香菇多糖对食管癌病人放化疗前后淋巴细胞亚群的影响及其临床意义*

肖文明 王 颖

(泰山医学院附属泰山医院肿瘤中心，山东 泰安 271000)

目前的研究表明,综合治疗是食管癌的主要治疗方法。食管癌的治疗已经从单一手术治疗发展到包括手术、化疗、放疗、生物治疗的综合治疗。同步放化疗作为食管癌的重要治疗手段，对免疫系统及骨髓造血功能的不良反应会影响到患者的免疫重建。因此,对于食管癌患者，同步放化疗同时配合使用免疫治疗,恢复机体的免疫功能,提高机体特异性抗肿瘤免疫应答,抑制残存病灶的复发与转移,有着重要的意义。香菇多糖是从担子菌纲伞菌科真菌香菇子实体中提取分离纯化获得的均一组分的多糖，它是一种非特异性免疫增强剂。本实验拟观察 香菇多糖对食管癌放化疗病人淋巴细胞亚群的影响。我们总结本院2011年1月至2011年10月收治的60例无法手术单纯放化疗的食管癌患者,随机分为两组,其中放化疗时加用香菇多糖治疗30例(联合放化疗组),与单用放化疗30例(单纯放化疗组),并选取健康人30例作为健康对照组，进行临床观察比较，现报道如下。

1 临床资料

1.1一般资料 本院2011年1月至2011年10月, 无法手术单纯放化疗的食管癌患者60例,均经胃镜取病理证实，随机分为单纯放化疗组和联合放化疗组(联合香菇多糖)各30 例。单纯放化疗组:年龄51～69岁,平均57.7岁，男性13例，女性17例；联合放化疗组:年龄54～68岁,平均60.3岁，男性16例，女性14例。并以查体中心正常查体30人作为正常对照组，年龄52～65岁，平均57.5岁。

1.2病例选择标准 (1)所有病例均经胃镜检查并取病理证实为食管上段鳞状细胞癌,无法手术切除或者患者及家属拒绝手术要求放化疗者;(2)KPS评分大于90分;(3)年龄小于70岁开始进行同步放化疗患者，化疗方案为DF;(4)治疗前血常规、肝、肾功能正常,无主要器官的功能障碍。

1.3治疗方法 单纯放化疗组:采用DF方案+放疗。联合放化疗组:DF方案化疗+放疗+香菇多糖。DF方案为: 氟尿嘧啶500 mg/m2d1～5，顺铂20 mg/m2，d1～4，21天为1个周期。化疗第1天即开始放疗，放疗期间化疗2个周期。放疗采用3DCRT治疗：热塑体模固定体位，仰卧位，模拟CT扫描，层厚5 mm。根据食管造影和纤维食管镜显示的病变长度以及CT显示的外侵深度范围，同时包括纵隔内肿大淋巴结来定义大体靶体积(GTV)；GTV前后左右方向各外放0.5～0.8 cm，上下方向各外放3.0 cm为临床靶体积(CTV)；CTV再均匀外放0.5 cm为计划靶体积(PTV)。同时勾画邻近组织和器官如脊髓、气管、心脏及双侧肺。通过剂量体积直方图(DVH)与等剂量曲线图选择最佳治疗计划方案。采用6MV-X线实施治疗，常规分割治疗2 Gy/(fx·d)，每周5天，总剂量60～66 Gy/6.0～6.6周。联合放化疗组同时应用香菇多糖2 mg入5%葡萄糖250 ml中静滴，每周2次。两组患者均顺利完成放疗。

1.4观察指标及疗效评定 所有患者均于放化疗前1天和放化疗结束后1周清晨空腹抽取静脉血2 ml EDTA抗凝，应用荧光直接标记法及流式细胞仪检测外周血淋巴细胞亚群。包括:CD3+T细胞,CD4+T细胞,CD8+T细胞,CD4+/CD8+比值。

2 结 果

治疗前单纯放化疗组和联合放化疗组比较CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+均无显著差异(P>0.05),单纯放化疗组和联合放化疗组与正常对照组均有明显差异(P<0.01)。单纯放化疗组治疗后CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+与治疗前比较有显著差异(P<0.05)。联合放化疗组治疗后CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+与治疗前相比无明显差异(P>0.05)。治疗后联合放化疗组与单纯放化疗组比较CD4+、CD8+、CD4+/CD8+均有显著差异(P<0.05)。见表1。

