扶正固本胶囊对肾阳虚动物的影响

杨和金，崔 涛，吕素珍，杨新义，赵春梅，吴德松

（1.云南省药物研究所，云南 昆明 650111；2.云南省玉溪市动物卫生监督所，云南 玉溪 653100；3.云南省澂江县凤麓镇兽医站，云南 澂江 652500）

扶正固本胶囊对肾阳虚动物的影响

杨和金1，崔 涛1，吕素珍2，杨新义3，赵春梅1，吴德松1

（1.云南省药物研究所，云南 昆明 650111；2.云南省玉溪市动物卫生监督所，云南 玉溪 653100；3.云南省澂江县凤麓镇兽医站，云南 澂江 652500）

目的：研究扶正固本胶囊对大、小鼠肾阳虚模型的治疗作用。方法：采用雄性大、小鼠氢化可的松所致肾阳虚模型，将造模成功的大、小鼠随机分为模型组、阳性组和扶正固本胶囊低（2.5 g／kg）、中（5 g／kg）、高（10 g／kg）剂量组，另设空白对照组。小鼠连续灌胃给药8 d，大鼠连续灌胃给药21 d，并在相应的时间称量动物的体重，测量低温游泳存活时间，取出肾上腺、胸腺、脾脏、包皮腺、睾丸、前列腺和精液囊，称湿重，进行统计分析。结果：扶正固本胶囊内服给药，在2.5 g／kg，5 g／kg的剂量可显著延长肾阳虚小鼠冰水游泳的时间，在5 g／kg，10 g／kg的剂量可显著延长肾阳虚大鼠冰水游泳的时间，且10 g／kg剂量对肾阳虚大、小鼠肾上腺、脾脏萎缩有显著改善作用；对肾阳虚大、小鼠的胸腺指数和性器官无明显影响。结论：扶正固本胶囊对氢化可的松所致的大、小鼠肾阳虚模型有明显的治疗作用。

扶正固本胶囊；肾阳虚模型；大鼠；小鼠

肾阳虚证的研究一直是中医研究的重点，现代医学研究认为，肾阳虚证与神经内分泌免疫系统（NEIS）有关，肾阳虚证（是由于）在下丘脑－垂体－靶腺（肾上腺皮质、甲状腺、性腺和胸腺）轴不同环节、不同程度的功能紊乱，且主要发病环节在下丘脑（或更高级）的调节功能紊乱，随着科技的发展，越来越多地采用先进技术对肾阳虚证动物模型及其药物影响进行研究［1］。肾阳虚临床主要表现为面色晄白，形寒肢冷，精神不振，腰膝酸冷，阳痿阴缩、遗精尿频，小便清长，余沥不净，夜尿频多，女子带下清稀、宫寒不孕，或尿少心悸，肢肿气短，喘咳痰饮等，舌淡苔白润，脉虚弱无力［2］。

扶正固本胶囊主要由附子、枸杞、肉桂等多味药组成的中药复方制剂，附子功能峻补元阳，益火之源，凡肾阳不足，命火衰微，气化功能减退所致的诸证，都可用附子治之，如果配伍肉桂、枸杞等多味药，有温补肾阳，鼓舞肾气，有益火、温肾化气的功效。本次实验采用扶正固本胶囊灌胃给药于用氢化可的松造成肾阳虚的大、小鼠，观察给药后大、小鼠的体重、低温游泳时间、免疫器官指数、性器官指数等指标，研究其对雄性大、小鼠肾阳虚的治疗作用。

1 材料与方法

1.1 实验材料 扶正固本胶囊，临床用量为30 g／d，1次／d。小鼠用量按临床用量的20、10、5倍折算成2.5 g／kg，5 g／kg，10 g／kg 3个剂量组。批号：20090820，由云南药物研究所科研部提供。金匮肾气丸，云南省腾冲制药厂生产，批号：081233；桂附地黄丸，九芝堂股份有限公司生产，批号：20090133；氢化可的松，西安利君制药有限责任公司生产，批号：080408。

SPF级ICR小鼠，雄性，体重（18～22）g；SPF级SD大鼠，雄性，体重（200～250）g；由昆明医学院动物中心提供。许可证号：SCXK（滇）20050008；饲料许可证：SCXK（滇）20050009；动物使用许可证：SCXK（滇）20050001。AG285型电子分析天平，METTLER TOLEDO公司生产。

