Skp2在大肠癌大肠腺瘤及正常大肠黏膜中的表达及临床意义

刘镜文 魏茂富 杨延莉

[摘要] 目的探讨大肠癌、大肠腺瘤和正常大肠黏膜中Skp2蛋白表达的临床意义。方法采用免疫组化方法,分别检测大肠癌、大肠腺瘤和正常大肠黏膜中Skp2蛋白的表达。 结果 大肠癌、大肠腺瘤和正常大肠黏膜中Skp2蛋白表达率分别为76%（57/75）、36.7%（11/30）、16%（4/25），大肠癌与大肠腺瘤、正常黏膜比较，差异有统计学意义（P ＜0.05），大肠腺瘤与正常黏膜比较，差异无统计学意义（P ＞ 0.05）。Skp2蛋白在有淋巴结转移的大肠癌组织中阳性率为92.3%（24/26），明显高于无淋巴结转移的大肠癌组织67.3%（33/49）, 差异有统计学意义（P ＜ 0.05）；其表达与其他病理及临床因素无统计学意义（P ＞ 0.05）。 结论 Skp2的表达与大肠癌的发生及转移有密切关系,阳性表达对预测大肠癌发生淋巴结转移具有指导意义。

[关键词] Skp2；大肠腺瘤；大肠癌；正常大肠黏膜

[中图分类号] R735.3+4[文献标识码] B[文章编号] 1673-9701（2012）12-0115-02

大肠癌的死亡原因主要是肝、肺等内脏器官的远处转移，所以抑制肿瘤的远处转移是治疗大肠癌的重要手段。细胞S期激酶相关蛋白2（Skp2）属于F-box蛋白家族，F-box蛋白是泛素蛋白连接酶的组成部分。Skp2可特异识别并降解p27[1]，p27发生酶解后，诱导细胞从G期进入S期。近年来，肿瘤的研究中发现Skp2有原癌基因的功能，可以诱导癌细胞从G期进入S期，与多种恶性肿瘤的生成及进展关系密切 [2]。本实验旨在研究大肠癌、大肠腺瘤和正常大肠黏膜中Skp2蛋白表达及临床意义。

1 资料与方法

1.1 临床资料

收集我院2000年3月～2011年8月大肠癌75例、大肠腺瘤30例、正常大肠黏膜25例。大肠癌患者中,男女比例为40:35，年龄28～82岁，平均59.2岁。其中腺癌WHO Ⅲ级48例，腺癌（WHOⅡ级）22例,腺癌（WHOⅠ级）5例。伴淋巴结转移26例。肿瘤临床TNM分期：Ⅰ 期至Ⅳ期分别为11例，29例，25例，10例。

1.2 所用试剂及方法

所用抗体及试剂盒来自基因公司。标本用10%中性甲醛固定,常规石蜡包埋,3μm厚度切片,S-P法染色, DAB显色,苏木精复染细胞核。

1.3 评估标准

细胞核出现黄色或棕黄色颗粒状物为阳性。根据文献[3]染色强度及阳性细胞数百分比进行计分。Ⅰ：染色强度：不着色至棕黄色分别为0至3分。Ⅱ：阳性细胞百分比：＜5%计0分，6%～25%计1分，26%～50%计2分，51%～75%计3分，＞75%计4分。Ⅰ×Ⅱ＞3分为阳性。

1.4 统计学方法

统计学处理应用SPSS10.0软件，计数资料进行χ2检验, P ＜ 0.05差异有统计学意义。

2 结果

在大肠癌、大肠腺瘤和正常大肠黏膜中Skp2蛋白表达（图1、2、3）分别为76%（57/75）、36.7%（11/30）、16%（4/25），大肠癌与大肠腺瘤、正常黏膜对比差异有统计学意义（P ＜ 0.05），大肠腺瘤与正常黏膜对比差异无统计学意义（P ＞ 0.05）。 见表1 。Skp2蛋白在有淋巴结转移的大肠癌组织中阳性率为92.3%（24/26）,明显高于无淋巴结转移的大肠癌组织67.3% （33/49）, 差异有统计学意义（P ＜ 0.05）；其表达与其他病理及临床因素无统计学意义（P ＞ 0.05）。见表2 。

3 讨论

大量研究表明，肿瘤的发生具有复杂的分子基础,包括肿瘤抑制基因的灭活或丢失、原癌基因的激活、凋亡调节基因和DNA修复功能紊乱及微小RNA调节紊乱等。遗传因素和环境因素通过影响这些基因的结构和功能导致肿瘤的形成。任何原因导致的肿瘤形成,都以细胞周期调控机制紊乱为最终表现。细胞周期是由细胞周期蛋白和细胞周期蛋白依赖性激酶进行正调节, 由细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂进行负调节。Zhang H [4]在突变的细胞中发现3种蛋白（命名为p9，p19，p45）能影响Cyclin-CDK2的功能，即Cksl(或Cks2)、Skp1和Skp2。通过注射Skp2抗体或阻断Skp2的功能，使细胞不能进入S期，所以Skp2的表达改变与细胞周期的调控相关。很多实验表明，肿瘤的恶性程度与Skp2的蛋白表达水平呈正相关。Latres E[5]研究发现大鼠肿瘤发生率上升、生存期缩短与导入Skp2基因相关。本研究结果显示，在大肠癌、大肠腺瘤和正常大肠黏膜中Skp2蛋白表达分别为76%（57/75）、36.7%（11/30）、16%（4/25），大肠癌与大肠腺瘤、正常黏膜对比差异有统计学意义（P ＜0.05），大肠腺瘤与正常黏膜对比差异无统计学意义（P ＞ 0.05）。Skp2蛋白在有淋巴结转移的大肠癌组织中阳性率为92.3%（24/26），明显高于无淋巴结转移的大肠癌组织67.3% (33/49), 差异有统计学意义（P ＜0.05 ），其表达与其他病理及临床因素无统计学意义（P ＞0.05）。我们认为，Skp2的表达与大肠癌的发生及淋巴结转移有密切关系,阳性表达对预测大肠癌发生淋巴结转移具有指导意义。

[参考文献]

[1]Ungermannova D，Gao YF，Liu XD． Ubiquitination of p27 reguires physicalinteraction with cyelin E and probable phosphate recognition by Skp2[J]．J Biol Chem， 2005，280（34）:30301-30309．

[2]Yokoi S. A novel target gene, SKP2, within the 5p13 amplicon that is frequently detected in small cell lung cancers[J]． Am J Pathol, 2002,161（1）:207-216.

[3]Liu WH, Kaur M, Wang G. Inverse PCR-based RFLP scanning identifies low-level mutation signatures in colon cell and turmors[J]． Cancer Res,2004 ,64（7）:2544-2551.

[4]Zhang H,Kobayashi R,Galaktionov K,et al. P19 Skp1 and p45 Skp2 are essential elements of the cyclin A-CDK2 S phase kinase[J]．Cell， 1995 ,82（6）:915-925.

[5]Latres E，Chiarle R，Agano M． Role of theF-box protein Skp2 in lymphomagenesis[J]． Proc Natl Acad Sci USA, 2001，98(5):2515-2520.

（收稿日期：2011-12-31）