黑龙江省不同地域山里红叶的生药鉴定研究1）

于晓瑾，王振宇

（1.黑龙江中医药大学药学院，哈尔滨 150040；2.哈尔滨工业大学食品科学与工程学院，哈尔滨 150001）

山里红叶系蔷薇科植物山里红（CrataeguspinnatifidaBge.var.majorN.E.Br.）的干燥叶。我国北方大部分地区和朝鲜、苏联远东地区均有分布，我省主产于小兴安岭、完达山、张广才岭及老爷岭等山区。山里红叶作为山楂叶的一种来源，被《中华人民共和国药典》（2005版）收载，其味酸、性平，归肝经；具有活血化淤、理气通脉的功能，可用于气滞血淤、胸闷憋气、心悸健忘、眩晕耳鸣等症。山楂的品种比较复杂，我国药典（2005年版）收载山楂叶的来源植物为山楂（CrataeguspinnatifidaBge.）；山里红（CrataeguspinnatifidaBge.var.majorN.E.Br.）；上述两种产于北方，谓之北山楂。野山楂（C.cuneataSibe et Zucc）主产南方，谓之南山楂。此外，尚有辽山楂（C.sanguineaPall.）；云南山楂［C.scabrifolia（Franch）Rfhd］；湖北山楂（C.hunpensisSarg）等果实均作药用［1］。

山里红叶的外部形状受环境因素影响变异很大，又粉末状态难于鉴别，而组织学研究结果发现，其叶柄及主脉韧皮部外侧纤维束及厚壁细胞的分布状况、扫描电镜下叶表面角质层纹饰以及其HPLC图谱等均有区别，可以作为种间鉴别的指标［2］。同时山里红叶中又含有多种黄酮成分［3－4］。对各种心血管疾病等都有较好的疗效［5－6］。我们在药材样品收集过程中发现，在黑龙江不同地域的山里红叶随着地区的不同在其形态上有一定的差异。为此，本实验通过对黑龙江大兴安岭地区和张广才岭地区采集的山里红叶药材进行鉴别研究，为山里红叶药材资源的鉴别及开发提供依据。

1 材料与仪器与方法

1.1 实验材料

于2006年7月，共采集三种黑龙江产山里红叶药材，其中两种采自大兴安岭（加格达奇）分别为CrataegusmaximowicziiSchneid.、C.dahuricaKoehne.ex Schneid.。还有一种采自张广才岭（五常）为C.pinnatifidaBge.var.majorN.E.Br.。

1.2 实验仪器

DMWBA 200VC显微镜；扫描电镜（北京普瑞赛斯仪器有限公司）

1.3 原材料处理方法

样品采集后，置阴凉处风干至脆备用。供性状观察的样品选用典型而完整者，适当软化展平。供显微观察的样品，取自叶片中部，制备叶表面透化，解离，过中脉横切面等临时制切片。

2 结果与分析

2.1 性状鉴别

2.1.1 药材性状鉴别

黑龙江产山里红叶药材多为阔卵形至卵状菱状，叶缘有锯齿，深裂或浅裂，具托叶，但多早落。其药材呈皱缩状或不规则碎片状。深究其同中之异，可发现直观简便而有效的鉴别特征。即光叶山里红与山里红叶均为纸质，黄绿色，无光泽，但前者叶片厚实，透明度低，后者叶片极薄，透明度高。而毛山里红则为革质，绿色，有光泽。

表1 黑龙江山里红叶性状特征的比较

通过观察发现，三种山里红叶的光泽有无及程度与被毛茸情况呈负相关性。山里红叶无毛而有光泽；光叶山里红叶仅主脉与二级脉下毛较密而近于无光泽；毛山里红叶则全体被毛而无光泽。但是，光叶山里红叶的被毛区与非被毛区的光泽程度未见差异，表明毛绒并非影响叶表面光泽的直接因素。

三种山里红叶叶脉的颜色亦有所不同。毛山里红叶各级叶脉均含较深黄棕色至红棕色物质而使脉络清晰分明；光叶山里红叶仅见一、二级脉呈较浅棕黄色，而山里红叶叶脉未见此类色素。该类呈色物质在组织中的分部部位参见表1。三种山里红叶叶脉的这种差别，表明其各自所含代谢产物的质或量上的不同，其生物鉴别与质量评价意义，尚有待对其化学结构，积累动态与药理活性的深入研究。