1.2 试验方法

1.2.1 扶正固本胶囊对肾阳虚小鼠的影响［3］雄性小鼠，分组见表1，按0.3 m L／10 g灌胃给药。除空白对照组外，其余5组ig氢化可的松注射液，剂量1 mg／只（12 d），造模后根据肾阳虚症状的指标：怕冷、畏寒喜暖、四肢不温、倦缩拱背、精神萎顿、消瘦等确定模型成功与否。选择模型成功小鼠，于第13 d开始灌胃给药，空白对照组及模型组给予等体积的蒸馏水，其他各组按分组给予受试药物，连续给药8 d。观察指标：1）对小鼠体重的影响：给药第8 d，称动物体重，取平均数与模型对照组比较，进行统计学检验。2）对小鼠低温游泳存活时间的影响：末次给药1 h后，将小鼠放入水温为（8±1）℃的水中。记录其入水至溺死的游泳存活时间。3）对小鼠免疫器官和性器官的影响：记录完小鼠的游泳存活时间后，即刻将小鼠取出行解剖术，取肾上腺、胸腺、脾脏、包皮腺、睾丸、前列腺和精液囊，称湿重，计算脏器指数，取平均数与模型对照组比较，进行统计学检验。

1.2.2 扶正固本胶囊对肾阳虚大鼠的影响［4］雄性大鼠，分组见表4，按1mL／100 g灌胃给药。除空白对照组外，其余大鼠均每日肌内注射氢化可的松注射液10 mg／只，连续12 d，造成肾阳虚模型，造模后根据肾阳虚症状的指标：怕冷、畏寒喜暖、四肢不温或厥逆、小便清长、脉细、舌淡胖、倦缩拱背、精神萎顿、消瘦等确定模型成功与否。选择模型成功大鼠，于第13 d开始灌胃给药，正常对照组及模型组给予等体积的蒸馏水，其他各组按分组给予受试药物，连续给药21 d，观察指标：1）对大鼠体重的影响：给药第20 d，称动物体重，取平均数与模型对照组比较，进行统计学检验。2）对大鼠低温游泳存活时间的影响：末次给药1 h后，将大鼠放入水温为（4±1）℃的水中。记录其入水至溺死的游泳存活时间。4）对大鼠免疫器官和性器官的影响：记录完大鼠的游泳存活时间后，即刻将大鼠取出行解剖术，取其肾上腺、胸腺、脾脏、包皮腺、睾丸、前列腺和精液囊，称湿重，计算脏器指数。取平均数与模型对照组比较，进行统计学检验。

1.3 统计方法 采用统计软件SPSS11.5处理数据，结果用（±s）表示。

2 试验结果

2.1 对肾阳虚小鼠的影响 见表1。

表1 扶正固本胶囊对肾阳虚小鼠体重、低温游泳时间、免疫器官的影响（±s，n＝12）

表1 扶正固本胶囊对肾阳虚小鼠体重、低温游泳时间、免疫器官的影响（±s，n＝12）

注：与空白对照组比较：▼P＜0.05，▼▼P＜0.01，与模型组比较：＊P＜0.05，＊＊P＜0.01

组别 剂量（／kg） 体重（g） 游泳时间（min） 肾上腺指数 胸腺指数 脾脏指数空白对照组 32.23±1.44 18.22±2.46 0.13±0.03 1.67±0.27 3.84±0.60模型对照组 25.24±1.89▼▼ 13.56±2.52▼ 0.08±0.02▼▼ 1.60±0.42 2.83±1.73▼桂附地黄丸对照组 4.0 g 27.57±1.68▼▼ 18.51±2.50＊＊ 0.08±0.03▼▼ 1.53±0.42 2.89±2.24▼2.5 g 28.73±1.64▼▼ 18.94±2.65＊＊ 0.08±0.03▼▼ 1.76±0.32 2.82±0.63▼扶正固本胶囊 5.0 g 28.97±2.17▼▼ 17.20±1.80＊＊ 0.09±0.02▼▼ 1.73±0.34 3.10±0.77▼10.0 g 28.21±2.33▼▼ 15.45±2.23 0.11±0.03▼▼ 1.96±0.36＊＊3.65±0.63▼

