铁皮石斛胚状体对大鼠抗疲劳能力的影响

辛 甜, 储智勇，栾 洁，汤佳静，孙 倩，翟延君

(1.辽宁中医药大学，辽宁 大连 116600；2.海军医学研究所，上海 200433；3.上海汤振生物技术有限公司，上海 201900)

铁皮石斛胚状体对大鼠抗疲劳能力的影响

辛 甜1,2, 储智勇2，栾 洁2，汤佳静3，孙 倩1,2，翟延君1

(1.辽宁中医药大学，辽宁 大连 116600；2.海军医学研究所，上海 200433；3.上海汤振生物技术有限公司，上海 201900)

目的研究铁皮石斛胚状体对大鼠抗疲劳能力的影响。方法大鼠随机分为低、中、高剂量组(铁皮石斛胚状体0.2、0.4、0.8 g/kg) ，空白对照组、跑步对照组及铁皮枫斗组(铁皮枫斗1.2 g/kg)，进行大鼠跑台实验。观察大鼠运动前、运动后0 min及运动后30 min血糖含量、全血乳酸含量变化并检测运动后肝糖元、肌糖元及血尿素氮的含量。结果与跑步对照组相比，铁皮石斛胚状体各剂量组可以在跑步30 min后提高血糖含量并降低全血乳酸含量，中、高剂量组可以降低运动后肝糖元及肌糖元的消耗，各剂量组均能明显降低血尿素氮的含量。结论铁皮石斛胚状体具有提高大鼠抗疲劳能力的作用。

铁皮石斛；胚状体；大鼠；跑步；抗疲劳

铁皮石斛为兰科植物铁皮石斛DendrobiumcandidumWal1．ex Lind1．(D．officinale)新鲜或干燥的茎，加工后称“铁皮枫斗”，是一种常用名贵中药，为国家重点保护植物之一[1]。有“除痹下气，补五脏虚劳羸瘦，强阴，久服厚肠胃轻身延年”之效[2]。铁皮石斛主要含多糖、生物碱、微量元素和氨基酸等，在治疗胃肠道疾病、抗衰老、抗肿瘤、降低血糖和缓解视疲劳等方面均有良好疗效[3，4]。由于人为过度采挖使得铁皮石斛的野生资源濒临灭绝，已被列入《中国植物红皮书》。利用植物细胞培养技术获得组织培养物，并以组织培养物代替其原植株成为药源，是实现野生石斛资源可持续利用的有效方式之一。

笔者通过人工组织培养培育出铁皮石斛胚状体，为了解其抗疲劳功效，对其进行实验研究。

1 材料和方法

1.1材料

1.1.1实验动物 SD大鼠65只，雄性，体重180～200 g，由上海市西普尔-必凯实验动物有限公司提供，许可证号SCXK(沪)2008-0016。

1.1.2实验药品及仪器 铁皮石斛胚状体由上海汤振生物技术有限公司提供,市售铁皮枫斗药材(广东鹰皇参茸制品有限公司),全血乳酸测试盒、肝(肌)糖元测试盒、葡萄糖测试盒及尿素氮测试盒(南京建成生物工程研究所),FT-200大鼠跑台(成都泰盟科技有限公司),T6新世纪紫外可见分光光度计(北京普析通用仪器有限责任公司),HWS-24电热恒温水浴锅(上海一恒科学仪器有限公司 )。

1.2实验方法[5～7]

1.2.1动物分组 实验前先进行动物运动适应能力的筛选：SD大鼠65只，均在电动跑台上以速度10 m/min无电刺激运动10 min，共3 d，淘汰无法适应跑台跑步的大鼠5只，剩余60只动物随机分为空白对照组、跑步对照组、低剂量组、中剂量组、高剂量组、铁皮枫斗组,每组10只。跑步组、低、中、高剂量组与铁皮枫斗组大鼠在电动跑台上电刺激强迫跑步10 d，速度从第1天11 m/min至第10天20 m/min逐天递增，跑步时间20 min。第11天开始灌胃给药半小时后保持每天以20 m/min的速度运动30 min，连续给药7 d。

