西兰花多肽对大鼠C6胶质瘤细胞生长的影响

徐俊杰， 于洪泉， 国 巍， 赵 伟， 金 宏， 温 娜， 齐 玲

西兰花(broccoli)属十字花科芸薹属甘蓝种的一个变种［1］，在我国已广泛种植。研究表明，西兰花的活性成分有抗癌作用［2］。西兰花富含蛋白质，目前对其蛋白或多肽的研究鲜有报道。多肽的毒性低易吸收，活性多肽具有抗癌、抗氧化的作用［3］。因此，进行多肽的研究，对于新型抗肿瘤药物的研发有着重要的意义和极好的应用前景。

1 材料与方法

1．1 细胞培养 将含10%小牛血清的RPMI-1640培养液置于孵箱中预热，自液氮罐中取出大鼠C6胶质瘤细胞株，置于37℃水浴，离心后将细胞用培养基混匀放入培养瓶中，放入5%CO2、37℃培养箱中，饱和湿度下进行培养。80% ～90%汇合时进行传代。

1．2 药物作用后C6细胞生长情况的检测 取对数生长期的胶质瘤C6细胞，胰酶消化后，调整细胞浓度为4×104/ml。将细胞接种于96孔板中，每孔100μl，培养24h后。加入不同浓度西兰花多肽(终浓度为 0、0．01、0．1、1、10μl/ml，由吉林医药学院提取)作用72h，每个浓度设5个复孔。作用结束后每孔加入MTT 20μl，37℃孵育4h，终止细胞培养，弃上清液，每孔分别加DMSO150μl，15min后在酶联免疫检测仪上490nm波长处测定各孔吸光度(A)值，用不加细胞的空白孔调零。

1．3 统计学处理 应用SPSS 17．0统计软件进行数据处理，实验结果以±s表示，组间比较采用t检验，P值＜0．05有统计学意义。

2 结果

西兰花多肽作用后C6胶质瘤细胞生长的情况:药物作用72h后，各药物浓度组都表现为对细胞的抑制作用，与对照组相比，1和10μl/ml组表现出对细胞的显著抑制作用(P＜0．01)，总之，西兰花多肽对C6胶质瘤细胞生长的影响呈现明显的剂量效应关系(见表1)。

表1 西兰花多肽作用后C6胶质瘤细胞的生长情况(±s)

表1 西兰花多肽作用后C6胶质瘤细胞的生长情况(±s)

与对照组相比*P＜0．01

药物浓度(μl/ml)00．01 0．1 1 10 A 值 0．75 ±0．02 0．71 ±0．02 0．74 ±0．03 0．58 ±0．08* 0．07 ±0．01*

3 讨论

胶质瘤是脑肿瘤中最常见的类型，大部分是恶性胶质瘤。由于其生长的部位特殊，因此，对人生命和健康的威胁最大。在胶质瘤研究中，如何用药提高患者的生存期已成为研究的重点［4，5］。胶质瘤标准治疗方法是以手术治疗、放疗和化疗的联合应用，但都会引起机体的损伤。此前研究肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体时发现，诱导胶质瘤细胞发生凋亡不会引起正常组织的损伤，但由于存在耐药，所以需要解决耐药问题。多肽具有多种人体代谢和生理调节功能［6～8］，它可以作为药物或药物前体，且其食用安全性也极高，因此，对多肽的研究和应用是科学研究的一个非常重要的方向。

西兰花多肽可以抑制胶质瘤C6细胞的生长，并且呈现显著的剂量效应关系，药物作用细胞72h后，各浓度药物组都表现为对细胞的抑制作用，与对照组相比，1和10μl/ml组表现出对细胞的显著性抑制作用(P＜0．01)。这一实验初步表明，西兰花多肽对胶质瘤细胞生长起到明显的抑制作用，肿瘤细胞在生长过程中发生抑制可能是多方面的因素，还需要进一步研究其机制，探讨其作为抗癌新药的应用价值。

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