2.2 对肾阳虚小鼠性器官的影响 见表2

表2 扶正固本胶囊对肾阳虚小鼠性器官的影响（±s，n＝12）

表2 扶正固本胶囊对肾阳虚小鼠性器官的影响（±s，n＝12）

组别动物（只）剂量（／kg） 包皮腺指数 睾丸指数 前列腺指数空白对照组10 3.26±0.80 7.30±0.31 8.28±1.03模型对照组 12 2.83±0.83 8.43±1.16 9.01±1.28桂附地黄丸对照组 12 4.0 g 2.99±0.83 7.79±1.92 8.48±1.16 12 2.5 g 2.98±0.83 8.07±0.75 8.55±0.91 2.90±0.61 8.02±0.84 8.85±0.92扶正固本胶囊 12 5.0 g 2.73±0.68 8.44±0.77 8.91±0.95 12 10.0 g

2.3 对肾阳虚大鼠的影响 见表3。

表3 扶正固本胶囊对肾阳虚大鼠体重、低温游泳时间、免疫器官的影响（±s，n＝12）

表3 扶正固本胶囊对肾阳虚大鼠体重、低温游泳时间、免疫器官的影响（±s，n＝12）

注：与空白对照组比较：P▼＜0.05，P▼▼＜0.01，与模型组比较：＊P＜0.05，＊＊P＜0.01

组别 剂量（／kg） 体重（g） 游泳时间（min） 肾上腺指数 胸腺指数 脾脏指数空白对照组 466.66±43.52 10.73±1.66 0.15±0.024 0.64±0.20 4.17±0.421模型对照组 406.49±36.12▼ 8.66±1.35▼▼ 0.10±0.028▼ 0.50±0.20 3.22±0.74金匮肾气丸对照组 4.0 g 429.26±29.54 10.56±1.47＊ 0.12±0.029 0.66±0.13 3.84±1.13 2.5 g 430.33±27.68 9.99±2.91 0.11±0.023 0.55±0.19 3.52±1.37扶正固本胶囊 5.0 g 446.13±46.23 10.60±1.30＊ 0.12±0.025 0.61±0.17 3.61±1.06 10.0 g 470.07±31.16＊ 11.68±1.39＊＊ 0.14±0.022＊0.77±0.20 3.96±0.58

2.4 对肾阳虚大鼠性器官的影响 见表4。

表4 扶正固本胶囊对肾阳虚大鼠性器官的影响（±s，n＝12）

表4 扶正固本胶囊对肾阳虚大鼠性器官的影响（±s，n＝12）

注：与模型组比较：＊P＜0.05，＊＊P＜0.01

组别 剂量（／kg） 包皮腺指数 睾丸指数 前列腺指数空白对照组0.38±0.071 5.65±1.49 5.76±0.36模型对照组 0.28±0.053 6.36±1.68 6.61±1.00＊金匮肾气丸对照组 4.0 g 0.32±0.036 7.20±1.21＊ 6.29±0.75 2.5 g 0.32±0.036 5.84±1.63＊ 6.28±0.50＊扶正固本胶囊 5.0 g 0.32±0.060 7.71±1.54＊＊ 6.87±0.89 10.0 g 0.34±0.063 7.70±1.90＊＊6.89±0.97

试验结果显示：扶正固本胶囊内服给药，连续8 d，在2.5 g／kg，5 g／kg的剂量可显著延长肾阳虚（氢化可的松）小鼠冰水游泳的时间；且10 g／kg剂量对氢化可的松所至的肾上腺、脾脏萎缩有显著改善作用；对肾阳虚小鼠的胸腺指数和性器官无明显影响。

扶正固本胶囊内服给药，连续21 d，在5 g／kg、10 g／kg的剂量可显著延长肾阳虚（氢化可的松）大鼠冰水游泳的时间；且10 g／kg剂量对氢化可的松所至的肾上腺、脾脏萎缩有显著改善作用；对肾阳虚大鼠的胸腺指数和性器官无明显影响。以上试验结果显示：扶正固本胶囊对氢化可的松所致的大、小鼠肾阳虚模型有明显的改善作用。

3 讨论

肾阳虚证的主症有腰膝酸软，性欲减退，畏寒肢冷；次症有精神萎靡，夜尿频多，下肢浮肿，动则气促，发槁齿摇，舌淡苔白，沉迟，无力。本实验采用经典的肾阳虚造模方法制造大、小鼠肾阳虚模型，其特点是模型与肾阳虚患者的表现吻合，能够体现肾阳虚的病变机制，且造模方法固定，成功率高［5］。扶正固本胶囊内服给药，相应剂量可显著延长肾阳虚大、小鼠冰水游泳的时间，体重增长明显，表明扶正固本胶囊有改善腰膝酸软、四肢无力，减轻多种肾阳虚证候，增强机体抗应激作用，同时体重增重表明扶正固本胶囊有恢复蛋白质合成的作用，这些作用可能都与扶正固本胶囊甘温入肾，能温阳、益肾作用有关。

