小叶龙船花对醋酸铅引起氧化压力的抑制作用

梁 萱， 莫 果， 陈 欣， 杜云云， 刘 红，3*， 贾桂云

（1.海南师范大学 化学与化工学院，海南 海口571158；2.海南师范大学 物理与电子工程学院，海南 海口571158；3.海南省热带药用植物化学重点实验室，海南 海口571158）

小叶龙船花对醋酸铅引起氧化压力的抑制作用

梁 萱1， 莫 果1， 陈 欣1， 杜云云2， 刘 红1，3*， 贾桂云1

（1.海南师范大学 化学与化工学院，海南 海口571158；2.海南师范大学 物理与电子工程学院，海南 海口571158；3.海南省热带药用植物化学重点实验室，海南 海口571158）

为了探讨小叶龙船花乙醇提取物对醋酸铅引起的雌鼠氧化压力的抑制作用，将60只雌鼠分6组喂食，时间为2周，测定小叶龙船花提取物对小鼠的体重和肝肾的重量、血液生化指标和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）活力和丙二醛（MDA）的影响，并对肝组织进行切片扫描.结果表明：单独服用小叶龙船花提取物对小鼠体重和肝、肾的重量，血液生化指标及肝切片扫描图片无明显变化，但明显提高了GSH-PX酶活力，降低MDA值；但在醋酸铅引起的氧化压力的条件下，小叶龙船花提取物能明显提高GSH-PX酶活力，改善血液生化指标.此外，这种改善在先口服醋酸铅后口服小叶龙船花提取物组表现的最显著.

小叶龙船花；醋酸铅；氧化压力

铅中毒被认为由氧化压力引起的主要途径，氧化压力也是造成现代人肌肤衰老的重要原因.小叶龙船花（Ixora coccinea L.）又名山丹、仙丹花，为茜草科常绿小灌木，分布于广东、广西、台湾、福建、海南等地[1].Latha and Panikkar（1998）报道小叶龙船花提取物有抗肿瘤作用[2].Moni Rani Saha（2008）认为小叶龙船花提取物的有体外抗自由基能力，认为起到抗氧化作用的主要是黄酮、甾醇类和单宁等物质[3].研究小叶龙船花提取物对醋酸铅引起的雌鼠氧化压力的抑制作用.实验分6组，分别测定6组小鼠体重、血液生化指标和抗氧化指标MDA和GSH-PX[4-6]，并对肝组织切片扫描，期望小叶龙船花提取物为人们的疾病提供新的治疗途径.

1 材料与方法

1.1 主要实验仪器

RE-52型旋转蒸发器（上海亚荣生化仪器厂）；721型紫外-可见分光光度计（上海第三分析仪器厂）；电子天平（OEM型奥豪斯国际贸易（上海有限公司）；DHG-9246A型电热恒温鼓风干燥箱（上海精宏实验设备有限公司）；TDL-5-A型离心机（海南新卫医药有限公司）.

1.2 药品

小叶龙船花乙醇（95%）提取物，注射用醋酸铅，测试用GSH-PX和MDA试剂盒由南京建成生物工程研究所提供（规格：100T）；ALT（丙氨酸氨基转移酶）、AST（谷草转氨酶）、TP（总蛋白）、ALB（白蛋白）、BUN（尿素氮）和TG（甘油三酯）等试剂由本校附属医院提供.

1.3 实验动物

健康昆明种雌鼠60只，体重30±2g，由四川大学实验动物中心提供.

1.4 方法

1.4.1 小叶龙船花提取物的提取

晴天采摘小叶龙船花的花，置于热风干燥箱40℃干燥，将干燥的花粉碎至50目，正己烷浸泡2d，过滤得到浸出液，滤渣再用无水乙醇浸泡2d.取乙醇浸提液至旋转蒸发器中浓缩得到红色浓缩液，将浓缩液用硅胶100～200目柱过柱，以正己烷∶乙酸乙酯∶甲醇为1∶4∶3的混合液作为洗脱剂，分离得红色液体.

1.4.2 氧化压力雌鼠模型的建立和有关测定方法

建立醋酸铅引起的雌鼠氧化压力模型，分为6组，每组10只雌鼠.饲养2周：第1组：每日口服100 mg/kg小叶龙船花提取物（N1）；第2组：每日口服20 mg/kg醋酸铅（N2）；第3组：先每日口服100 mg/kg小叶龙船花提取物1周，后每日口服20 mg/kg醋酸铅1周（N3）；第4组：先每日口服20 mg/kg醋酸铅1周，后每日口服100 mg/kg小叶龙船花提取物1周（N4）；第5组：同时每日口服20 mg/kg醋酸铅和100 mg/kg小叶龙船花提取物（N5）；第6组：正常组（N6）.观察这些动物每天的毒性迹象.每日记录食物摄入和体重.在实验14d结束后，收集眼眶静脉血，一部分用于分析ALT、AST、BUN、TP、ALB和TG.另一部分按GSH-PX和MDA试剂盒方法测定其吸光度值.

2 结果

1）体重和肝肾变化

与N6组相比,其他五组雌鼠的体重都减轻，其中N2组及N4组减轻的相对较少，N5组减轻最多，结果见表1.雌性小鼠肝肾重量的影响见表2，与N6组相比，各组雌鼠肝重及肾重均减少，但变化不大，仅N5组肝肾重明显降低，统计分析（p＜0.05）显示对肝肾重量并无很大影响.

