调合消毒法对石膏模型消毒效果的实验研究

刘 嘉,郑轶文,李 岩,张晓红,姜 龙,左恩俊

(1.大连医科大学 中山学院 2008级口腔医学专业，辽宁 大连 116085； 2.大连医科大学 中山学院，辽宁 大连 116085； 3.大连医科大学 口腔医学院，辽宁 大连 116044)

口腔印模由于直接接触患者的唾液甚至血液, 表面常携带有大量细菌、病毒及真菌等病原微生物, 这些微生物不消除就会造成石膏模型的污染，最终会导致医务人员、患者和技工之间的交叉感染。而常规消毒方法，如浸泡、喷涂等，会对印模及模型的精度和物理性能带来影响[1-2]。使用消毒液调拌印模材，又会给患者口腔黏膜带来不同程度刺激。然而应用消毒液调拌超硬石膏，可有效解决上述问题。本研究使用3种消毒液调拌超硬石膏，探讨其对口腔常见细菌的杀菌效果。

1 材料和方法

1.1 实验材料

超硬石膏(上海贺利氏古莎齿科有限公司)，2% 戊二醛、0.5%84消毒液、0.5%碘伏(山东利尔康消毒科技有限公司)，蒸馏水，营养琼脂培养基、沙保培养基(青岛海博生物技术有限公司),表皮葡萄球菌ATCC 12228、白色念珠菌ATCC 10231、绿脓杆菌ATCC 9027(上海鑫闵生命科学有限公司)。

1.2 实验设备

DRP-9002型电热恒温培养箱(上海森信实验仪器有限公司)，EX-200A型电子天平(沈阳精密天平仪器有限公司)，Z型立式压力蒸汽灭菌器(常州锐品精密仪器有限公司)， PSE型洁净工作台(苏州真田洁净设备有限公司), SK-1快速混匀器(江苏省金坛市友联仪器研究所),AX-2000齿科真空调拌机(天津爱鑫医疗设备有限公司)。

1.3 实验方法

1.3.1 材料和器械消毒：实验所需调碗、调刀、烧杯、烧瓶、量筒等均经121 ℃压力蒸气灭菌处理20 min。超硬石膏粉用电子天平称取单份后，铺成薄层于超净操作台中紫外线臭氧消毒2 h。蒸馏水和各消毒液均经无菌处理。

1.3.2 制备细菌悬液：取4～14代表皮葡萄球菌培养平板,挑取菌苔,以无菌生理盐水稀释至浓度106个/mL。用同样方法分别制备白色念珠菌菌悬液和绿脓杆菌菌悬液。

1.3.3 实验分组：制备126个直径10 mm，厚5 mm的圆柱体硅橡胶印模，经高温高压消毒后，按所染菌种分为表皮葡萄球菌组,白色念珠菌菌组和绿脓杆菌组。每组42个印模，其中2个印模不染菌灌注石膏模型后为阴性对照组。

1.3.4 染菌：用微量加样器取10 μL菌悬液均匀涂于各组印模表面。分别用2%戊二醛、0.5% 84消毒液、0.5%碘伏和无菌蒸馏水与超硬石膏粉按照22 mL∶100 g的水粉比于真空搅拌机中调拌超硬石膏30 s，然后灌注石膏模型。每组各调拌液均灌注10个石膏模型试件，无菌蒸馏水调拌组为阳性对照组。1 h后脱模。

1.3.5 洗菌：将各试件分别投入含5.0 mL无菌生理盐水的试管中。用电动混匀器混合20 s，将菌洗下形成菌悬液。

1.3.6 细菌接种和培养：取菌悬液1 mL按一定倍数稀释后, 取10 μL接种于灭菌培养基,37°恒温培养箱培养24 h后观察计数菌落数,计算杀菌率。杀菌率=(阳性对照组菌落数-消毒组菌落数)/阳性对照组菌落数×100%。由于每个石膏模型表面细菌接种量及采样量相同,故以集落形成单位(colony-forming units,CFU)计数表示回收菌数，算得各组平均杀菌率。参照欧洲消毒实验标准，杀菌率达到99.99%视为消毒合格。

