麻疯树枝干溃疡病的病原鉴定
2012-04-29吴跃开欧国腾孙建昌
吴跃开 欧国腾 孙建昌
摘要:麻疯树(Jatropha curcas L.)枝干溃疡病是麻疯树主要病害种类之一,常引起幼苗、枝干枯死,甚至全株死亡。对该病的危害特点、病症特征进行了介绍,并根据形态学特征观测及致病性接种试验的结果,将其病原鉴定为Botryosphaeria dothidea,其无性型为Fusicoccum aesculi。
关键词:麻疯树(Jatropha curcas L.);枝干溃疡病;病原;Botryosphaeria dothidea; Fusicoccum aesculi
中图分类号:S435.659文献标识码:A文章编号:0439-8114(2012)03-0518-03
Identification of the Causal Agent of Stem and Branch Canker Disease of
Jatropha curcas L.
WU Yue-kai1,OU Guo-teng2,SUN Jian-chang1
(1.Guizhou Academy of Forestry, Guiyang 550011,China; 2. Forestry Bureau of Luodian County, Luodian 550100,Guizhou,China)
Abstract: Stem and branch canker disease is one of the most serious diseases occurred in the biofuel plantation (Jatropha curcas L.) in Luodian County of Guizhou province, usually resulting in the death of the seedlings, branches, stems or even the whole big trees. The damage characteristics and the sypotoms of the disease were introduced; and according to the results of morphological study and pathogenicity inoculation test, the causal agent of the canker disease was identified as Botryosphaeria.dothidea(anamorph:Fusicoccum aesculi).
Key words: Jatropha curcas L.; canker disease; pathogen; Botryosphaeria dothidea; Fusicoccum aesculi
麻疯树(Jatropha curcas L.)是新兴的重要能源植物种类之一,目前在世界各地均大面积推广种植。传统上认为该树种具有抗旱、耐贫瘠、病虫害少等优点,然而事实证明并非如此。近几年来,我们在贵州罗甸县境内调查到麻疯树的大量病虫害种类,其中,枝干溃疡病是其最常见、最严重的病害种类之一,往往造成幼苗死亡、枝干枯死,甚至整株大树死亡,导致重大的经济损失。为了掌握该病的确切病因,从而采取有针对性的防治措施,我们对该病害的病原学进行了研究,现将研究结果报道如下。
1材料与方法
1.1病害调查
在贵州麻疯树主要种植地罗甸县境内选取几个典型的麻疯树种植点进行调查,掌握溃疡病的表现症状、主要发生时间、受害株率、为害后果等。
1.2病原检测
主要包括受害枝干病理切片、自然病菌子实体切片以及人工分离培养物的特征观测。
1.3致病性测试
对病枝溃疡处进行消毒、无菌水冲洗,然后用无菌刀片将病部子实体切下并捣烂,最后加无菌水搅匀制成孢子悬浮液。供试麻疯树苗选用健康无病的2年生容器苗,一共15株,分成3组,分别进行不同处理:①在接种前用刀片轻轻刮伤茎皮,然后喷施菌液;②不作刮伤处理,直接喷菌液;③不作刮伤处理,喷施无菌水作对照。试验苗置于人工温棚中,各处理间相隔一段距离。试验期间棚内温度为20~32 ℃,相对湿度>90%。1个月后观察发病情况。
1.4病原鉴定
根据致病性测试以及显微特征观测结果,参考相关文献资料,对导致麻疯树溃疡病的病原菌进行分类鉴定。
2结果与分析
2.1危害情况
该病在罗甸各个麻疯树种植点都普遍发生,包括造林地和苗圃。主要为害幼苗、新移栽苗木及衰弱树,感病株率15%~95%。由于受干旱或土壤不宜等原因致使苗木生长不良时,或苗木遭受冻害或虫害出现伤(裂)口时极易发生此病。从几年的调查结果看,该病在罗甸地区的发病高峰期为4~5月。2009年3~4月该病在高兰种植点的幼苗上普遍大发生,局部感病株率95%,其原因可能在于该时期是本地区主要干旱季节,而该种植点人工浇水管理工作无法到位;2011年3月调查,各种植点苗木溃疡病严重发生,而且多为茎干水疱型溃疡病,局部感病株率92%。这可能是因为2011年初长时间的冻害天气导致枝干受伤而诱发了溃疡病的大发生。
2.2病症特征
