楮实子总生物碱抗肿瘤作用初步研究＊

2012-04-17庞素秋王国权黄宝康秦路平

中国药业 2012年22期

庞素秋，王国权，3，黄宝康，秦路平

(1．中国人民解放军第180医院药械科，福建泉州 362000;2．中国人民解放军第二军医大学药学院，上海 200433;3．华侨大学，福建泉州 362000)

楮实子为桑科植物构树的干燥成熟果实，具有补肾清肝、明目利尿的功效。笔者前期对楮实子的化学成分进行了系统研究，分离并鉴定了白屈菜红碱、两面针碱、异两面针碱、鹅掌揪宁等多种异喹啉类生物碱[1－2]。因其结构独特，在抗肿瘤方面有很强的活性，且毒副作用小、生产成本低，引起了很多研究学者的关注[3]。为进一步研究楮实子总生物碱的抗肿瘤活性，笔者用荷瘤小鼠动物模型进行了验证试验。

1 材料与方法

1．1 仪器与材料

楮实子总生物碱(自制);羟基喜树碱(北京双鹭药业有限责任公司，规格为5 g/2 L，用时以0．9%氯化钠注射液稀释至所需浓度，批号为20080108)。S180实体瘤抑瘤试验:昆明种小鼠50只，雌性，体重(21．25±1．56)g;S180腹水瘤小鼠1只;H22实体瘤抑瘤试验:昆明种小鼠50只，雌性，体重(20．95±2．13)g;H22腹水瘤小鼠1只;ESC实体瘤抑瘤试验:昆明种小鼠50只，雄性，体重(22．02±2．26)g;EAC 腹水瘤小鼠 1只。

1．2 方法

楮实子总生物碱制备:楮实子干燥至恒重，粉碎，称取2．0 g，放入200 mL圆底烧瓶中，加入pH为2～3的50 mL 80% 乙醇，加热回流1．5 h，抽滤，分离原料和提取液，在滤渣中加入同样酸度的100 mL 80%乙醇，第2次提取1．5 h，抽滤，合并两次提取液。将提取液蒸馏浓缩(回收溶剂)后，用3 mol/L硫酸(盐酸)溶解，抽滤，将滤液用浓氨水调pH为10左右，溶液变浑浊，加入10 mL饱和氯化钠溶液洗涤，再分别用50，45，40，35 mL的三氯甲烷萃取4次，蒸馏萃取液，回收溶剂，剩余的浓溶液转移至小烧杯中，置水浴上加热，尽量除去溶剂后置75℃烘箱中烘干，得黄褐色总生物碱，使用时以0．5%羧甲基纤维素钠配制成所需浓度。

动物试验:S180，H22，EAC腹水瘤小鼠，无菌条件下分别抽取腹水，记数细胞，用0．9%氯化钠溶液稀释为1×107～2×107个/mL，按0．2 mL/只给小鼠腋下皮下接种。将接种不同瘤株的小鼠于接种次日随机分为5组，每组10只。阴性对照组给予蒸馏水(20 mL/kg);阳性对照组给予羟基喜树碱(5 mg/kg)，楮实子总生物碱按60，30，15 mg/kg灌胃给药。每日1次，隔日称重，连续10 d后处死，取瘤块称重，计算抑瘤率、体重增长率。

1．3 统计学处理

数据以X±s表示，用t检验进行统计学分析。

2 结果

结果见表1至表3。可见，楮实子总生物碱60 mg/kg剂量组对小鼠S180实体瘤、H22实体瘤和ESC实体瘤均有抑制作用，抑瘤率超过40%。

3 讨论

楮实子为我国传统中药，有上千年的入药历史。许继平等[4]曾报道，伍用楮实拟方“扶肺煎”(生晒参、黄芪、楮实子等)追踪治疗中、晚期肺癌5年发现，扶肺煎具有免疫增加作用和抗肿瘤作用。本研究从进一步对该药材抗肿瘤活性进行了验证。

楮实总生物碱中含两面针碱、异两面针碱、鹅掌揪宁等多种异喹啉类生物碱[1]。据报道，两面针碱有较强的抗癌作用，两面针碱为拓扑异构酶Ⅰ的功能抑制剂，可抑制拓扑异构酶Ⅰ介导的使pSP64质体DNA超螺旋松开的作用，且比喜树碱更有效。但与喜树碱不同的是，两面针碱又可稳定拓扑异构酶Ⅰ与DNA形成的共价二元复合物，亦能介导B型DNA的展开并与之结合而发挥抑瘤作用[5]。