银屑颗粒质量标准研究

2012-05-01李启艳徐丽华

药学研究 2012年6期

李启艳，游嘉，徐丽华

(1.山东省食品药品检验所，山东济南 250101;2.中山大学药学院，广东广州 510006)

银屑颗粒是治疗银屑病的纯中药制剂，是由土茯苓、菝葜二味中药组成，具有祛风解毒之功效。为更好地控制产品质量，在现有的标准和相关文献的基础上，经反复验证，采用HPLC法测定了落新妇苷的含量，同时对菝葜进行TLC薄层鉴别。实验表明所建立的含量测定方法专属性强、灵敏度高、重现性好;TLC鉴别方法操作简单专属性强、重现性好，为该制剂的质量控制提供更有效的方法。

1 仪器与试药

Sartorius CP225D电子天平;Agilent 1200高效液相色谱仪。岛津UV－2550紫外分光光度计。落新妇苷对照品，烟台大学提供，供含量测定用;菝葜对照药材，中国药品生物制品检定所提供，批号:121538－200501。银屑颗粒(市售);甲醇、乙腈为色谱纯，其他试剂均为分析纯。

2 菝葜的TLC薄层鉴别［1］

取本品2g，研细，加乙醇10mL，超声处理15min，滤过，滤液置水浴蒸干，残渣加50%乙醇1mL使溶解，作为供试品溶液。另取菝葜对照药材2g，同法制成对照药材溶液。再取缺菝葜药材的阴性样品，按供试品溶液的制备方法，制得阴性对照溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2010年版一部附录ⅥB)试验，吸取上述三种溶液各5μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷－乙酸乙酯－甲醇－水(3∶8∶3∶2)的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365 nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，阴性对照无干扰，见图1。

图1 菝葜的薄层色谱图

3 含量测定［2］

3.1 色谱条件与系统适用性试验 Thermo C18色谱柱(4.6mm ×250mm，5μm);流动相:甲醇－0.1%磷酸(25∶75)，流速1mL·min－1;柱温:35℃;检测波长:291 nm。理论板数按落新妇苷峰计算应不低于4000。采用此色谱条件，供试品及对照品色谱分离度良好，见图2。

图2 含量测定色谱图(A落新妇苷对照品、B样品)

3.2 溶液的制备

3.2.1 对照品溶液精密称取落新妇苷对照品9.47mg，加60%甲醇溶解并稀释至100mL，摇匀，作为对照品溶液(浓度为 0.0947mg·mL－1)。

3.2.2 供试品溶液取装量差异项下的本品内容物(山东鲁泰环中制药有限公司生产，批号:100401)，研细，取约1.0g，精密称定，置圆底烧瓶中，精密加入60%甲醇25mL，称定重量，加热回流1 h，放冷，再称定重量，用60%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

3.3 方法与结果

3.3.1 线性关系考察精密吸取3.2.1项下对照品溶液2、4、8、12、16、20μL，注入液相色谱仪，测定峰面积积分值。以落新妇苷对照品的进样量为横坐标，峰面积积分值为纵坐标，进行线性回归，得回归方程 Y=2276.4440 X+21.1195，相关系数r=1.0000。表明落新妇苷进样量在0.1894～1.8940 μg之间与峰面积积分值呈良好的线性关系。

3.3.2 精密度试验精密吸取3.2.1项下的对照品溶液10μL，注入液相色谱仪，连续进样6次，按上述测定方法进行测定，结果落新妇苷的RSD为0.56%，表明仪器精密度良好。

3.3.3 稳定性试验精密吸取上述供试品溶液10μL，每隔2 h进样一次，测定落新妇苷的峰面积积分值，共考察10 h，以观察样品溶液在检测过程中待测成分的稳定性，结果RSD为0.78%，表明供试品溶液在10 h内稳定性良好，能够满足测定需要。

3.3.4 重复性试验取装量差异项下的本品内容物，研细，取约1.0g，共取5份，按样品测定项下的供试品溶液的制备方法，分别制得供试品溶液。按上述测定方法进行测定，计算落新妇苷的含量，结果平均含量为13.5mg/袋，RSD为1.36%，表明本品含量测定方法的重复性良好。

3.3.5 加样回收率试验对照品储备液的制备:精密称取落新妇苷对照品12.25mg，置100mL量瓶中，加60%甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得(浓度为0.1225mg·mL－1)。

取已知含量的装量差异项下本品内容物(平均装量:6.0186 g，落新妇苷含量为 13.5mg/袋)，研细，取约 0.5 g，精密称定，共取5份，置圆底烧瓶中，精密加入落新妇苷对照品储备液(浓度为0.12255mg·mL－1)10mL，再精密加入60%甲醇15mL，按样品测定项下的供试品溶液的制备方法，制得供试品溶液。照上述测定方法进行测定，计算回收率，结果见表1。结果表明，本方法的回收率良好。