血脂康对早期糖尿病肾病患者氧化应激的影响

魏 娜，常万松，薛迪中，沈学飞

糖尿病肾病 (diabetic nephropathy，DN)是糖尿病常见的并发症，临床特征为蛋白尿、渐进性肾功能损害、高血压、水肿，晚期出现肾衰竭，严重影响糖尿病患者的生活质量，是糖尿病患者的主要死亡原因之一。越来越多的研究表明，在DN诸多发病机制中，氧化应激是重要的共同机制［1－2］。血脂康胶囊作为一种天然他汀类调脂药，具有调节血脂、降低尿蛋白排泄率、改善内皮细胞功能等多种作用［3］。本研究旨在观察血脂康对早期DN患者氧化应激的影响，探讨血脂康在DN治疗中的作用。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2010年10月—2011年6月在本院住院及专科门诊长期随访的早期DN(DN 3期)患者56例，均符合2000年世界卫生组织 (WHO)制订的糖尿病诊断标准，男24例，女32例;年龄41～68岁，平均50.6岁;糖尿病病程4.5～30.0年，平均11.8年;尿清蛋白排泄率 (UAER)介于30～300 mg/d;排除:酮症酸中毒、心脑血管疾病、严重肝肾疾病、各种急慢性感染以及服用影响尿蛋白排泄药物者;无风湿、类风湿关节炎病史，未使用各种止痛剂、类固醇类药物、他汀类降脂药、血管紧张素转换酶抑制剂和血管紧张素Ⅱ受体阻滞剂。所有入选者糖化血红蛋白 (HbA1c) ＜9.0%，空腹血糖 (FPG) ＜10.0 mmol/L，肌酐 (Cr) ＜105.0μmol/L，尿素氮 (BUN) ＜7.1 mmol/L。

根据UAER水平，把患者分为:UAER＜100、100～150、151～200、201～250、251～300 mg/d 5档，然后将每档内的患者随机分配到血脂康组和安慰剂组中，以避免两组患者初始UAER相差悬殊。血脂康组28例，安慰剂组28例，两组患者的性别构成、年龄及糖尿病病程间有可比性 (P＞0.05，见表1)。另选取20例健康体检者作为正常对照组，其年龄、性别构成与血脂康组和安慰剂组比较差异无统计学意义 (P＞0.05);而FPG及HbA1c水平则显著低于血脂康组和安慰剂组(p＜0.05，见表1)。

1.2 方法 血脂康组给予口服血脂康胶囊0.6 g/次，3次/d;安慰剂组口服与血脂康外形相同的含淀粉的胶囊，0.6 g/次，3次/d，均连续给药12周。分别于给药前和治疗12周后留取血标本待测。两组患者均使用胰岛素控制空腹血糖于正常范围，在干预治疗期间避免同时服用具有抗氧化应激作用的药物，如维生素E、维生素C、β胡萝卜素、谷胱甘肽等。

1.3 观察指标 采用羟胺法检测3组受试者血超氧化物歧化酶 (SOD)，用硫代巴比妥酸比色法检测丙二醛 (MDA)，试剂盒购自南京建成生物研究所;三酰甘油 (TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇 (LDL－C)、极低密度脂蛋白胆固醇 (VLDL－C)、高密度脂蛋白胆固醇 (HDL－C)均采用全自动生化仪测定。研究开始及结束时分别检测各组UAER。测定方法:留取当日晨7点至次日晨7点的24 h尿液，用二甲苯作为防腐剂。测量24 h尿容积，混匀后取标本用放射免疫法检测尿微量清蛋白，计算出UAER。嘱患者在留尿的前24 h和留尿过程中不进食高蛋白饮食，不做剧烈运动。

1.4 统计学方法 采用SPSS 13.0软件进行统计检验。计量资料以表示，多组间比较采用方差分析，两组间比较采用t检验。UAER呈偏态分布，取自然对数后符合正态分布。以p＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 治疗前后血脂水平的变化 治疗前，血脂康组及安慰剂组早期DN患者血脂 (包括TC、TG、LDL－C和VLDL－C)均显著高于正常对照组，而HDL－C水平则显著低于正常对照组 (p＜0.05)。血脂康组治疗12周后，血清TC、TG、LDLC和VLDL－C水平较本组治疗前及安慰剂组治疗后显著降低(p＜0.05)，但仍显著高于正常对照组 (p＜0.05);而HDL－C水平则较本组治疗前及安慰剂组治疗后显著升高 (p＜0.05)，但仍显著低于正常对照组 (p＜0.05，见表2)。