该病可从顶芽、叶芽、枝瘤、皮孔、伤口等薄弱处侵入。初期病状表现为侵入点流出大量树液,遇空气后很快变紫红色、棕红色或血色,最后呈深褐色至黑色(图1-1、1-3)。随着病程的发展,病部组织发生变褐腐烂、缢缩,最后病部及以上部位枯死。由于初侵染部位的不同,田间症状往往呈现不同的几种类型:①梢枯型(病菌由梢顶部开始侵染并向下发展,导致梢部枯死)(图1-1);②缢缩溃疡斑型(病菌从茎干中部叶芽处侵入并扩展,在病部形成缢缩性溃疡斑(图1-2);③烂脖子型(病菌从分枝处入侵,往往同时引起几个枝条最后枯死)(图1-3);④水疱型(病菌从冻伤或是机械损伤的茎干表皮侵入,导致茎干表皮出现水疱状肿起,导致整个茎干发生腐烂,后期生长出许多突起的黑色条状或块状隆起,此即为病菌的子座)(图1-4)。不同症状类型的存在往往导致误诊,但根据分离培养甚至直接镜检,发现其病菌形态基本一致,乃是同一种病菌所致。
2.3致病性测定结果
致病性测试结果如表1。从表1可以看出,测试菌株可以引起典型的溃疡斑症状,但其主要侵染受伤植株,并从伤口处侵入发展;健康植株喷菌处理感染率较低,且主要从芽眼处侵染,形成的溃疡斑也较伤皮接种处理产生的溃疡斑小。试验中还发现,无论是刮伤苗接种还是健康苗接种,温棚幼苗人工接种导致的溃疡病和田间溃疡病比较,病程发展较慢。可能是因为温棚内人工管理条件良好,苗木个体生长健壮、抗性较强。对人工接种导致的溃疡病斑进行再次分离,其培养物与原菌株培养物特征一致。测试结果证明了该病菌是麻疯树溃疡病的致病菌。
2.4病原特征
子实体(子座)在寄主皮下形成,黑色,后期突破寄主表皮而暴露。不同感病部位、不同的病菌发展阶段、不同的病状类型等条件下,子实体的外观有所不同,有的呈密集的细小黑色颗粒状物,有的呈密集的细小疱状突起(尚未突破寄主表皮),有的呈现粗糙的黑色条状或块状隆起,等等。子实体成熟时在其中生成多个腔室,形成子囊腔或分生孢子器,有时可见子囊腔与分生孢子器同时生于同一个子座中(图1-5)。子囊腔近球形,顶端具孔口(图1-6);子囊棍棒形,具双层壁,无色,子囊间有假侧丝,每个子囊含8个子囊孢子;子囊孢子单胞,无色,长卵圆形至短梭形,两端圆钝,大小7.71~11.90 μm×16.65~25.75 μm(图1-7);分生孢子器近球形;分生孢子长梭形或长椭圆形,单胞无色,大小为4.8~8.1 μm×15.8~29.7 μm(图1-8、1-9、1-10)。较老的标本上偶尔还会发现有精子器(spermogonia) 形成于同一子座上;精子(spermatia)无色,短杆状,大小为1.25~1.78 μm×2.54~5.17 μm(图1-11、1-12)。
对具有不同典型病症特征的病茎进行分离培养,发现人工培养物形态特征基本一致。菌落初期白色,浓密,后期变为深灰色,背面黑色;后期菌落菌丝层上生长着许多黑色的球形或不规则形的突起物,即为病菌的子座(图1-13)。
2.5病原鉴定结果
Botryosphaeria属真菌是引起多种树木枝干溃疡病的重要病原菌之一。从分类学上看,它是在子座或假囊壳型囊实体中产生双囊壁子囊的真菌的总称[1]。根据病状特点及形态学特征,引起麻疯树溃疡病的病原菌明显属于Botryosphaeria。
Botryosphaeria属中各个种类的有性型形态特征十分接近,难以区别,但在无性型上各个种类的形态特征区别较大,因而可以用来作为分种的重要依据。目前,在分子生物学研究的基础上,一个基于无性型特征的Botryosphaeria属真菌的分类体系已基本形成[1-3]。本研究依据这些分类标准,将麻疯树溃疡病的病原菌鉴定为Bdothidea, 其无性型为Fusicoccum aesculi。
分子生物学研究结果表明,与B. dothidea比较相近的种类为B. cortices,B. mamane,F. dimidiatum[4-6]。从无性型特征上看,它们和Fusicoccum aesculi的区别在于:B. cortices的子囊孢子及分生孢子均比B. dothidea大,且主要寄生于越橘属植物(Vaccinium)上[6]; B. mamane的分生孢子长度大于30 μm[1]。相对来说F. dimidiatum与B. dothidea之间的区别特征最为显著,因为前者的分生孢子常常出现2个分隔,中间细胞深色;目前该种已划归新的属Neoscytalidium,其新种名为N. dimidiatum[2]。
3结论与讨论
1)麻疯树枝干溃疡病的病原菌经鉴定初步确认为Botryosphaeria dothidea。标本检测中还常发现有其他的真菌(包括葡萄座腔菌)种类,但它们的出现频率较低,因而不是溃疡病的主要病原,其中有些可能是次生的腐生菌。根据我们掌握的资料,B. dothidea引起麻疯树的枝干部溃疡病,在国内尚属首次报道。
2)资料表明,B. dothidea能侵染为害多种寄主植物,但同时也是一种寄生性较弱的病原菌,只有在环境条件比较恶劣、植物生长不良时该病才容易流行。在罗甸,每年3~4月是该病的主要发生时期,其原因之一在于该段时间在本地区属干旱期,而干旱条件容易引起病害发生;另外一个原因在于该段时间也往往是冻害发生期结束不久,树木还未完全恢复长势,受冻枝干十分容易遭受病菌的侵染。
3)根据该病的发生特点,对该病的防治应该以预防为主,即加强林分的水肥管理,提高树木生长势,必要时辅以预防性喷药处理。发病初期及早喷药处理也可以获得一定的疗效;发病晚期应该将感病枝、梢修剪掉,连同病死株集中销毁,最大可能地剔除传染源。
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收稿日期:2011-07-13
基金项目:贵州省年度攻关项目(黔科合NY(2009)3065)
作者简介:吴跃开(1972-),男,贵州黎平人,副研究员,硕士,主要从事植物病虫害防治、有益昆虫及微生物的应用开发研究工作,(电话)
13595135136(电子信箱)wuyaokai@163.com。