2.1.2 附带部位的鉴别

在山里红叶采收过程中，常见混入小枝、叶芽、果实等。为药材鉴别提供佐证。如山里红新萌发枝易随叶摘取，其枝叶疏密、色泽明显不同；山里红托叶多为早落，但常见有残存，其形状大小各异。此外，山里红叶柄、叶芽、果实等亦可提供鉴别信息（参见表2）。

表2 黑龙江山里红叶附带部位的比较

2.2 显微鉴别

2.2.1 表面微观比较

为了准确地鉴别山里红叶的细碎药材、生药粉末及丸、散等有关中成药中的山里红叶，本文系统地比较观察了显微镜下三种黑龙江产山里红叶的上下表皮细胞形状、栅表比、气孔密度、脉岛数、非腺毛长度与密度等表面细微特征及其参数。从表3可见，三种山里红叶中草酸钙结晶的种类、大小、分布部位与密度具有重要显微鉴别意义。山里红叶中，主要有簇晶，晶形好，密度高，分布均匀，而毛山里红叶和光叶山里红叶中除簇晶外，还间有方晶，但光叶山里红叶结晶仅排列于叶脉外，而毛山里红叶的各级脉边缘及近域均有分布；三种山里红叶气孔的大小亦有不同。一般地，叶上表皮细胞为多边形、下表皮细胞为分枝状，但是光叶山里红叶的上下表皮细胞壁均呈波状分枝形，特征鲜明。山里红叶表面裸眼未见毛茸，但在显微镜下，于叶下表面中脉近叶柄处仍可见稀疏细长的非腺毛，在显微观察鉴定中应加以注意。毛山里红叶表面非腺毛的特点是先端多为钩状。

表3 黑龙江山里红叶表面显微特征比较

2.2.2 横切面微观比较

对过叶中脉横切面观察的结果表明，三种黑龙江山里红叶中脉的轮廓、维管束的组织比例及草酸钙结晶与色素的性状分布等方面亦间有差异（见表4）。虽然各种叶中脉上方均无栅栏组织通过，但山里红叶该部位栅栏组织却与上表皮分离而向内侧探入，且中脉棱外周计有三处凸起细棱线。此外，三者栅栏细胞大小不同，光叶山里红叶的栅栏细胞呈短粗状，毛山里红叶的呈细长状，山里红叶则介于两者之间。

表4 黑龙江山里红叶过中脉横切面的比较

2.2.3 电镜扫描观察

对三种山里红叶的电镜扫描观察结果，证实了三者间气孔形态上的差异，并可进一步比较其大小、各部分间比例和细微构造，以及非腺毛表面纹饰与尖端情况、叶表面角质层纹理的形态与分布。结果见表5。

表5 黑龙江三种山里红叶的电镜扫描观察

3 结论

对三种不同地域来源的黑龙江山里红叶，其完整药材或碎片，可由质地、厚度及其透光性的显著不同加以区分；其药粉粗粉末，则可由上下表皮细胞壁与非腺毛的形态以及草酸钙结晶的分布情况等方面进行鉴定。本文引入了叶的透光性、叶表皮细胞形态、气孔长短对比、草酸钙结晶的种类、大小、密度及分布部位等新的鉴别信息，为药材的质量标准提供依据，保持药材质量和用药安全。

［1］国家药典委员会.中华人民共和国药典［M］.北京：化学工业出版社，2005.

［2］高光跃，秦香芹，李鸣，等.山楂属主要植物叶子生药学研究［J］.天然产物研究与开发，1994，6（4）：27.

［3］黄燮才.中药山楂原植物的研究［J］.广西植物，1989，9（4）：303.

［4］刘霞.山楂黄酮类成分的分析测定［J］.吉林农业大学学报，1997，19（3）：47.

［5］王立娟.山楂叶中黄酮类化合物及提取方法［J］.中国林副特产，2000（1）：47－48.

［6］于秋红，黄沛力，储金花，等.山楂叶对大鼠血脂调节作用的研究［J］.中华医药文萃，2004（1）：9－10.