表1 3组受试者一般资料比较Table 1 Comparison of general information among three groups

表2 3组受试者治疗前后血脂水平比较 (，mmol/L)Table 2 Comparison of blood lipid levels among three groups before and after the treatment

表2 3组受试者治疗前后血脂水平比较 (，mmol/L)Table 2 Comparison of blood lipid levels among three groups before and after the treatment

注:与正常对照组比较，*p＜0.05;与安慰剂组比较，△p＜0.05;与本组治疗前比较，▲p＜0.05;TG=三酰甘油，TC=总胆固醇，HDL－C=高密度脂蛋白胆固醇，LDL－C=低密度脂蛋白胆固醇，VLDL－C=极低密度脂蛋白胆固醇

治疗后血脂康组 28 3.86±0.71* 2.15±0.58＊△▲ 7.35±1.67* 4.33±1.38＊△▲ 1.25±0.49* 1.38±0.41＊△▲ 3.89±0.55* 2.32±0.47＊△▲ 2.42±0.53* 1.54±0.43组别 例数 TG治疗前 治疗后TC治疗前 治疗后HDL－C治疗前 治疗后LDL－C治疗前 治疗后VLDL－C治疗前＊△▲安慰剂组 28 3.73±0.64* 3.86±0.82* 6.83±1.46* 6.76±1.27* 1.17±0.36* 1.18±0.35* 3.71±0.63* 3.87±0.51* 2.34±0.46* 2.28±0.51*正常对照组 20 1.87±0.68 － 3.79±1.35 － 1.97±0.42 － 1.78±0.41 － 1.04±0.29 －F 值8 0.027 0.032 2.47 2.95 2.28 4.59 3.14 2.25 5.13 4.42 4.27 3.09 P值 0.021 0.036 0.042 0.017 0.034 0.041 0.014 0.01

2.2 治疗前后血清SOD及MDA的变化 与正常对照组比较，治疗前血脂康组和安慰剂组早期DN患者血清SOD水平显著下降，而MDA水平则显著上升 (p＜0.05)。血脂康组患者治疗12周后，其血清SOD水平显著升高，而MDA水平则显著下降，与本组治疗前及安慰剂组治疗后比较差异均有统计学意义 (p＜0.05)。而安慰剂组患者治疗前后血清SOD及MDA比较，差异均无统计学意义 (P＞0.05，见表3)。

2.3 治疗前后UAER变化 治疗前血脂康组和安慰剂组患者UAER分别为 (157.5±28.6)ng/d和 (165.9±24.1)ng/d，二者比较差异无统计学意义 (t=1.09，P＞0.05);治疗12周后，血脂康组和安慰剂组患者UAER分别为 (110.0±21.5)ng/d和 (155.7±23.7)mg/d，二者比较差异有统计学意义(t=2.31，P=0.039);且血脂康组治疗后UAER亦显著低于本组治疗前 (p＜0.05)。

表3 3组受试者治疗前后血清SOD及MDA水平比较 Table 3 Comparison of serum SOD and MDA levels among the three groups before and after treatment

表3 3组受试者治疗前后血清SOD及MDA水平比较 Table 3 Comparison of serum SOD and MDA levels among the three groups before and after treatment

注:*与正常对照组比较，p＜0.05;△与安慰剂组比较，p＜0.05;与本组治疗前比较，▲p＜0.05;SOD=血超氧化物歧化酶，MDA=丙二醛

组别 例数 SOD(U/ml)治疗前 治疗后血脂康组 28 91.4±17.5*98.1±18.9＊△▲ 8.73±0.47* 5.68±0.39治疗后MDA(nmol/L)治疗前＊△▲安慰剂组 28 89.6±13.4*88.7±16.3* 8.36±0.38*8.26±0.44*正常对照组 20 110.2±21.8 － 4.13±0.72 －F 值0.031 0.047 0.016 0.023 3.72 3.96 5.84 4.26 P值

3 讨论

DN是糖尿病常见的慢性并发症之一，其确切的发病机制尚未完全阐明。近年来，氧化应激在DN发病机制中的作用日益引起人们的关注［4］。氧化应激是指活性氧簇 (ROS)或活性氮簇产生增多和 (或)清除减少，导致ROS在体内蓄积而引起的分子、细胞和机体的损伤。研究显示，高糖环境可通过晚期糖基化终末产物 (AGEs)形成、葡萄糖自身氧化、多元醇通路 (PP)的活性增高、蛋白激酶C(PKC)活化等机制，引起体内ROS产生增加［5］。ROS作为细胞内信号分子，介导了多种信号转导通路、转录因子的激活，参与了糖尿病肾组织损害的发生、发展。Aksun等［6］指出 ROS可通过一氧化氮(NO)参与肾小球高灌注和高滤过;Susztak等［7］研究表明，高糖通过ROS启动足细胞凋亡，诱导其从基底膜上脱落，使肾小球内足细胞数目减少。由于ROS能迅速与周围物质发生反应，其t1/2短暂，难以直接检测其水平。但ROS与DNA、脂质、蛋白质反应后生成的产物可作为检测氧化应激的指标。本研究结果显示，早期DN患者治疗前血清MDA水平较健康者显著升高，而血清SOD水平则显著下降，反映DN患者体内脂质过氧化程度增高和机体清除自由基的能力下降，与国内外研究一致。

