透明质酸对创面胶原代谢的影响

谭新东　李希军　叶雪玲

[摘要]目的：通过观察外源性透明质酸（HA）对兔耳创面胶原代谢的影响，探讨外源性透明质酸在伤口愈合中的作用。方法：18只日本大耳白兔，建立兔耳创伤愈合模型后，随机分成2%HA治疗组（A组），1%HA治疗组（B组）和生理盐水对照组（C组）。观察创面愈合及瘢痕形成情况，术后第3、7、10、14、18天取标本匀浆后测定羟脯氨酸（HPr）含量，将数据进行统计学处理。结果：A、B两组羟脯氨酸含量明显低于C组（P<0.01），A、B两组间也有统计学差异（P<0.05）。A、B两组创面愈合相对C组延迟，形成瘢痕小于C组。结论：外源性HA能够抑制成纤维细胞合成胶原，延迟创面愈合，减少瘢痕形成，其作用有剂量依赖性。

[关键词]透明质酸；创面愈合；羟脯氨酸

[中图分类号]Q591.2 [文献标识码] [文章编号]1008-6455（2012）08-1332-02

如何通过干预创伤愈合的过程来促进创伤愈合，减少瘢痕形成一直是医学研究的一个热点。近年来，有许多关于应用生长因子、药物等减少创面瘢痕形成的研究报道，并取得了一些效果[1-3]。透明质酸（HA）是重要的创伤愈合细胞外基质，具有抗炎、调控胶原合成、促进创伤愈合等作用[4]。笔者通过观察HA对兔耳创面愈合前后组织中羟脯氨酸（HPr）测定，为外源性HA对创面愈合及瘢痕增生中胶原的代谢提供了研究资料。

1材料和方法

1.1 实验动物、试剂和仪器

1.1.1 实验动物：健康日本大耳白兔（2.0～2.5kg）18只（南方医科大学动物实验科）。

1.1.2 实验试剂：HA：分子量Mr 6×106～7×106，由人脐带中提取（德国SIGMA公司）。L-HPr（中国科学院上海生物化学研究所）。

1.1.3 实验仪器：玻璃匀浆器（上海医疗器械厂）。分光光度计（Beckmen，USA）。

1.2 实验方法

1.2.1 动物模型的建立及分组：18只动物随机分成A、B、C 3组，每组6只，以速麻安（0.1ml/kg）肌注麻醉后，兔耳腹侧面皮肤碘酒、酒精消毒，用圆规在皮肤表面刻画出6个直径为1cm的圆，内外侧各3个，间隔1.5cm，切除圆内皮肤及皮下软骨。每组72个创面，共216个创面。HA每次使用前用生理盐水临时配置成2%和1%的HA溶液。A组创面用两层1cm×1cm纱布浸润2%HA溶液覆盖，再以干的无菌纱布垫于兔耳内侧面，将兔耳内卷，胶布固定。B组创面外用1%HA溶液，C组创面外用生理盐水溶液作为对照组，方法同上。每日换药一次，直至创面愈合。愈合后，A组应用2%HA溶液，B组应用1%HA溶液，C组应用生理盐水，以微量注射器进行瘢痕内注射，每次0.05ml，隔日一次，共3次。

2结果

3讨论

透明质酸（HA）是由葡萄糖醛酸和N-乙酰氨基葡萄糖以β糖苷键连接起来的重复二糖直链高分子聚合体。是细胞外基质的主要组成成分之一。HA在创伤愈合中具有抗炎、调控胶原合成、促进创伤愈合等作用[4]。笔者利用兔耳增生性瘢痕模型对HA调节胶原代谢的作用进行了观察。从表1可以看出，对照组兔耳皮肤创面愈合后HPr的含量仍持续增加（术后10～18天），这与大体观察到的瘢痕增生时间相一致。HA治疗组HPr的含量增加缓慢，明显低于对照组，而2%HA治疗组的HPr含量又低于1%HA治疗组。说明外源性HA能够抑制成纤维细胞合成胶原，并且有剂量依赖关系。本实验同时观察到HA治疗组创面愈合时间延长，愈合后瘢痕小，说明创面外用HA能延迟创面愈合，减少瘢痕形成。这与有的文献报道[5-7]HA的促进创面愈合的结论相矛盾。实际上高分子量的HA和低分子量的HA其生物学作用正好相反[8]。外缘性和内缘性HA的生物学作用也不相同[9]。低分子量的HA具有促进细胞的移动、增殖、分化和吞噬的作用，而高分子量HA由于其物理性质粘稠，抑制了细胞在创面内的迁移。本研究采用的HA（分子量Mr 6×106～7×106）是高分子量HA，因此笔者的实验结果与其他文献报道并不矛盾。由于外缘性高分子量HA抑制了成纤维细胞在创面内的迁移增殖和分化，因此减少了创面胶原堆积，延迟了创面愈合。同时增生性瘢痕的形成是由于成纤维细胞持续合成大量的胶原纤维导致胶原纤维在皮肤中过量沉积而引起的。HA通过抑制成纤维细胞合成胶原而抑制增生性瘢痕的形成。HA还能够抑制肌成纤维细胞的出现[10]，而肌成纤维细胞是具有收缩性和高度分泌活性的、可以促进创面愈合和瘢痕形成成纤维细胞，从而是延迟创面愈合。这些报道与笔者观察到的外缘性高分子量HA延迟创面愈合，减少增生性瘢痕形成的作用相一致。

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[收稿日期]2012-04-03[修回日期]2012-06-27

编辑/张惠娟