雌激素受体亚型ERα、ERβ在乳腺癌中的表达及意义

刘 睿，赵 静，张 志，曹晓艳，杨照环

（1.河北唐山工人医院，河北 唐山063000；2.河北联合大学病理教研室，河北 唐山063000）

本研究采用免疫组织化学法对100例国人女性不同阶段乳腺组织中雌激素受体α（ERα）、雌激素受体β（ERβ）进行检测，探讨其与一些肿瘤病理参数和生物学标志物（是否绝经、肿瘤大小、淋巴结转移情况、组织学类型、肿瘤分期、C－erbB－2表达）之间的关系，以期为有关ERα、ERβ与乳腺癌发生发展关系的深入研究以及临床判断乳腺癌预后及指导治疗提供帮助。

1 材料与方法

1.1 标本来源

选取唐山工人医院2004年6月至2008年6月手术切除石蜡标本共100例（其中乳腺癌术前均未经任何化疗和抗肿瘤治疗），包括浸润性乳腺癌62例，年龄24－67岁，平均46岁，绝经前患者29例，绝经后33例。组织学类型：浸润性导管癌44例，浸润性小叶癌18例。依照国际TNM分期，其中Ⅰ／Ⅱ期乳腺癌39例，Ⅲ／Ⅳ期乳腺癌23例。腋窝淋巴结转移情况：腋窝淋巴结转移者42例，无转移者20例，每侧腋窝检出淋巴结数3－24个，平均每例检出淋巴结11.8枚。乳腺原位癌8例，年龄28－62岁，平均42岁。乳腺增生标本15例，年龄15－42岁，平均32.5岁。癌旁正常乳腺组织（距癌组织≥4cm、组织学结构正常）15例，年龄33－60岁，平均52岁。所有病例的临床及病理资料完整，切除标本由两名病理医师做出详细的病理诊断，包括病灶的大小、病理组织学类型、病理分级、淋巴结转移情况及规范的临床分期（TNM分期）。

1.2 主要试剂及来源

鼠抗人ERα单克隆抗体（丹麦Dako公司），兔抗人ERβ单克隆抗体（美国Santa Cruz公司），鼠抗人C－erbB－2单克隆抗体（北京中山生物技术公司）。

1.3 方法

免疫组化实验按试剂盒说明书操作。用试剂盒内已知阳性的乳腺癌切片做ERα、ERβ、C－erbB－2阳性对照。用已知阳性的乳腺癌切片，以PBS代替一抗做空白对照。

1.4 形态观察与结果测定

ERα的阳性细胞标准为细胞核染色，ERβ阳性细胞标准为细胞核或细胞浆有染色、C－erbB－2阳性细胞标准为细胞膜染色。在400高倍镜下观察5个视野计算阳性肿瘤细胞数占肿瘤细胞总数的比例，阳性细胞数大于10%确定为阳性。

1.5 统计学分析

所得计数资料数据采用四格表χ2检验，当n≥40当有1≤T＜5时，用校正的χ2检验，当n＜40用四格表的确切概率法计算，P＜0.05为差别有统计学意义。所有统计分析均采用SPSS 10.1统计软件处理。

2 结果

2.1 ERα、ERβ在正常乳腺组织、乳腺增生、原位癌及浸润性乳腺癌组织的阳性表达率见表1。分别与正常乳腺组织和乳腺增生相比较，原位癌和浸润性乳腺癌中ERα表达阳性率明显升高，有统计学意义（P＜0.05），原位癌与浸润性乳腺癌之间比较ERα表达无统计学差异（P＞0.05）。分别与正常乳腺组织和乳腺增生组织比较，浸润性乳腺癌中ERβ表达的降低有统计学意义（P＜0.05），原位癌中ERβ表达的降低无统计学意义（P＞0.05）；原位癌与浸润性乳腺癌比较ERβ阳性率的差异无统计学意义（P＞0.05）。

表1 ERα、ERβ在不同组织的表达

2.2 ERα在浸润性乳腺癌中的表达情况见表2。在浸润性乳腺癌中，I／II期患者中ERα阳性表达率明显高于Ⅲ／Ⅳ期患者ERα阳性表达率（P＜0.05）。浸润性乳腺癌患者中C－erbB－2阳性者ERα阳性表达率明显降低，有显著差异（P＜0.01）。浸润性乳腺癌中ERα阳性表达与是否绝经、肿瘤大小、淋巴结有无转移、组织学分型无关（P＞0.05）。

