百里香组织培养技术的研究

徐荣 马玉 魏进莉

摘要：本研究以带腋芽的茎段为外植体，比较了不同浓度的6-BA 和IAA组合对不定芽的诱导和增殖的效果，以及不同浓度的lBA对生根的影响。提出了百里香丛芽诱导和快速增殖适宜培养基及百里香生根培养的适宜培养基及移栽基质。针对野生蒙古百里香在城镇园林中开发利用亟待解决的快速繁殖问题开展研究，对丰富城镇园林绿化植物种类具有重要的理论和实践指导意义。

关键词：百里香；组织培养；

随着全球对环境的重视和花卉产业的发展，不断有新的种类得到开发和利用，百里香（Thymus mongolicus Ronn.）就是众多的在开发或待开发的多功能新花卉之一[1]。全世界百里香属植物约有300—400种，分布在非洲北部、欧洲及亚洲温带。中国有11种，2变种[2]。自然分布于西北 华北和东北地区,如内蒙、甘肃、陕西，青海、宁夏、新疆、山西、河北、北京，东北等地都有天然分布[3-4]。目前中国的百里香属植物多处在野生状态，只在个别地方有引种栽培。百里香属植物的开发利用研究才刚刚起步[5-8]。与国外进行的百里香开发研究相比，差距还很大。在英国，已收集了250多个百里香属植物的野生种和栽培品种，进行了苗木生产、园林应用等研究。百里香是多年生矮小半灌木，百里香的株型奇特低矮，花型小，花色艳丽，且全株芳香。花期长、植株成簇状匍匐生长，耐干旱、耐瘠薄、耐寒，是不可多得的优良地被植物，可作为优良的节水型园林绿化材料在城市园林绿地中应用。目前百里香的开发利用亟待解决快速繁殖问题。因此，研究建立百里香快速繁殖技术体系，对丰富城镇园林绿化植物种类具有重要的理论和实践指导意义。

1 材料与方法

1.1 试验材料：陕西吴起野生百里香

1.2方法

1.2.1无菌材料的获得：选取生长健壮、无病虫害的野生蒙古百里香植株，剪取带腋芽的茎段，对带腋芽的茎段冲洗表面，然后用洗涤灵溶液浸泡10min，流水冲洗30min后，在超净工作台上，用75%酒精浸泡30s消毒，无菌水冲洗3遍，再用0.1%升汞浸泡8 min，用无菌水冲洗5次，切掉与药液接触部位，制成无菌茎段。

项目来源：

作者介绍：徐荣 女，1963年6月生，研究员,博士，从事园林植物繁育技术研究。

1.2.2 不定芽的分化：将上述处理好的外植体材料，在超净工作台上剪切成2~3cm长带

有2~3个腋芽的茎段，每瓶接种1个茎段，每个处理个30瓶，接种到丛芽诱导培养基上，培养温度24±2℃，光照度3000 Lux，光质为荧光灯，光照12h.d-1。

丛芽诱导培养基的配方为：

（1）MS +蔗糖30g/L +琼脂7g/L +6-BA 0.5mg/L +IAA0.1mg/L，pH5.8-6.0；

（2）MS +蔗糖30g/L +琼脂7g/L +6-BA 0.5mg/L +IAA0.5mg/L，pH5.8-6.0

（3）MS +蔗糖30g/L +琼脂7g/L +6-BA 0.5mg/L，pH5.8-6.0

（4）MS +蔗糖30g/L +琼脂7g/L +6-BA 1mg/L，pH5.8-6.0

1.2.3 丛生芽快速增殖：当分化出的丛生芽长到1-1.5cm以上，将丛生芽剪切为每丛2至3个芽，转接到增殖培养基上继代培养，培养温度24±2℃，光照度3000 Lux，光质为荧光灯，光照12h.d-1。

增殖培养基的配方为：

（1）MS +蔗糖30g/L +琼脂7g/L +6-BA 1mg/L +IAA0.1mg/L，pH5.8-6.0

（2）MS +蔗糖30g/L +琼脂7g/L +6-BA 1mg/L +IAA0.5mg/L，pH5.8-6.0

（3）MS +蔗糖30g/L +琼脂7g/L 6-BA0.5 mg/L +IAA0.2 mg/L，pH5.8-6.0

1.2.4 生根培养：将丛生芽小苗接种到膜封口的瓶装生根培养基上诱导生根；每个浓度培养基接9瓶，每瓶5株。培养30天统计植株长出的主根数。培养温度24±2℃，光照度3000 Lux，光质为荧光灯，光照12h.d-1。