表1 外周血淋巴细胞亚群的测定值

正常对照组与单纯放化疗组治疗前相比较CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+其F，P值分别为14.75，0.00；16.30，0.00；9.07，0.00；12.24，0.00。正常对照组与联合放化疗组治疗前相比较CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+其F，P值分别为14.13，0.00；19.22，0.00；6.92，0.00；13.16，0.00。单纯放化疗组治疗前与联合放化疗组治疗前相比较CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+其F，P值分别为0.40，0.69；1.92，0.06；0.70，0.49；3.04，0.00。单纯放化疗组治疗前与治疗后相比较CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+其F，P值分别为15.82，0.00；16.26，0.00；11.16，0.00；9.62，0.00。联合放化疗组治疗前与治疗后相比较CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+其F，P值分别为2.02，0.05；0.18，0.87；2.01，0.05；1.83,0.07。单纯放化疗组治疗后与联合放化疗组治疗后相比较CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+其F，P值分别为13.78，0.00；15.01，0.00；7.78，0.00；6.57，0.00。

3 讨 论

目前在研究的抗肿瘤免疫主要是细胞免疫,在抗肿瘤免疫中起着中心调控作用的是T淋巴细胞,以T细胞为主的细胞免疫功能的状态直接影响肿瘤的发生、发展及预后[1]。T淋巴细胞按照表面标志可以分为CD4+细胞和CD8+细胞2个亚群，CD3代表总的T细胞;CD4代表T细胞辅助诱导亚群,能促进其他T细胞亚群成熟与B细胞产生抗体;CD8代表T抑制细胞毒亚群,能抑制T细胞和B细胞的功能并对靶细胞有杀伤作用。CD4/CD8为免疫调节的一项指标,其比值的降低是疾病严重程度以及预后不良的重要标志。正是这两个亚群间的动态平衡决定了免疫反应的发生与否、发生的类型以及发生的总效应[2]。随着分子免疫学发展,免疫平衡学说得到广泛的重视[3]。

目前已有的研究表明,多种肿瘤患者体内存在T淋巴细胞亚群状态异常和比例失调的情况[4-6]。Wong 等[7]对放化疗在局限期食癌管的疗效进行了系统评价，结果表明，同步放化疗明显降低了死亡风险，是食管癌的主要治疗手段，本实验也证实了这一点。香菇多糖是能够提高机体免疫功能的生物调节剂,目前在我国已被广泛用于治疗消化道肿瘤[8]。香菇多糖是宿主防卫增强剂的一种,能恢复或者加强机体对激素、淋巴细胞和其他生物活性因子的反应,能够刺激免疫活性细胞的成熟、分化和繁殖,从而使机体的淋巴细胞大量增加,因此提高机体的免疫功能。香菇多糖还能够激活补体系统的经典途径或变更途径,增加中性白细胞对肿瘤细胞的浸润,促使宿主尽快恢复因癌症及感染而引起的体内平衡失调状态。本研究结果显示食管癌放化疗患者CD3+、CD4+、CD4+/CD8+比值明显低于正常对照组,CD8+值相对升高,说明食管癌放化疗患者的细胞免疫功能低下;经香菇多糖治疗后,CD4+比例和CD4+/CD8+比值明显升高,CD8+比例降低,显示香菇多糖能调节食管癌放化疗患者的细胞免疫功能,但仍然未达到健康人水平。

以上结果表明食管癌放化疗患者细胞免疫功能低下,放化疗使机体免疫功能受到进一步抑制。香菇多糖可明显改善化疗所致的T淋巴细胞活性和CD4+/CD8+比值下降,促进免疫功能重建,值得临床推广应用。

[1] 马玲娣,张 彦,文世宏,等. 苦参碱对TM2转基因小鼠肝癌细胞的作用研究[J].中国中药杂志, 2008, 33 (10) : 1175.

[2] LI CY, Huang Q , Kung HF. Cytokine and immuno-gene t herapy for solid tumors[J] . Cell Mol Immunol,2005,2 (2) :81-91.

[3] Becker Y. Molecular immunological approaches to biot herapy of human cancers——a review, hypot hesis and implications[J] . Anticancer Res, 2006,26 (2A) :1113-1134.

[4] 陈复兴,刘军权,周忠海,等. 癌症患者T细胞亚群的临床意义[J]. 细胞与分子免疫学杂志, 2002, 18 (1) : 55.

[5] 李明,陈健,刘国福,等. 胃癌患者用血T淋巴细胞亚群的测定及临床意义[J]. 现代肿瘤医学, 2005, 13 (6) : 534-535.

[6] 纪爱芳,苏丽萍,郭晓军,等. 慢性淋巴细胞白血病患者外周血T淋巴细胞亚群及NK细胞亚群分析及临床意义[J]. 现代肿瘤医学, 2005, 13 (4) : 485-486.

[7] Wong R, Malthaner R. Combined chemotherapy and radiotherapy(without surgery) compared with radiotherapy alonein localized carcinoma of the esophagus[DB/CD]. Cochrane Database Syst Rev, 2006, 25(1):CD002092.

[8] 王林波,陈文军,潘滔,等.天地欣影响消化道恶性肿瘤微转移的初步研究[J].中华肿瘤杂志,2004,26(8):504-505.