺炎、霉菌性肺炎、寄生虫性肺炎、中毒性肺炎和吸入性肺炎等。迄今所知,引起实验动物呼吸器官疾病的细菌性和支原体性病原体约达20种。引起豚鼠肺炎的主要是支气管败血波氏杆菌感染,本病在豚鼠群中呈季节性流行。秋、冬、春季为其流行期,发病也较多,而夏季几乎无病例。另外,饲养密度过高、营养不良、通风不畅等是引起本病恶化的原因【1】。按病因分类,可针对不同病因及时进行相应治疗。但在肺炎患畜的疾病治疗之前便迅速确定病因,目前尚有困难。按病因累及的部位和病变范围大小,可将肺炎分为大叶性肺炎、小叶性肺炎(支气管性肺炎),融合性肺炎和间质性肺炎。按炎性渗出物的性质,可将肺炎分为浆液性、卡他性、纤维素性、化脓性、出血性和坏疽性肺炎等。大叶性肺炎常见于某些传染病,引起大叶性肺炎的病原微生物主要侵入途径是气源性的,经呼吸道感染,沿支气管树扩散,侵入肺泡引起肺炎。有些致病菌是呼吸道内的条件性致病菌,受寒感冒、过度疲劳、长途运输、饲养管理不当、吸入刺激性气体、免疫功能低下时,呼吸道的净化功能及肺泡巨噬细胞的吞噬能力下降,肺泡内细菌繁殖,引起大叶性肺炎。由于大叶性肺炎病变范围广,使肺呼吸面积明显减少,动物出现严重的呼吸困难。动脉血氧含量减少,动物出现缺氧,对生命威胁很大,动物常常因缺氧、呼吸困难而死亡。大叶性肺炎是以肺泡内渗出大量纤维素为特征的急性炎症。所以,通常又称之为纤维素性肺炎。此型肺炎常侵犯一个大叶、一侧肺脏或全肺,肺组织发生大面积广泛实变。从实验动物种类来看,豚鼠的肺炎发病率和严重程度均高于大鼠和小鼠,肺炎在实验用豚鼠中的发病率与饲养环境和季节因素密切相关【2】。
1 材料与方法
1.1 实验材料
1.1.1 病料 普通级动物实验室新引进豚鼠50只,死亡22只。
1.1.2 试剂 量筒1000ml、无水乙醇、95%乙醇、二甲苯(含量为99%)、切片石蜡(熔点56℃~58℃)、固定液、苏木素液、1%盐酸、蒸馏水、0.5%伊红、盖玻片
1.1.3 实验仪器 剪子、中镊子、小镊子、滤纸、止血钳、解剖板,毛刷,五官科镊子,染片架、切片机、冷台、载玻片,摊片机、烘片机、包埋机、全自动脱水机、显微镜
1.1.4 配置病理切片制作所需试剂
固定液制备:磷酸二氢钠4 g(带结晶水称取5.2 g);磷酸氢二钠6.5 g(带结晶水称取16.4 g),40%甲醛100 ml,加蒸馏水至1 000 ml。
苏木素液制备:苏木素 10 g,无水乙醇 100 ml,硫酸铝钾200 g,蒸馏水 2 000 ml,
氧化汞 5 g。先将苏木素溶于无水乙醇中,另将硫酸铝钾加温溶于蒸馏水中,待硫酸铝钾全部溶解后,再将苏木素乙醇溶液加在一起,混合煮沸,再将氧化汞放入溶液中用玻璃棒搅拌,此时液体为深紫色,马上把烧杯放入流动冷水中,使液体立即冷却,隔日过滤。
1%盐酸制备:盐酸(含量36.4%)5 ml,70%乙醇495 ml。
0.5%伊红制备:伊红2.5 g,80%乙醇500 ml。
1.2 实验方法
1.2.1 临床观察 豚鼠表现精神不振,食欲减退,被毛粗乱,呼吸急促,频率增加,严重者呈混合性呼吸困难,咳嗽,有浆液性、黏液性鼻液,连续一周对有明显症状的豚鼠通过肛温测得体温范围在39.7℃~42.1℃,发生了持续性高热,呈稽留热型(豚鼠平均正常体温38.6℃[3])陆续出现死亡,鼻孔与口腔中流出铁锈色或暗红色液体。
1.2.2 剖检变化 外部观察,皮下检查,暴露腹腔,胸腔剖开,用小镊子剪下肺脏,剥离其周围的结缔组织。
1.2.3 病理学诊断 取材固定;脱水透明;浸蜡包埋;切片贴片;修整展片;H.E染色。
2 结果与分析
2.1 剖检诊断结果
病变肺叶肿大,重量增加,呈暗红色,病变肺叶质实,切面稍有干燥,呈粗糙颗粒状,有浆液-纤维素性渗出物蓄积覆盖胸腔内,胸腔内含有大量淡黄色纤维素凝块的渗出液。纤维素性肺炎常并发纤维素性胸膜炎,纤维素机化时造成胸膜粘连,肺组织坏死液化。
图2 病变肺叶呈暗红色,粗糙颗粒状
2.2 大叶性肺炎病理组织学的观察结果
肺泡壁毛细血管显著扩张充血,肺泡腔内充满大量浆液-纤维素性渗出物,呈透明粉红色,肺泡腔中红细胞大部分溶解消失,淋巴管中充满大量炎性渗出物,整个肺组织呈现大量增生。
图3 肺泡腔内充满大量浆液-纤维素性渗出物
3 结论
3.1 本实验对一起疑似豚鼠大叶性肺炎的患病豚鼠进行临床观察,剖检诊断,初步确诊为豚鼠大叶性肺炎疾病。
3.2 在临床诊断的基础上又进行了病理组织学诊断,通过对患病豚鼠的肺脏等脏器进行病理组织学观察检测结果表明,具备典型的豚鼠大叶性肺炎疾病的病理组织学变化。