高脂血症是2型糖尿病患者代谢紊乱的常见症状，也是促进DN进展的重要因素。血脂异常时，氧化应激使脂蛋白被氧化修饰，特别是低密度脂蛋白 (LDL)在体内被氧化修饰形成氧化型脂蛋白 (OX－LDL)，OX－LDL具有细胞毒性作用，可以直接损伤内皮细胞本身［8］，还可使血管内皮产生的超氧化物阴离子增加，细胞外NO的灭活增加［9］。最近研究表明OX－LDL可以显著抑制内皮细胞、巨噬细胞一氧化氮合酶(NOS)基因表达，从而抑制NO合成，增加活性氧的产生［10］。因此积极调脂治疗，减少过氧化脂质的产生，可能对减轻糖尿病内皮细胞损伤、减缓微血管并发症的发生有积极意义。

血脂康是由中药红曲精炼而成的一种调脂药，其有效成分是HMG－CoA还原酶抑制剂，包含以洛伐他汀为主的13种天然他汀，同时含有多种不饱和脂肪酸、必需氨基酸、生物碱以及黄酮类物质。本研究结果显示，早期DN患者存在血脂紊乱，血脂康组患者在连续治疗12周后血清TC、TG、LDL－C水平较治疗前显著降低，表明血脂康具有良好的降脂作用。研究显示，血脂康组治疗后血清SOD水平显著上升、MDA水平显著下降，提示血脂康具有清除自由基、增加SOD活性、降低脂质过氧化物作用。同时血脂康组治疗后UAER显著降低，这可能与血脂康调节血脂，减少LDL水平，使氧化应激的脂质底物减少，OX－LDL的产生相应减少，从而减轻对内皮细胞的损伤并抑制活性氧的产生有关。此外，血脂康含有的多种他汀类物质、生物碱以及黄酮类物质，对改善氧化应激也有促进作用。

综上所述，早期DN患者体内存在氧化－抗氧化平衡失调所致的氧化应激。氧化应激可通过损伤血管内皮细胞，在DN的发病过程中起一定的作用。血脂康能够降低早期DN患者血中TC、TG和LDL－C水平，并显著降低MDA水平，增加SOD活性，降低UAER，对早期DN的治疗有积极意义。

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2 Haidara MA，Mikhailidis DP，Rateb MA，et al.Evaluation of the effect of oxidative stress and vitamin E supplementation on renal function in rats with streptozotocin－induced Type 1 diabetes［J］.J Diabetes Complications，2009，23(2):130－136.

3 丁俊蓉，周益伟，许华强.血脂康对2型糖尿病肾病血脂和微量白蛋白的影响［J］.现代中西医结合杂志，2008，17(10):1461－1462.

4 Browlee M.The pathobiology of diabetic complications，a unifying mechanism［J］.Diabetes，2005，54(6):1615 －1625.

5 Brownlee M.Biochemistry and molecular cell biology of diabetic complications［J］.Nature，2001，414(6865):813－820.

6 Aksun AS，Ozmen B，Ozmen D，et al.Serum and urinary nitric oxide in type 2 diabetes with or without microalbuminuria:relation to glomerular hyperfihration ［J］.J Diabetes Complications，2003，17(6):343－348.

7 Susztak K，Raft AC，Schiffer M，et al.Glucose－induced reactive oxygen species cause apoptosis of podocytes and podocyte depletion at the onset of diabetic nephropathy［J］.Diabetes，2006，55(1):225 －233.

8 Hadi HA，Carr CS，Suwaidi JAI.Endothelial dysfunction:cardiovascular risk factors，therapy，and outcome ［J］.Vasc Health Risk Manag，2005，1:183－198.

9 Naseem KM.The role of nitric oxide in cardiovascular diseases［J］.Mol Aspects Med，2005，26:33－65.

10 Jiang Y，Zhang J，Xiong J，et al.Ligands of peroxisome proliferatoractivated receptor inhibit homocysteine－induced DNA methylation of inducible nitric oxide synthase gene［J］.Acta Biochim Biophys Sin(Shanghai)，2007，39:366－376.