高光学纯度INCB018424的合成*

李文婕， 宋 颢

(四川大学 华西药学院，四川 成都 610041)

手性药物的研发已成为近年来新药研究的重要发展方向和热点领域之一[1]。随着手性药物生产市场和销售市场对上市手性药物对映体光学纯度要求的日益提高，探索能简洁高效获得单一手性化合物的方法已成为医药学家所面临的一个重要课题。INCB018424(1)是近年来研究发现的一种新型Janus激酶抑制剂[2]。临床试验表明，1能选择性地抑制激酶JAK1和JAK2的活性，使过度活化的STAT信号途径恢复正常，从而显著抑制白细胞介素-1，肿瘤坏死因子-α，白细胞介素-6，血管内皮生长因子以及成纤维生长因子等的分泌，对骨髓增殖性肿瘤、真性红细胞增多症、原发性血小板增多症以及原发性骨髓纤维化等难治疾病均具有潜在的疗效，是极具临床应用前景的一种新化合物。目前1的Ⅲ期临床试验正在进行中。

到目前为止，1的合成研究较少，仅有James D R等[3]曾对1类似物的消旋体进行过研究；Lin Q等[4]于2009年报道了以环戊烷基甲醛(2)为原料，在手性催化剂(2R)-2-{双[3,5-双(三氟甲基)苯基][叔丁基(二甲基)硅烷]羟甲基}四氢吡咯(R-6， Chart 1)的诱导下，经5步反应完成1的全合成。该方法较为简洁，但重要中间体(3R)-3-(4-溴-1H-吡唑-1-基)-3-环戊烷丙氰(R-8)的对映选择性不甚理想，其ee值仅为84.0%,由其合成的1的光学纯度难以满足药物生产的需求。

Scheme1

Chart1

本文参照文献[4]方法合成了1(Scheme 1)，对R-8的纯化方法进行了改进，使其ee值由84.0%提高至97.0%。由纯化的R-8合成的1的ee值达99.9%。改进后的方法简单、高效地提高了1的光学纯度，符合工业化生产的要求。

1 实验部分

1．1 仪器与试剂

Varian Unit INOVA 400型高分辨超导核磁共振仪(CDCl3为溶剂，TMS为内标)；VARIAN 210型高效液相色谱仪[HPLC， Chiral Cel AD-H column(4.6×250 mm, 5 μm)；流动相：A=V(乙醇)∶V(正己烷)；流速：1 mL·min-1；检测波长：220 nm]。

2， 4和(R)-7参照文献[4]方法合成；其余所有试剂均为市售化学纯或分析纯。

1．2 合成

(1) (R)-8的合成[4]

将(R)-710.0 g(37.0 mmol)溶于THF(140 mL)中，搅拌下加入浓氨水140 mL和碘10.3 g(40.7 mmol)，于室温反应搅拌30 min。用饱和Na2S2O3溶液(675 mL)淬灭反应，用乙酸乙酯(3×250 mL)萃取。合并有机层，用饱和食盐水洗涤，硫酸镁干燥；减压浓缩后经硅胶柱[洗脱剂：V(乙酸乙酯)∶V(石油醚)=1∶10]纯化得无色液体(R)-87.5 g,产率76．0%， 88．0%ee[流动相：A=2∶8；保留时间：13.4 min(S)， 16.4 min(R)]。将其溶解于混合溶剂[V(石油醚)∶V(乙醚)=1∶20]中，于-10 ℃放置过夜得无色针状晶体(R)-86.1 g， 97．0%ee；1H NMRδ： 1.07～1.14(m, 1H), 1.17～1.27(m, 1H), 1.43～1.76(m, 5H), 1.86～1.92(m, 1H), 2.40～2.51(m, 1H), 2.84(dd,J=16.8 Hz, 3.6 Hz, 1H), 3.01(q,J=8.8 Hz, 1H), 4.10(td,J=10.0 Hz, 3.6 Hz, 1H), 7.51(d,J=5.2 Hz, 2H)。

(2)1的合成

氮气保护，在封管中加入(R)-82.0 g(7.5 mmol)，92.1 g(7.94 mmol)，三苯基磷钯[Pd(PPh3)4]0.28 g(0.23 mmol)，醋酸钾2.2 g(22.5 mmol)及干燥二氧六环25 mL，搅拌使其溶解后置于微波反应器中，于120 ℃反应3 h。移至长颈瓶中，依次加入二氧六环25 mL，水11 mL，100.88 g(5.78 mmol)，三苯基磷钯0.28 g(0.23 mmol)及碳酸钾2.2 g(22.5 mmol)，搅拌下于100 ℃反应过夜。冷却至室温，用饱和碳酸氢钠溶液(80 mL)萃灭反应，用乙酸乙酯(3×250 mL)萃取，有机层用饱和食盐水洗涤，硫酸镁干燥，浓缩后经硅胶柱[洗脱剂：EtOAc，V(甲醇)∶V(乙酸乙酯)=1∶20]纯化得白色固体1 1.38 g,产率60%， 99.9%ee[流动相：A=1∶9；保留时间：16.0 min(S)， 20.0 min(R)]；1H NMR(DMSO-d6)δ： 1.07～1.22(m, 1H), 1.24～1.38(m, 1H), 1.40～1.64(m, 5H), 1.77～1.85(m, 1H), 2.37～2.52(m, 1H), 3.16～3.34(m, 2H), 4.54(td,J=9.6 Hz, 4.0 Hz, 1H), 6.98(q,J=1.6 Hz, 1H), 7.59(q,J=2.4 Hz, 1H), 8.37(s, 1H), 8.68(s, 1H), 8.80(s, 1H), 12.10(s, 1H)。

2 结果与讨论

为了得到光学纯的1，本文对文献[4]的重要中间体(R)-8的纯化方法进行了改进。(R)-8为油状物[4]，对其结构分析后认为应具有一定的刚性结构，推测光学纯的(R)-8可能为固体。为此，我们参照文献[4]方法合成得(R)-8后，对其重结晶条件进行了大量的尝试和筛选。在尝试了异丙醚、石油醚、乙醚、甲醇、乙醇等单一溶剂未能得到理想的效果后，我们进一步对不同比例组成的上述溶剂两两组合而成的混合溶剂进行了尝试，发现在混合溶剂A[V(乙醚)∶V(石油醚)=1∶20]中，室温下有少量固体析出。随后，我们对重结晶的温度进行了考察，最终发现在-10 ℃下，以A为重结晶溶剂，仅经一步重结晶操作即可使(R)-8的ee值由84．0%[4]提高到97．0%，且反应收率没有明显降低。纯化后的(R)-8通过Suzuki反应合成的1的ee值达到99.9%，为1及其盐的光学纯度提供了保证。

该纯化方法为1的工业化生产提供了借鉴，具有一定现实意义。

[1] 蒋龙，陈再新，姚成． 恩曲他滨的合成方法[J].合成化学，2007,15(5)：543-547．

[2] Falahatpisheh N, Rafalski M, Arvanitis A G, get al.g The JAK inhibitor,INCB018424,demonstrates durable and marked clinical responses in primary myelofibrosis(PMF) and post-polycythemia/essential thrombocythemia myelofibrosis(post PV/ETMF)[J].Blood，2008,112:1762.

[3] James D R, Argyrios G A, Jack G S. Metabolites of the janus kinase inhibitor[P]．US 0 312 258，2008．

[5] Lin Q, Meloni D, Pan Y,etal. Enantioselective synthesis of janus.kinase inhibitor incb018424 via an organocatalytic aza-michael reaction[J].Org Lett,2009,11:1999-2002.