肾舒康合剂对马杉肾炎白兔血脂代谢的影响※

闫翠环 陈志强 张边江 方 敬 陈金金 刘云肖

(河北医科大学中西医结合学院基础护理教研室，河北 石家庄 050091)

马杉肾炎(masugi glomerulonephritis，MGN)是一种典型的抗肾小球基底膜性肾小球肾炎，其主要临床表现为肾病综合征，随着疾病的发展甚至会引起肾功能严重损伤［1］。目前，西医多采用激素类、免疫抑制剂等药物治疗，但其毒副作用较明显，所以寻找具有多种治疗作用，而无毒或低毒的安全药物对MGN的治疗具有重要意义。研究表明，肾舒康合剂能降低尿蛋白，减轻肾组织病理损伤，保护肾功能［2］。本研究通过白兔注射羊抗兔肾血清制备MGN动物模型，同时以肾舒康合剂进行干预性治疗，并设雷公藤多苷组作为对照，通过观察实验动物血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)的变化，观察肾舒康合剂对MGN的治疗作用，并探讨其可能作用机制。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 实验动物 清洁级成年绵羊1只，雌性，12月龄，体质量25 kg，由中国人民解放军第二军医大学动物中心提供，实验动物许可证号SCXK(沪)2007－0003;健康新西兰种大耳白兔46只，9周龄，雌雄各半，体质量1.75～2.25 kg，由武汉市新洲区全耀动物养殖场提供，实验动物许可证号SCXK(鄂)2004－0006。

1.1.2 药品及试剂 肾舒康合剂(药物组成:黄芪15 g，黄精 15 g，生地黄 15 g，丹参 30 g，川芎 15 g，石韦 15 g，白花蛇舌草15 g，积雪草15 g，柴胡10 g，地龙15 g。药材购自河北省安国市一方中药材有限公司，由河北省中医院中药房孟熙中药师鉴定为真品)由河北医科大学中医院提供;雷公藤多苷片(湖南协力药业有限公司，国药准字Z43020138，批号20050702)。TC试剂盒(中生北控生物科技股份有限公司，批号3400195);TG试剂盒(中生北控生物科技股份有限公司，批号3400198);弗氏完全佐剂(Sigma公司，批号Lot102K8930)。

1.1.3 主要仪器 7170－A型全自动生化分析仪(日本日立公司);TGL－16G－A型低温高速离心机(上海安亭科学仪器厂);DK－600A型电热恒温水箱(上海一恒科技有限公司);MDF－382E型超低温冰箱(日本三洋公司)。

1.2 方法

1.2.1 抗原及血清制备 ①白兔肾皮质抗原制备:取健康新西兰种大耳白兔6只，体质量(2±0.25)kg，雌、雄兼用，处死后，取出肾脏，插入导管，用0.9%氯化钠注射液水反复冲洗后，取肾皮质5 g研成匀浆，与弗氏完全佐剂混匀成10 mL，加0.9%氯化钠注射液20 mL，反复研磨制成油包水混悬液，即兔肾抗原。②羊抗兔肾血清制备:取家兔静脉血，抗凝处理后3 000 r/min离心5 min，弃去血浆和白细胞部分，沉积的红细胞用0.9%氯化钠注射液洗涤3次，前2次离心5 min，第3次离心10 min，去除上清液备用。取兔肾抗原，于绵羊皮下分5处注射，每处1 mL，每2周1次，连续4次。末次注射后2周末，取羊动脉血，分离血清，加入等量兔红细胞混匀，置4℃冰箱放置24 h使之充分吸附，离心后吸取上清液，于56℃水浴中灭活30 min，此即羊抗兔肾血清(用双向琼脂扩散法测定，抗血清效价为1∶32)取上清液。

1.2.2 白兔MGN模型制备［3］及分组 选用健康新西兰种大耳白兔，雌雄各20只，适应性喂养1周，分别置于代谢笼里取尿，检测尿蛋白和尿红细胞均为阴性的用于实验。整个实验过程中白兔可自由进食和饮水，温度(22±1)℃，光照明、暗各12 h循环。随机分为正常组、模型组、肾舒康组及雷公藤多苷组，每组各10只。除正常组外，其他各组白兔均经耳缘静脉注射羊抗兔肾血清2 mL，30 min 1次，连续6次。检测尿蛋白呈阳性反应，表明MGN模型制备成功［1］。