2 结 果

不同种类消毒液调拌超硬石膏对3种细菌的消毒效果见表1。2%戊二醛、0.5% 84消毒液、0.5%碘伏调拌超硬石膏对3种细菌的杀菌率为100%，消毒合格。

表1 不同种类的消毒液调拌超硬石膏的消毒效果Tab 1 Disinfection effects of gypsum mixed with different kinds of disinfectant

3 讨 论

众所周知，口腔印模在制取过程中会直接接触到患者的唾液甚至血液，表面可能携带大量致病菌。Gerhardt等[3]研究表明传统的流水冲洗最多只能去除40%～90%的细菌，如不经过特殊消毒处理即灌注石膏模型，就会造成石膏模型的污染，成为多种传染性疾病的感染源。

本实验选用的3种菌较有代表性。口腔中检出的葡萄球菌多属表皮葡萄球菌，可导致泌尿系统感染、细菌性心内膜炎等，亦可参与牙周病、口角炎等混合细菌感染[4]。白色念珠菌是欧洲杀真菌实验标准(EN1257:1995)规定菌种，是口腔最常见真菌，特别是长期使用义齿的患者，口腔中常寄生大量白色念珠菌[5]。白色念珠菌主要引起鹅口疮、口角糜烂等黏膜皮肤感染；支气管炎、肺炎等内脏感染以及脑膜炎等中枢神经系统感染。绿脓杆菌为条件致病菌，当机体抵抗力降低时，易引起多种感染。绿脓杆菌抵抗力较强，对干燥、紫外线及某些化学消毒剂有一定抵抗力[6]。

不同细菌对消毒方式有不同的耐受力，故消毒学实验选用的菌种应为有代表性的标准菌株，或者是有实际意义和对消毒方法有较高耐受性的菌株[7]。目前有些对印模、模型消毒效果的评价研究，采用的细菌标本多为混合菌液或为一些抵抗力不强的细菌，这些细菌既不是口腔常见菌，抵抗力又差。研究结果实际意义不大。本实验模拟病理状态下致病菌浓度相对较高的情况，对石膏模型进行单独沾染和培养，既能较好地反映消毒剂的消毒效果，又具有较高的临床意义。

2%戊二醛、0.5%84消毒液、0.5%碘伏是医院中最常用的3种消毒剂，取材方便，且均具有广谱杀菌作用，消毒效果可靠。李磊等[5]研究结果显示使用2%戊二醛、0.1%碘伏、0.5%次氯酸浸对沾染白色念珠菌,金黄色葡萄球菌,血链球菌的印模浸泡消毒5～10 min可达到消毒效果。郭华等[8]认为利用0.5% 84消毒液调拌藻酸盐印模材，可完全杀灭大肠杆菌和金葡菌并有效杀灭枯草芽胞杆菌和绿脓杆菌。Rentzia等[9]认为将不可逆水胶体印模材加入到0.5% NaOCl消毒液120 s即可杀灭全部绿脓杆菌。

目前对石膏模型的常见消毒方法有浸泡/喷雾法、熏蒸法、微波法、紫外线照射等多种方法。但却存在影响模型的精度、强度和消毒不充分等问题，多数方法均需要特殊的设备才能完成石膏模型的消毒。周利根等[10]用2%中性强化戊二醛消毒液浸泡消毒模型后，浸泡消毒的模型精度和硬度与标准模型比较有明显差异。Abdullah等[2]反复用水和0.525%次氯酸钠浸泡Ⅲ型和Ⅳ型石膏模型，出现有统计学意义的线性尺寸膨胀和压缩强度下降。消毒液直接调拌超硬石膏进行自身消毒，简化了消毒程序，增加了消毒液与微生物接触时间，在石膏凝固的过程中即完成了消毒过程，降低了繁琐的消毒过程给终模型带来的误差，既能对模型表面又能彻底的渗入模型内部从而保证了消毒效果。实验结果表明用2%戊二醛、0.5% 84消毒液、0.5%碘伏调拌超硬石膏,1h后脱模,对3种细菌的杀菌率为100%。且有研究表明由消毒液调拌超硬石膏粉对超硬石膏的抗压强度,抗弯强度及精度无明显影响[11]。因此，使用2%戊二醛、0.5% 84消毒液、0.5%碘伏调拌超硬石膏消毒法是一种简便、省时、可靠的消毒方法。

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