1.2.2给药方法 给药剂量：灌胃给予空白对照组与跑步对照组为蒸馏水；低、中、高剂量组为铁皮石斛胚状体水煎液，根据成人每日推荐剂量折算：分别为0.2、0.4、0.8 g/kg；铁皮枫斗组给药剂量为1.2 g/kg；给药量：1 ml/100 g体重。

1.2.3血糖及全血乳酸含量 实验动物于末次给药半小时后各剂量组大鼠在电动跑台上电刺激强迫跑步1 h，速度为25 m/min，各组大鼠跑前眼眶取血1 ml，跑后立即眼眶取血1 ml，休息30 min后腹主动脉取血，空白组平行取血3次。全血经肝素抗凝, 3 000 r/min离心10 min，取血浆，按试剂盒步骤操作测定，于505 nm及530 nm处测 A 值。

1.2.4肝糖元含量、肌糖元含量及血尿素氮含量[8]实验动物于末次给药半小时后各剂量组大鼠在电动跑台上电刺激强迫跑步1 h，速度为25 m/min，各组大鼠跑后休息30 min后腹主动脉取血，取肝脏、腿部肌肉。全血经肝素抗凝， 3 000 r/min离心10 min，取血浆。按试剂盒步骤操作测定，于520 nm处测 A 值。

2 结果

2.1铁皮石斛胚状体对大鼠血糖含量的影响(见表1)。

表1 铁皮石斛胚状体对大鼠血糖含量的影响

1)P<0.05，2)P<0.01,与空白对照组比较；3)P<0.05，4)P<0.01与跑步对照组比较。

从表1可以看出，与空白组相比，跑步后各组大鼠的血糖含量均明显降低，但都明显高于跑步对照组。在休息30 min后，与跑步对照组相比，各组大鼠的血糖含量均明显上升，铁皮石斛胚状体中、高剂量组效果更为明显，基本恢复跑前血糖含量。提示铁皮石斛胚状体有利于运动后血糖的恢复。

2.2铁皮石斛胚状体对大鼠全血乳酸含量的影响(见表2)。

表2 铁皮石斛胚状体对大鼠全血乳酸含量的影响

1)P<0.05，2)P<0.01,与空白对照组比较；3)P<0.05，4)P<0.01与跑步对照组比较。

从表2可以看出，与空白对照组相比，跑步后各组大鼠全血乳酸含量均明显上升。休息30 min后，与跑步对照组相比，铁皮石斛胚状体各剂量组均能明显减少乳酸的含量，其中,中、高剂量组效果更加显著。提示铁皮石斛胚状体有利于减少运动后体内乳酸的含量，减少乳酸在体内的蓄积。

2.3铁皮石斛胚状体对大鼠肝糖元、肌糖元及血尿素氮含量的影响[6](见表3)。

表3 铁皮石斛胚状体对大鼠肝糖元、肌糖元及血尿素氮含量的影响

1)P<0.05，2)P<0.01,与空白对照组比较；3)P<0.05，4)P<0.01与跑步对照组比较。

从表3中可以看出，与空白对照组相比，运动后高剂量组大鼠肝糖元含量无明显变化，中、高剂量组大鼠的肝糖元与肌糖元含量均明显高于跑步对照组，高剂量组效果优于铁皮枫斗组。与空白对照组相比，中剂量组大鼠血尿素氮含量无明显变化。各剂量组大鼠血尿素氮含量均能明显低于跑步对照组，其中，中、高剂量组效果更为显著。提示铁皮石斛胚状体可以减少肝糖元与肌糖元的消耗，并有效减少血尿素氮的生成。

