曲美他嗪对糖尿病心肌病大鼠心肌细胞凋亡的影响

于学江 张博静 于江

曲美他嗪对糖尿病心肌病大鼠心肌细胞凋亡的影响

于学江 张博静 于江

目的 探讨曲美他嗪对糖尿病心肌病大鼠心肌细胞凋亡的影响。方法 SD大鼠50只，随机分为对照组，糖尿病心肌病组，曲美他嗪治疗组。第12周末采用Tunel法检测光镜下观察心肌细胞凋亡指数，免疫组化法测定Bcl-2，Bax及p53基因蛋白表达。结果 曲美他嗪治疗组减少p53、Bax的表达，增加Bcl-2表达，抑制细胞凋亡指数。结论 曲美他嗪能有效减少糖尿病大鼠心肌细胞凋亡。

曲美他嗪;糖尿病心肌病;细胞凋亡

糖尿病心肌病目前发病机制尚未阐明，近来研究发现与心肌细胞凋亡有密切关系。曲美他嗪作为改善心肌细胞代谢药物已在临床中广泛应用，但对糖尿病心肌细胞凋亡的研究报道较少。本实验观察曲美他嗪对糖尿病心肌病大鼠心肌细胞凋亡的影响，为临床治疗该病应用中提供参考依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料 从SD大鼠50只随机分出10只作为正常对照组(NC)组，其余尾静脉注射1%STZ溶液，3 d后采尾静脉血测血糖，浓度大于16.7 mmol/L为糖尿病成模。普通饲料喂食6周，随机抽取10只，糖尿病心肌病成模标准:微血管内皮细胞肿胀，线粒体变形，排列紊乱，基底膜不规则增厚，间质成纤维数量增多，细胞外基质胶原积聚。按随机数字表方法将糖尿病大鼠随机分为两组:糖尿病心肌病组(DCM)组，曲美他嗪(QMTQ)组。其后治疗组给予曲美他嗪7.5 mg/d，每天灌胃一次，给药容量为10 m l/kg，NC组和DCM组给予等容量纯净水，持续6周。

1.2 指标测定 大鼠心肌常规石蜡切片后，心肌细胞凋亡按末端脱氧核苷酸转移酶(TdT酶)介导带荧光的dUTP缺口末端标记法(TUNEL)标记凋亡细胞核，切片计高倍视野镜下的凋亡阳性细胞核数/总细胞核数，其平均值为细胞凋亡指数。Bcl-2，Bax及p53基因蛋白表达按试剂盒说明书免疫组织化学染色法检测。

2 结果

心肌细胞凋亡指数与Bcl-2、Bax、p53基因蛋白表达 与NC组相比，TXL组和QMTQ组心肌细胞凋亡指数均增多;Bcl-2表达减弱，Bax、p53表达增强。与DCM组相比，QMTQ组心肌细胞凋亡指数明显减少:Bcl-2表达显著增强，Bax、p53表达显著减弱。

3 讨论

细胞凋亡是导致糖尿病心肌病心功能不全重要事件之一。p53、Bax以及Bcl-2蛋白是目前公认的影响细胞凋亡的重要因素。Kirshenbaum等研究心肌细胞凋亡的分子调节机制，结果证实p53基因为心肌细胞凋亡的激活因子，并且指导促凋亡基因Bax的转录，而且由p53激活的心肌细胞凋亡可以被抗凋亡基因Bcl-2所阻断，支持了Bcl-2是一个强有力的抗凋亡因子。本实验结果显示DCM组大鼠心肌凋亡细胞数目明显升高，与Backlund报道一致［1］。高血糖通过活性氧簇线粒体途径诱导心肌细胞凋亡，并激活了p53基因并使p53蛋白糖基化，引起血管紧张素Ⅱ合成增加，血管紧张素Ⅱ再通过P38有丝分裂原激活蛋白激酶(MAPK)使p53蛋白磷酸化，最终引起心肌细胞凋亡［2］。同时，氧自由基亦可直接引起p53表达增加，抑制Bcl-2的表达，增强Bax的表达。应用曲美他嗪后，治疗组大鼠心肌细胞中p53、Bax表达减弱、Bcl-2表达增强，与DCM组比较差异有显著性，提示曲美他嗪可以通过调节p53、Bax、Bcl-2表达抑制心肌细胞凋亡。使心肌凋亡细胞数目显著减少，考虑曲美他嗪可能通过阻断上述途径抑制糖尿病大鼠心肌细胞凋亡。

曲美他嗪是一种新型的改善心肌代谢的药物，其细胞保护作用是通过直接抑制线粒体的一种酶获得，使心肌能量代谢由脂肪酸代谢转移为葡萄糖氧化［3］。在心肌代谢障碍的情况下，葡萄糖裂解ATP的再合成中需要的氧减少，因此能够改善心肌的能量代谢，提高对低氧应激的耐受能力，抑制氧自由基的产生，从而保护了心肌细胞。但曲美他嗪对心肌细胞凋亡相关蛋白的作用机制，有待于进一步的研究。

［1］Backlund T，Palojoki E，Saraste A，Eriksson A，Finckenberg P，Kyto V，etal.Sustained cardiomyo-cyte apoptosis and left ventricular remodelling after myocardial infarction in experimental diab-etes.Diabetologia，2004，47(2):325-330.

［2］程国杰，崔亮.糖尿病心肌病与心肌细胞凋亡.北京医学，2008，30(1):46-47.

［3］杨建华.曲美他嗪治疗糖尿病心肌病的临床观察.临床合理用药，2011，2(4):30-31.

115007 辽宁省营口经济技术开发区中心医院心内科