1.2.3 给药方法 造模成功后第1 d开始给药。肾舒康组予肾舒康合剂10 mL/(kg·d)(含生药8.16 g)、雷公藤多苷组予雷公藤多苷混悬液10 mL/(kg·d)(含原药5 mg)灌胃给药，模型组和正常组给予等容积0.9%氯化钠注射液灌胃给药，每日1次，连续4周。其中模型组死亡2只。

1.3 观察指标及方法 给药4周末白兔禁食(不禁水)12 h，经耳缘静脉取血，分离血清，采用日立7170－A型全自动生化分析仪检测TC、TG水平，按照试剂盒说明书进行操作。

1.4 统计学方法 采用SPSS 15.0统计学软件进行统计学分析，计量资料采用均数±标准差(±s)表示，采用t检验。

2 结果

各组白兔TC、TG比较见表1。

表1 各组白兔TC、TG比较mmol/L，±s

表1 各组白兔TC、TG比较mmol/L，±s

与正常组比较，*P ＜0.05，＊＊P ＜0.01;与模型组比较，△P ＜0.01

组 别 n TC TG正常组10 1.97±0.36 1.34±0.23模型组 8 3.79±0.51＊＊ 2.26±0.33＊＊肾舒康组 10 3.16±0.29＊＊△ 1.70±0.23＊＊△雷公藤多苷组 10 3.01±0.36＊＊△ 1.63±0.19＊△

由表1可见，模型组、肾舒康组及雷公藤多苷组TC、TG均较正常组明显升高(P＜0.01，P＜0.05)。肾舒康组和雷公藤多苷组TC、TG与模型组比较均明显降低(P＜0.01)。肾舒康组TC、TG稍高于雷公藤多苷组，但无统计学意义(P ＞0.05)。

3 讨论

肾舒康合剂是按肾病综合征脾肾功能失调，阴阳气血不足，水湿、湿热、瘀血阻滞的病机特点拟方。方中黄芪、黄精、生地黄健脾温中而不燥，益肾养阴而不腻，并助诸药之力，使气旺以促血行，祛瘀而不伤正，共奏健脾补肾、益气养阴之功效，为君药;丹参、川芎、地龙、柴胡具有活血化瘀通络、调畅气血运行的功效，其中柴胡配川芎可以气血同治，相互协同以畅行气血，共为臣药;积雪草、白花蛇舌草、石韦清热利湿，解毒消肿，共为佐使药。

近年来，大量临床资料和动物模型及体外研究结果表明，高脂血症可促进肾小球局灶性节段性硬化［4］，脂质尤其是低密度脂蛋白及氧化修饰低密度脂蛋白在引起和促进肾小球硬化的发生和发展中起重要作用。增高的胆固醇沉积于血管壁，损伤血管内膜而加重肾脏的病理进展。由此可见，减少脂质在肾脏的沉积有利于延缓肾小球的病变进程。本实验结果显示，MGN存在脂质代谢紊乱，TC、TG均明显升高，肾舒康合剂治疗后均有所下降，其机制可能是利用黄芪提高脂蛋白脂酶和卵磷脂胆固醇酰转移酶活性，改善脂质代谢紊乱［5］;通过丹参、川芎等降低血液黏度，扩张血管，抗击血小板凝集，抗纤维化及调节免疫功能，从而保护肾单位免受进一步损伤［6－7］。

［1］王海燕.肾脏病学［M］.北京:人民卫生出版社，1996:531－532.

［2］韩琳，张边江，陈志强.肾舒康对家兔C－BSA肾炎模型治疗作用的研究［J］.河北中医药学报，2006，21(3):5－7，26.

［3］闫翠环，方敬，王艳素，等.肾舒康合剂对马杉氏肾炎白兔肾功能的影响［J］.中国药房，2011，22(15):1351－1353.

［4］王时敏，胡作祥.葛根素注射液对肾病综合征患者血脂与血液流变学的影响［J］.中国中西医结合肾病杂志，2004，5(7):406－407.

［5］黄逸辉，邓颖，翁志媛，等.黄芪注射液对肾病综合征患儿尿蛋白影响的研究［J］.现代中西医结合杂志，2004，13(12):1562－1563.

［6］李仪奎，姜名瑛.中药药理理学［M］.北京:中国中医药出版社，1993:598.

［7］梁翠茵，段金虹，程锦轩，等.川芎嗪防治庆大霉素致急性肾功能衰竭的药理机制研究［J］.中国药理学通报，1995，11(5):391－394.