表2 浸润性乳腺癌中ERα的表达与各临床参数之间关系

2.3 ERβ在浸润性乳腺癌中的表达情况见表3。在浸润性乳腺癌中ERβ阳性表达与淋巴结转移阳性（P＜0.05）以及C－erbB－2表达阳性（P＜0.01）呈现正相关，差异有统计学意义，而与是否绝经、肿瘤大小、组织学类型、临床分期无明显相关性（P＞0.05）。

表3 浸润性乳腺癌中ERβ的表达与各临床参数之间关系

3 讨论

乳腺癌是激素依赖性肿瘤之一，雌激素在其发生、发展中发挥重要作用。用免疫组化法在正常乳腺上皮中可检测到少量ERα，几乎所有导管上皮不典型增生病灶都高表达ERα，大约75%的导管原位癌、90%以上的小叶原位癌、70%的浸润性乳腺癌病灶中可检测到明显升高的ERα，并且表达不存在年龄差异［1］，这些结果提示ERα在乳腺癌的发生发展中可能起到促进作用。本研究结果显示原位癌和浸润性乳腺癌中ERα阳性率明显高于正常乳腺组织和良性乳腺病变组织（P＜0.05）。目前公认乳腺癌ERα阳性是预后良好的表现。多数临床研究结果表明，ERα与肿瘤的组织学分化、临床分期、癌细胞的增殖活性等密切相关，本课题研究结果显示早期（Ⅰ、Ⅱ期）患者ERα阳性表达率（69.2%）明显高于晚期（Ⅲ、Ⅳ期）患者 ERα阳性表达率（43.5%），这与国内一些学者的研究结果相类似［2］。有学者认为晚期乳腺癌中ERα表达降低是细胞异型性增生中的一种正常结构的丧失，是细胞去分化的表现，可能与非雌激素依赖性乳腺癌的发生有关［3］。本研究还显示C－erbB－2阴性患者的ERα阳性表达（71.4%）明显高于 C－erbB－2阳性患者 ERα阳性表达（35.0%），而C－erbB－2阳性表达目前被公认为乳腺癌不良预后因素。以上结果提示乳腺癌患者中ERα的阳性表达与一些预后良好因素相关。

ERβ于1996年被发现，其在85%正常乳腺上皮中有表达，也是乳腺间质中主要的ER形式［4］。有实验显示ERβ的表达强度在正常上皮、导管内原位癌、浸润性导管癌依次减少［5］，由此，推断ERβ可能对维持乳腺组织的正常生理功能起着重要作用。本课题结果显示ERβ在正常乳腺组织、乳腺增生组织、原位癌及浸润癌中的表达率依次下降。目前就ERβ在乳腺癌的发生发展及与预后的关系问题上尚存在较多争议。本研究结果显示ERβ阳性表达与月经状况、肿瘤大小、组织学类型、TNM分期均无明显关联（P＞0.05）。腋窝淋巴结阳性患者ERβ阳性率（57.1%）明显高于淋巴结阴性患者ERβ阳性率（30.0%）；C－erbB－2阳性患者中 ERβ阳性表达率（75%）明显高于C－erbB－2阴性患者ERβ阳性表达率（35.7%），这与某些国外研究结果类似［6］。表明其阳性表达可能与一些不良预后因素相关，但还需要更大样本研究去进一步证实及深入研究。

［1］Murphy LC，Simon SL，Parkes A，et al.Altered expression of es－trogen receptor coregulators during human breast tumorigenesis［J］.Cancer Res，2000，60（22）：6266.

［2］韩 晶，王培军，汤如勇.雌激素受体亚型在不同乳腺组织中的表达及其与乳腺癌关系的研究［J］.同济大学学报（医学版），2005，26（5）：21.

［3］姜 军，陈意生，詹新恩.乳腺上皮不典型增生和乳腺癌雌激素受体的变化及其意义［J］.第三军医大学学报，1997，19（4）：321.

［4］Roger P，Sahla M，Makela S，et al.Decreased expression of estrogen receptor beta protein in proliferative preinvasive mammary tumors［J］.Cancer Res，2001，61（6）：2537.

［5］Skliris GP，Munot K，Bell SM，et al.Reduced expression of oestrogen receptorβin invasive breast cancer and its reexpression using DNA methyl transferase inhibitors in a cell line modle［J］.J Pathology 2003，201（2）：213.

［6］Litwinink M，Filas V，Moczko R，et al.Expression of hormone receptors ERα，ERβand PgR in HER2－positive breast cancers［C］.ASCO Meeting Abstracts，2006，24（18）：10525.