2）血液生化指标

表3列出了血液的生物化学指标，N1组和N6组的血液生化指标没有显著差异.N2组增加ALT、AST和 BUN值，减少TP、ALB和TG值.N3、N4和N5三组明显改善血液指标，减少TG和BUN指标，其中N3组降低TG和BUN效果最好.

3）小叶龙船花提取物对GSH-PX酶活力及MDA的影响

表4显示小叶龙船花提取物对GSH-PX酶活力和MDA的影响.数据表明：与N6组相比，N2组肝组织MDA显著增加，GSH-PX酶活力水平显著降低.

表1 灌胃对雌性小鼠体质量（g）的影响Tab.1 The effect on weight of female rats after oral administration

而N1组对肝组织MDA影响较小，但GSH-PX酶活力水平增大.N3、N4和N5三组均有增加GSH-PX酶活力，降低MDA的作用，其中N5组明显增加GSH-PX酶活力水平，N4组显著降低MDA水平，实验表明小叶龙船花提取物对由醋酸铅引起的肝组织的损伤具有保护作用.

表2 灌胃对雌性小鼠肝肾重量影响Tab.2 Effects on liver and kidney weight of female rats after oral administration

4）肝切片扫描

附图1肝切片的显微照片包括：N1组（A1，A2）呈现或多或少正常的肝细胞，核子和中央静脉（40×，20×）；N2组呈现门管扩张及扩散到不同区域的单核炎症细胞大量聚合（B2）（20×），脂肪变性及核间夹杂，核子支离破碎和固缩（B1）（40×）；

N3组（C1，C2）呈现同样的门管扩张（40×，20×）；N4组（D1，D2）呈现正常肝细胞明显结构（40×，20×）；N5组（E1，E2）呈现肝细胞泡囊核突出（40×，20×）；N6组（F）呈现正常肝细胞及中央静脉.

3 讨论

本实验研究小叶龙船花提取物对氧化压力的抑制作用.结果表明，小叶龙船花提取物能抑制醋酸铅引起的雌鼠氧化压力.先治疗口服小叶龙船花提取物后口服醋酸铅时，可以起到降低甘油三酯的作用，减少醋酸铅引起的氧化压力作用，研究结果为相关疾病的治疗提供了理论依据.

表3 雌性小鼠血液指标Tab.3Serum biochemical parameters in female rats

表4 不同给药方式对雌性小鼠全血GSH-PX酶活力及MDA值的影响Tab.4 Effects of different treatments on MDA and GPX in blood of rats in different treatment groups

[1]中国科学院中国植物志编辑委员会.中国植物志(第三十九卷)[M].北京:科学出版社,1988:38．

[2]Latha P G,Panikkar K R.Cytotoxic and antitumour prin⁃ciples from Ixora coccinea flowers[J].Cancer Lett 1998,130:197-202.

[3]Saha M R,Alam M A,Akter R,et al.In-vitro free radical scavenging activity of Ixora coccinea L[J].Bangladesh J Pharmacol 2008,3:90-96.

[4]李亚.旦淀粉样蛋白对衰老模型大鼠学习记忆及大脑皮层内脂褐素含量的影响[J].中国药理学与毒理学杂志,2001,15(4):311-313.

[5]Haman A D.A theory based on free radical and radiation[M].Univ Califormia Ra-diation Ladiation Laboratory Report,1995:3078.

[6]Lazzarino G,Tavazzi B,Pierro D,et al.The relevance of malondialdehyde as a Biochemical index of lipid peroxida⁃tion of postischemic tissues in the rat and human beings[J].Biol Trace ElemRes,1995,47:165-170.

Inhibitory Effect of Ixora Coccinea L.Against Lead Acetate-induced Oxidative Stress

LIANG Xuan1，MO Guo1，CHEN Xin2，DU Yunyun2，LIU Hong1，3＊，JIA Guiyun1
（1.College of Chemistry and Chemical Engineering，Hainan Normal University，Haikou571158，China；2.College of Physics and Electronic Engineering，Hainan Normal University，Haikou571158，China；3.Hainan Provincial Key Lab of Tropical Pharmaceutical Herb Chemistry，Haikou571158，China）

In order to study the antioxidant activity of the ethanol extract of Ixora coccinea L.flowers against lead ace⁃tate(LA)-induced oxidative stress in female rats,60 female rats were divided into 6 groups to be fed,The feeding time was two weeks to evaluate the effect on the body weight,the liver and kidney weight,the Serum biochemical parameters and Glutathione peroxidase（GSH-PX）and Propanedial（MDA）in female rats,and the slice scanning of the liver tis⁃sue.The Results indicated that the Ixora coccinea L.Flowers extract alone did not induce any significant changes in body weight gain,serum biochemical chemistry or the histological picture of the liver.However,it increased significantly the level of and decreased the level of MDA.However,under the conditions of the lead acetate-induced oxidative stress,The extract succeeded to increase significantly the level of GSH-PX and improve biochemical parameters.Moreover,this im⁃provement was pronounced in the animals treated with the extract after LA intoxication.

Ixora coccinea；Lead acetate；Oxidative stress

TQ 072

A

1674-4942（2011）02-0194-04

2011-03-08

海南师范大学国家大学生创新实验计划资助项目（091165814）；海南师范大学物理化学重点学科资助项目

*通讯作者

毕和平