肾阳虚证与免疫功能密切相关，肾阳虚证患者临床表现为细胞免疫、体液免疫下降，在免疫器官方面，主要表现为脾脏、胸腺缩小、重量减轻［6］。本实验扶正固本胶囊10 g／kg剂量对氢化可的松所至的肾上腺、脾脏萎缩有显著改善作用，这些作用说明扶正固本胶囊能增强肾阳虚证的免疫功能，所以扶正固本胶囊对氢化可的松所致的大、小鼠肾阳虚模型有明显的改善作用。

临床药理学研究证明，助阳剂对垂体－肾上腺轴、垂体－甲状腺轴和垂体－性腺轴均有兴奋作用，反证了肾阳虚证的内分泌功能衰退的病理实质［7］。本制剂含附子、枸杞、肉桂等药物，对氢化可的松造成的垂体－肾上腺轴功能紊乱的小鼠各项指标有明显的改善，为扶正固本胶囊补肾阳的功效提供了实验依据。肾阳虚模型动物的性腺、性器官重量会减轻、萎缩，经药物治疗后，动物睾丸、精液囊、前列腺重量会有所增加。在本次实验中，与空白组比较，各组动物睾丸指数、前列腺指数有增加趋势，但无明显影响，与模型组比较各给药组动物睾丸指数、前列腺指数无明显变化，采取其他肾阳虚模型作进一步研究。

［1］蔡定芳，沈自尹，陈晓红，等 .乌头碱对大鼠下丘脑促肾上腺皮质激素释放激素含量的影响［J］.中西医结合杂志，1996，16（9）：544.

［2］肖静，王毅兴，高建东，等 .肾阳虚证的研究进展［J］.上海中医药大学学报.2008.16－19.

［3］陈奇等 .中药药理研究方法学［M］.北京：人民卫生出版社，1993：982～985.

［4］陈奇等 .中药药理研究方法学［M］.北京：人民卫生出版社，1993：1038～1039.

［5］梁华龙，李珊珊，郭芳 .真武汤利水作用机制的实验研究［J］.北京中医药大学学报，1999，22（2）：701.

［6］雷娓娓，黄真炎，郑尚飞，等 .肾虚、脾虚造型动物免疫、内分泌器官超微结构的比较研究［J］.中药新药与临床药理，1999，10（4）：2082211.

［7］仪奎，姜名瑛 .中药药理学［M］.北京：中国中医药出版社，1992：24.

Effect of Fuzhengguben Capsule on Animals with Deficiency of Kidney Yang

YANG He－jin，CUI Tao，Lv Su－zhen，et al

（Yunnan Institute of Pharmacology，Kunming，Yunnan，650111）

Objective：To study the effect of Fuzhengguben Capsule on big and small mice with deficiency of kidney yang.Methods：Male big and small mice were used to make kidney yang deficiency model by hydrocortisone，which were randomly divided into a model group，positive group，Fuzhengguben Capsule groups（2.5 g／kg），medium dose group（5 g／kg），high dose group（10 g／kg）as well as blank control group.The small mice were given a continuous intragastric administration for 8 days while the big small mice were administered orally for 21 days.The weight of the mice was weighed in the appropriate time and the swimming survival time was measured at low－temperature.The adrenal gland，thymus，spleen，preputial glands，testes，prostate and sperm sac of the mice were taken out and measured at wet weight and analyzed statistically.Results：The small mice of Fuzhengguben Capsule groups，orally administered 2.5 g／kg and 5 g／kg dose，could significantly extend the time of the kidney yang deficiency mice swimming in icy water.The big mice，administered 5 g／kg and 10 g／kg dose，could significantly extend the time of kidney yang deficiency mice swimming in icy water，and the mice given with 10 g／kg doses significantly improved in the adrenal gland and spleen atrophy of the big and small mice with deficiency of kidney yang，with no obvious impact on the mouse thymus and sexual organs.Conclusion：Fuzhengguben Capsule has an obvious effect on the treatment of hydrocortisone－induced mice model with deficiency of kidney yang.

Fuzhengguben Capsule；deficiency of kidney yang；big mice；small mice

R285

A

1007－2349（2012）05－0048－03

杨和金（1972～），男，云南牟定人，高级工程师，主要从事药理、毒理、新药筛选研究和实验动物管理等工作。

2012－03－06）