生根培养基的配方为：

（1）MS +蔗糖30g/L +琼脂6g/L +IBA 0. 2mg/L，pH5.8-6.0

（2）MS +蔗糖30g/L +琼脂6g/L +IBA 0. 5mg/L，pH5.8-6.0

（3）MS +蔗糖30g/L +琼脂6g/L +IBA 0.7 mg/L，pH5.8-6.0

（4）MS +蔗糖30g/L +琼脂6g/L +IBA 1 mg/L，pH5.8-6.0

1.2.5 炼苗与移栽：在生根培养基上培养26-27天，且长到3cm以上，除去封口膜敞瓶炼苗3-4天，取出组培苗，以每丛5-7株为单位，洗净根上培养基，在0.5%高锰酸钾溶液中浸蘸5-10s；进行消毒后，移栽到盛有用0.5%高锰酸钾溶液消毒的营养土的营养钵中栽培。栽培条件为：保持温度25±2℃左右，空气湿度80±2%左右，每天喷水3-4次，13至15天成活。营养土的配方为：草炭：珍珠岩：蛭石=2：1：1。

1.2.6 统计分析

采用SPSS软件进行数理统计分析。

2 结果与分析

2.1丛芽的诱导

在丛芽诱导培养基接种后4d时，腋芽明显膨大，培养15d时，腋芽处长出小芽，培养21天统计，结果见表1。6-BA0.5 mg/L +IAA0.1 mg/L培养基的诱导数26个，诱导率87.5%，均高于其它培养基。表明：激素浓度6-BA0.5 mg/L +IAA0.1 mg/L培养基对百里香丛芽诱导效果较好。

2.2丛生芽快速增殖

增殖培养基上继代培养，30d统计增值率。由表2可见，百里香在激素浓度6-BA1 mg/L +IAA0.5 mg/L培养基中的增值率明显高于6-BA1 mg/L +IAA0.1 mg/L和6-BA0.5+IAA0.2培养基中的增值率。

2.3 生根与移栽

生根培养25天统计生根结果（见表3 ），激素浓度IBA 0.7 mg/L生根培养基第5天开始生根，25天平均生根数为6.9个，显著高于其它培养基的平均根数，平均根长3.91 cm。生根率为100%。移栽到盛有草炭：珍珠岩：蛭石（2：1：1）营养土的营养钵中栽培，移栽成活率极显著的高于其它生根培养基（p<0.01）。

大写字母表示差异到达极显著水平（p<0.01），小写字母表示差异到达显著水平（p<0.05）

3 讨论

3.1激素浓度6-BA0.5 mg/L +IAA0.1 mg/L培养基对百里香丛芽诱导效果较好。

3.2 激素浓度6-BA1 mg/L +IAA0.5 mg/L培养基中的增值率高于其它培养基，是百里香丛

生芽快速增殖适宜的培养基。

3.3激素浓度IBA 0.7 mg/L生根培养基对百里香生根培养的效果极显著地高于其它激素浓度

的培养基，移栽到盛有草炭：珍珠岩：蛭石（2：1：1）营养土的营养钵中栽培，移栽成

活率极显著的高于其它生根培养基（p<0.01）。

是百里香生根培养的适宜的培养基。

3.4 本研究成功建立了百里香（Thymus mongolicus Ronn.）快速繁殖的方法和条件，创立了百里香快速繁殖技术体系。

参考文献

[1] 周秀梅，李保印. 抗寒耐旱的百里香属植物资源及其开发利用[J].干旱区资源与环境，2008，vol.22(7).

[2] 中国科学院中国植物志编写委员会．中国植物志[M]．第 六 十 六 卷.北京：科学出版社，1977,58- 59.

[3] 内蒙古植物志编辑委员会. 内蒙古植物志 M . 第五卷.呼和浩特,内蒙古人民出版社: 1980. 14- 16.

[4] 刘云斌．百里香天然资源及其园林应用[J]．林业实用技术，2005，(2)：43-44．

[5] 李晓东等.普通百里香的组织培养和快速繁殖[J].湖北农业科学，2009，vol.48(6)1295-1297.

[6]王玲，苏含英.黑龙江省4种百里香属植物嫩枝的扦插繁殖[J].东北林业大学学报，2008，vol.36(1).12-13.

[7] 杨莉等.百里香不定芽的增殖研究[J].湖北农业科学，2010，vol.49(8)1807-1809.

[8] 高润宏等.地被植物百里香在干旱区绿化资源利用的评价[J].中国草地，2005，vol.,27 (3)57-60.

“十一五”国家科技支撑计划课题《城镇绿地生态建设综合技术示范研究》

课题号2008BAJ10B06

注：文章内所有公式及图表请以PDF形式查看。