p16、EGFR在子宫内膜癌组织中的表达及临床意义

赖世平

（浙江省湖州市妇幼保健院病理科，浙江湖州 313000）

·论 著·

p16、EGFR在子宫内膜癌组织中的表达及临床意义

赖世平

（浙江省湖州市妇幼保健院病理科，浙江湖州 313000）

目的探究p16和表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor，EGFR）在子宫内膜增殖期、子宫内膜增生过长和子宫内膜癌组织中的表达及临床意义。方法运用免疫组织化学Elivision法检测p16、EGFR在子宫内膜癌120例、子宫内膜增殖期40例、单纯型增生过长40例、复杂型增生过长40例、非典型增生过长40例组织中的表达情况。结果p16在子宫内膜增殖期、单纯型增生过长、复杂型增生过长、非典型增生过长、子宫内膜癌的阳性表达率依次降低，而EGFR蛋白在子宫内膜腺癌组织中的阳性表达率明显高于子宫内膜增殖期（P＜0.01）。结论p16、EGFR的异常表达可能与子宫内膜癌的发生发展有关。

子宫内膜肿瘤；基因，p16；基因，erbB-1

子宫内膜癌（carcinoma of the endometrium）是女性生殖器三大恶性肿瘤之一，其发病率占女性全身恶性肿瘤的7%，占女性生殖道恶性肿瘤的20%～30%，近年来发病率有上升趋势［1］。p16是一个重要的多重肿瘤抑制基因，与细胞周期蛋白D竞争性结合细胞周期依赖性激酶（cyclin dependent kinases 4，CDK4），参与细胞周期的调控，控制细胞的生长和分化，对细胞周期进行负调控［2］，它与子宫内膜癌发生发展的关系国内外研究报道不一。表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor，EGFR）广泛分布于人体各组织的细胞膜上，其在大多数肿瘤中过表达和（或）突变。较多文献表明EGFR与多种肿瘤的发生发展有关，已成为肿瘤治疗的重要靶点［3］。本文对p16、EGFR在子宫内膜癌组织中的表达进行研究，旨在探讨两者在子宫内膜癌发生发展中的作用。

1 资料与方法

1.1 标本来源及处理：收集2005年9月—2010年3月浙江省湖州市妇幼保健院病理科子宫内膜病变组织蜡块280例（子宫内膜增殖期40例，单纯型增生过长40例，复杂型增生过长40例，非典型增生40例，子宫内膜癌120例）。患者年龄23～65岁，平均50.1岁。所有病例术前均未行放疗、化疗和内分泌治疗。子宫内膜癌手术病理分期采用国际妇产科联盟（FIGO）2000年的标准，Ⅰ期42例，Ⅱ期40例，Ⅲ期38例；组织学分级，G1期70例，G2～G3期50例；肌层浸润≤1/2有68例，＞1/2肌层浸润有52例。病理类型全部为子宫内膜样腺癌。

1.2 方法与试剂：采用免疫组织化学法（Elivision法），以上述病例的子宫内膜组织蜡块为标本，采用3μm厚连续切片。鼠p16蛋白和EGFR抗体均购自上海长岛公司。阳性对照片亦为上海长岛公司提供，阴性对照采用PBS代替一抗。DAB显色，苏木素进行复染。

1.3 结果评定：p16蛋白染色主要定位于细胞核，EGFR阳性主要定位于细胞膜和（或）细胞浆，均以出现棕色信号者为准（图1，2），采用半定量积分法来判断结果，先按染色强度打分，0分为无色，1分为浅黄色，2分为棕黄色，3分为棕褐色，染色强度依背景着色进行对比；再按阳性细胞所占百分比打分，0分为阴性，1分为阳性细胞≤10%，2分为＞10%～50%，3分为＞50%～75%，4分为＞75%。依据两者分数相加之和所得总分进行结果判定，0～1分为阴性（-），2～3分为弱阳性（+），4～5分为中度阳性（++），6分以上为强阳性（+++）。

1.4 统计学方法：应用SPSS 12.0统计软件包进行统计分析，计数资料以百分率表示，组间比较采用χ2检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

