淋巴组织细针吸取细胞HE染片褪色后作免疫组化的探讨

罗教秀

淋巴组织细针吸取细胞HE染片褪色后作免疫组化的探讨

罗教秀

目的探讨淋巴组织细针吸取细胞(FNAC)HE染片褪色后作免疫组化的效果。方法12例淋巴组织细针吸取细胞学HE染片，采用高锰酸钾-草酸褪色后应用免疫组织化学S-P法，对12例淋巴组织针吸细胞涂片进行标记，光学显微镜下观察染色效果。结果HE染色细胞学诊断:5例无恶性细胞，4例核异质细胞，3例可疑恶性细胞;HE染片褪色行免疫组化标记后诊断:3例转移性癌，3例可疑恶性淋巴瘤，6例无恶性细胞。结论FNAC检查对初筛淋巴结疾患的良恶性判断及肿瘤分型有重要意义;淋巴组织细针吸取细胞HE染片褪色后行免疫组化染色，方法简便易行，在病理诊断中有一定的应用价值。

淋巴组织;细针吸取细胞;涂片

细针吸取细胞学(FNAC)对于淋巴结各类疾病的分类诊断已有较多文献报道［1］。本文主要探讨淋巴组织细针吸取细胞涂片苏木精-伊红(HE)染片褪色后，行免疫组化染色辅助诊断的效果，现报告如下。

1 资料与方法

1.1 标本和试剂 选用我科细针抽吸淋巴组织细胞标本(HE染色)12例，一抗使用广谱CK、LCA、CD20三种抗体，二抗采用Dako公司的REALTM EnvisionTM通用型二步法检测试剂盒，褪色剂用0.25% 高锰酸钾及0.5%草酸。

1.2 方法 ①选用20ml一次性无菌注射器，注射用7号针头，无需麻醉。操作时沿颈部淋巴结长轴方向进针，进针深度以穿入淋巴结假想半径1/3～2/3为宜。进针后，形成负压，并向不同方向反复提插吸取几次后，用无菌棉球压迫进针部位出针，立即作厚薄均匀的涂片，浸入95%乙醇中固定，HE染色。②将玻片放入I、Ⅱ号缸二甲苯内各30min;先后置入无水酒精、95% 酒精、70%酒精各5min，蒸馏水洗3min。③将水化的玻片浸入0.25%高锰酸钾中5min，蒸馏水洗3min;再置入0.5% 草酸漂白2min，蒸馏水洗3min。④褪色后的玻片放入PBS液漂洗3次。不进行抗原修复，未加阻断剂。加一抗各50μl，置湿盒内4℃孵育过夜。PBS液漂洗3次，滴加Envision二抗50μl，置湿盒内37℃孵育30min。PBS液漂洗3次，滴加DAB显色剂50μl，显微镜下控制显色程度，待阳性染色明显，背景未着色前，放入蒸馏水中终止显色。

2 结果

12例淋巴组织针吸细胞涂片经HE染色细胞学诊断:5例无恶性细胞，4例核异质细胞，3例可疑恶性细胞;HE染片褪色行免疫组化标记后诊断:3例转移性癌，3例可疑恶性淋巴瘤，6例无恶性细胞。活检石蜡切片诊断证实12例病变中良性病变6例，恶性病变6例。针吸细胞涂片经HE染色组良性符合率83.33%，恶性符合率50%。HE涂片褪色行免疫组化标记组良性符合率100%，恶性符合率100%。

3 讨论

免疫组化技术对淋巴瘤的分型较为准确，特别是对淋巴结造血系统与上皮源性肿瘤的鉴别起到至关重要的作用。本实验12例针吸细胞涂片标本HE染色细胞学诊断有分歧的经褪色行免疫组化标记后均都明确诊断，并经组织病理学证实。说明针吸细胞涂片作免疫细胞化学染色在日常病理工作中是有意义的，免疫细胞化学为细胞学诊断和鉴别诊断提供了一个较为可靠的手段。为正确的细胞学诊断提供了依据，提高了疾病诊断的准确率。所以本褪色方法行之有效，可以在实践工作中加以运用。

［1］沈铭昌，徐维萍，王龙富，等.细针吸取细胞病理学.北京:人民卫生出版社，2000:271-306.

ObjectiveTo observe the clinical effects of immunohistochemistry of cell from lymph tissue by fine needle aspiration after HE staining section fading.MethodsThe cell from lymph tissue by fine needle aspiration after HE staining section fading for 12cases，using immunohistochemical S-P method after potassium permanganate and ethanedioic acid fade to mark the lymph tissue by fine needle aspiration after HE staining section fading.ResultsThe cytologic diagnosis by HE stain as follows.ConclusionFNAC is very important to the first screening in the benign malignant lymph node lesions and tumor type.

Adenoid tissue;Fine needle aspiration cell;Smear

528402广东省中山市人民医院病理科