牛王刺对小鼠肠系膜微循环的影响

董兴高

湖北民族学院医学院，湖北 恩施 445000

牛王刺为豆科植物云实Caesalpinia decapetala(Roth)Alston［Reichrdia decapetala Roth;Caesalpinia sepiaria Roxb.］的干燥根。为恩施常用民族药物，味辛性温。具祛风除湿，散瘀止痛，解毒消肿功效［1－2］。我们前期研究已证实牛王刺具有明显的镇痛、抗炎作用［3－4］。本实验观察了牛王刺对正常小鼠肠系膜微循环细动、静脉血管口径以及毛细血管开放量情况的影响，探讨其活血作用的机制，为开发利用牛王刺提供理论依据。

1 材料和方法

1.1 药材 牛王刺由湖北咸丰县中医院提供。

1.2 动物 ICR昆明小鼠，体重18～22g，雌雄兼用，由湖北省实验动物研究中心提供，合格证号:SCKK2003－0005。

1.3 试剂 乌拉坦溶液由本院医学实验中心提供，乙醇为分析纯。

1.4 供试液的制备 取供试药材适量，用50%乙醇超声提取2次，每次45分钟，合并，回收乙醇，滤过，将滤液浓缩配制成1g/ml(按生药材计算)的水溶液，备用。

1.5 仪器 CQ－250超声波清洗器 (上海弘兴超声电子仪器有限公司)，X52－H光学显微镜 (成都泰盟科技有限公司提供)，TK－C721EC彩色摄象机 (北京杰伟世音频设备有限公司组装)，HW－2000微循环数字恒温仪 (成都泰盟科技有限公司生产)，BI2000图象分析系统 (成都泰盟科技有限公司生产)等。

1.6 小鼠肠系膜微循环的测定 选取小鼠10只，按照每只0.5ml牛王刺提取液的标准灌胃后，按0.7ml/100g标准肌注乌拉坦溶液麻醉，沿小鼠腹部中线用手术剪刀切开，置显微镜载物台上并固定，调节显微镜，在回盲部分别选取10～20μm之间的细动脉和20～30μm之间的细静脉各一支，用100倍镜进行观察，用显微测微尺分别测定给药后10min、20min、30min、60min小鼠肠系膜微循环细动脉(A)及细静脉 (V)的口径。同时记录给药后10min、20min、30min、60min毛细血管开放数量 (毛细血管网交点记数法)，以判断微循环改善情况［5］。

1.7 统计学方法 以平均值±SD表示，配对t检验，由spss11.5系统完成。

2 结果

2.1 牛王刺对小鼠肠系膜微血管口径的影响 给药后小鼠肠系膜微循环细动、静脉口径在60min内呈增大状态，30min时为作用高峰，60min仍然有扩张作用，与10min时作用强度相似，与给药前相比差异均有统计学意义 (表1～2)，表现出快速而持久的扩张血管的作用，从而改善局部的微循环。

表1 牛王刺对正常小鼠肠系膜细动脉口径的影响(±SD，n=10)

表1 牛王刺对正常小鼠肠系膜细动脉口径的影响(±SD，n=10)

注:与给药前相比，＊＊p＜0.01。

给药前A口径(m)给药后A口径 (m)10min(增加值)20min(增加值)30min(增加值)60min(增加值)15.4 ±1.43 16.7 ±1.53＊＊(1.30±0.840)18.3 ±1.57＊＊(2.60±0.673)19.3 ±1.70＊＊(3.90±0.735)16.6 ±1.48＊＊(1.20±0.630)

表2 牛王刺对正常小鼠肠系膜细静脉口径的影响 (±SD，n=10)

表2 牛王刺对正常小鼠肠系膜细静脉口径的影响 (±SD，n=10)

注:与给药前相比，*p＜0.05，＊＊p＜0.01。

给药前V口径(m)给药后V口径 (m)10min(增加值)20min(增加值)30min(增加值)60min(增加值)25.5±2.20 26.7±2.40*(1.20±1.220)27.9 ±2.41＊＊(2.40±0.962)28.8 ±2.74＊＊(3.30±0.820)26.5 ±1.95＊＊(1.00±0.941)

2.2 牛王刺对小鼠毛细血管开放量的影响 给药后小鼠肠系膜血流速度加快，毛细血管开放数量增多，在30min时达到高峰，60min时仍然有较好的作用，作用强度与10min时相似，与给药前相比差异均有统计学意义 (表3)。

表3 牛王刺对正常小鼠肠系膜毛细血管开放量的影响 (±SD，n=10)

表3 牛王刺对正常小鼠肠系膜毛细血管开放量的影响 (±SD，n=10)

注:与给药前相比，＊＊p＜0.01。

给药后 (个/mm2)给药前(个/mm2)10min(增加值)20min(增加值)30min(增加值)60min(增加值)4.7 ±0.68 5.7±1.20＊＊(1.0±0.65)6.8 ±1.23＊＊(2.1±0.62)8.2 ±1.12＊＊(3.5±0.68)5.5 ±0.95＊＊(0.8±0.46)

3 讨论

本实验采用活体肠系膜微循环观察法，检测了牛王刺对小鼠肠系膜微循环的影响。实验结果表明牛王刺对小鼠肠系膜细动脉和细静脉口径均具有不同程度的扩张作用，能增加微毛细血管的开放数量，作用迅速持久。另外，在实验中观察到在给药后10～15min，伴随着毛细血管开放数量的增加，微循环血流速度也明显加快。因此，扩张毛细血管、增加毛细血管开放数量和增加微循环血流速度是牛王刺具有良好活血、镇痛作用的机制之一，这将为牛王刺用于临床治疗微循环障碍类疾病提供参考。但牛王刺对肠系膜微循环影响的主要活性部位或成分还有待进一步明确。研究其对血液流变性和凝血机制的影响，能更全面深入了解牛王刺活血和镇痛的作用机理。

［1］方志先.土家族药物志 (上册) ［M］.北京:中国医药科技出版社，2007:190.

［2］国家中医药管理局《中华本草》编委会.中华本草 (第4卷) ［M］.上海:上海科学技术出版社，1999:370.

［3］董兴高.牛王刺镇痛作用的实验研究 ［J］.中国民族民间医药，2012，21(174):35.

［4］董兴高.牛王刺抗炎作用的实验研究 ［J］.中国民族民间医药，2012，21(177):48－50.

［5］陈奇.中药药理研究方法学［M］.北京:人民卫生出版社，1993:499－503.