图1 EGFR在子宫内膜癌中的阳性表达（免疫组织化学×200）

图2 p16在子宫内膜癌中的阳性表达（免疫组织化学×200）

2 结 果

p16在子宫内膜增殖期阳性率为72.5%、单纯型增生过长阳性率为70.0%、复杂型增生过长阳性率为70.0%、非典型增生过长阳性率为67.5%和子宫内膜癌阳性率为44.1%，阳性表达率依次下降，其中子宫内膜癌中的阳性表达率与子宫内膜增殖期相比，明显降低，子宫内膜癌中p16的阳性表达率与子宫内膜增殖期、单纯型增生过长、复杂型增生过长、非典型增生过长相比，差异有统计学意义（P＜0.05，P＜0.01）。EGFR在子宫内膜增殖期阳性率为22.5%、单纯型增生过长阳性率为30%、复杂型增生过长阳性率为42.5%、非典型增生过长阳性率为52.5%和子宫内膜癌阳性率为70.8%，EGFR的表达在子宫内膜癌组较高，与增殖期、单纯型增生过长、复杂型增生过长、非典型增生过长相比，差异有统计学意义（P＜0.05，P＜0.01），p16与EGFR在子宫内膜增生过程中的表达与子宫内膜增殖期比较差异无统计学意义（P＞0.05）。见表1。p16在子宫内膜癌Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期中阳性率逐级降低，EGFR在子宫内膜癌Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期中阳性率逐级升高，且差异有统计学意义（P＜0.01）。在不同组织分级和不同浸润深度中，p16与EGFR的阳性率都各不相同，差异有统计学意义（P＜0.05，P＜0.01）。见表2。

表1 不同子宫内膜组织中p16和EGFR的表达情况

表2 子宫内膜样癌中p16、EGFR的表达情况与临床病理参数的关系

3 讨 论

p16基因定位于人9号染色体短臂2区，由编码148个氨基酸组成核结合蛋白。p16蛋白是细胞周期蛋白依赖性激酶的抑制蛋白，是细胞周期调节物，对细胞生长起到负调控作用。人类多种恶性肿瘤中均存在p16基因的缺失、突变、转录和表达异常，故又称此基因为肿瘤抑制基因。p16基因甲基化可能是胃癌的发生发展过程中的重要因素，幽门螺杆菌感染可能与p16基因启动子甲基化率增高有关［4］。EGFR属于酪氨酸激酶Ⅰ型受体家族，其家族成员包括EGFR（HER-1）、HER-2、HER-3、HER-4共4种同源受体，其经过细胞质中衔接蛋白、酶的级联反应，调节转录因子，从而激活基因的转录，指导细胞迁移、黏附、增殖、分化、凋亡。由于它在各种肿瘤组织中表达率不同，且与肿瘤的分化程度、恶性程度及浸润程度密切相关，基于这些特点，EGFR已成为目前肿瘤治疗的重要靶点。EGFR基因扩增是子宫内膜癌最常见的遗传学异常之一。李青等［5］发现EGFR可能参与了宫颈癌的发生，并且是宫颈癌发生的早期事件。EGFR蛋白过表达可能由EGFR基因扩增或基因拷贝数增加所致。

本研究发现从子宫内膜增殖期到单纯型增生过长，至非典型增生过长，再至子宫内膜癌，p16的表达依次下降和EGFR的依次升高，且差异有统计学意义。而p16、EGFR在增生过长中表达增生期与子宫内膜增殖期比较差异无统计学意义（P＞0.05），说明p16，EGFR与子宫内膜癌的发生发展相关，并可以给子宫内膜癌的治疗提供一定依据，这与国内张丽志等［6］的研究相同。p16在子宫内膜癌的临床分期Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期中阳性率逐级降低，在不同的组织学分级以及不同的肌肉浸润程度，p16的阳性率各不相同，且差异有统计学意义；EGFR在子宫内膜癌的临床分期Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期中阳性率逐级升高，在不同的组织学分级以及不同的肌肉浸润程度，EGFR的阳性率也各不相同，且差异有统计学意义。说明p16、EGFR的表达在一定程度上能反映出子宫内膜癌的疾病进展程度。

综上所述，p16、EGFR表达与子宫内膜癌的发生发展及预后相关，两者联合检测可为子宫内膜良、恶性病变的鉴别及对子宫内膜癌的诊断治疗、评价预后等提供参考指标，其表达与子宫内膜癌生物学行为之间有一定内在联系，也可作为评价子宫内膜癌生物学行为的重要指标之一。

［1］ 乐杰.妇产科学［M］.7版.北京：人民卫生出版社，2009：272.

［2］ SERRANOM，HARMON GJ，BEACH D，et al.A new regulatory motif in C cell-cycle control causing specific inhibition of cyclin D/CDK4［J］.Nature，1993，366（16）：704-705.

［3］ NAKAMURA JL.The epidermal growth factor receptor in malignant gliomas：pathogenesis and therapeutic implications［J］. Expert Opin Ther Targets，2007，11（4）：463-472.

［4］ 魏国华，杨春雨，杨静，等.Hp感染与P16基因甲基化在胃癌发展中的作用［J］.肿瘤防治研究，2011，38（1）：51-54.

［5］ 李青，纪捷，吴王飞，等.宫颈鳞状上皮病变中EGFR蛋白表达及基因扩增的临床意义［J］.诊断病理学杂志，2010，17（6）：448-452.

［6］ 张丽志，崔满华，白凤玲.p16和p15基因在子宫内膜癌中的表达［J］.吉林大学学报：医学版，2005，31（1）：118-119.

（本文编辑：刘斯静）

R737.33

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1007-3205（2012）03-0334-03

2011-08-23；

2012-02-10

赖世平（1982-），男，浙江湖州人，浙江省湖州市妇幼保健院技师，从事病理诊断研究。

10.3969/j.issn.1007-3205.2012.03.036