3 讨论

疲劳是机体在一定环境条件下，因长时间过于繁重、紧张的劳动(包括脑力和体力)而引起的工作效率暂时性明显降低的一种生理现象。长期疲劳引起的亚健康会严重影响人们的工作与生活，研究缓解疲劳的药物有着重要实际意义。

糖是机体最重要的能源物质。其中肌糖元是骨骼肌中可以随时动用的贮备能源，其贮备量与运动的耐力呈正相关，肝糖元的主要作用是维持血糖的相对稳定，随着运动时间的延长，血糖水平开始下降，为了补偿血糖的消耗，肝糖元分解和糖异生作用增强。一旦肝糖元耗竭会使运动肌供能不足导致外周疲劳。本实验结果表明，铁皮石斛胚状体的抗疲劳作用可能与增加肝糖元、肌糖元及血糖的储备有关。

当机体长时间不能通过糖脂肪分解代谢得到足够能量时，机体蛋白质与氨基酸分解代谢随之增强，产生大量的尿素氮。机体血尿素氮含量随运动负荷增加而增加，而且机体对负荷的适应性越差产生的尿素氮越多。本实验结果表明，铁皮石斛胚状体可能通过抑制血尿素氮的产生起到抗疲劳的作用。

乳酸作为肌肉活动的主要代谢产物，是评价机体疲劳的重要标志物，其在体内的积累可影响肌肉的收缩功能和运动能力，会刺激神经末梢，从而引起肌肉的痉挛、疼痛和局部水肿等一系列延迟性肌肉酸痛的表现。因而，减少乳酸在肌肉中的积累，可以延缓疲劳的发生或加速疲劳的消除。本实验结果表明，铁皮石斛胚状体可能通过减少乳酸在体内的蓄积而产生抗疲劳的作用。

综上所述，铁皮石斛胚状体具有抗疲劳的作用，这为铁皮石斛替代品的开发提供了实验基础和理论依据。

[1] 中国药典2010年版.一部[S]．2010：85.

[2] 魏·吴普等述，清·孙星衍等辑．神农本草经[M]．北京：人民卫生出版社，1982：21．

[3] 郁美娟，孟庆华，黄德音，等．石斛属植物有效成分及药理作用研究[J] ．中成药，2003，25(11)：918．

[4] 白世淼,戎曙欣,陈小华.石斛爽目颗粒治疗视疲劳的疗效观察[J] ．河北中医药学报，2009，24(3)：23．

[5] 程志清，龚文波，姚 立，等．SD大鼠心气虚证动物模型的研制[J] ．中国中医药科技，2003,10(6)：361．

[6] 赵 晖，李宗友．杜仲叶药理作用研究(Ⅱ)-抗疲劳及愈伤作用[J] ．国外医学中医·中药分册，2000,22(4)：211．

[7] 于文兵，严 政．核能补剂对小鼠游泳和大鼠跑台运动能力的影响[J] ．南京体育学院学报(自然科学版)，2004,3(1)：43．

[8] 刘诗琼，秦晓群，李世胜．黄精多糖对小鼠抗疲劳作用的实验研究[J] ．中国当代医药，2009,16(10)：31．

2010-11-01

[修回日期] 2010-12-01

Theexperimentalstudyofanti-fatigueeffectoftheembryoidinDendrobiumcandidumWal1.ExLind.onrat

XIN Tian1,2, CHU Zhi-Yong2,LUAN Jie2, TANG Jia-Jing3, SUN Qian1,2,ZHAI Yan-Jun1

(1.Liaoning University of Traditional Chinese Medicine, Dalian 116600, China;2.Naval Medical Research Institute, Shanghai 200433, China;3.Shanghai Tangzhen Biotechnology CO,LTD., Shanghai 201900, China)

ObjectiveTo study the anti-fatigue effect of the embryoid of D．officinale on rat.MethodsMale rat were randomly divided into 6 groups : 3 test groups were administered with the embryoid of D．officinale (0.2、0.4、0.8 g/kg, respectively),others were positive control group (D.officinale 1.2 g/kg), normal control group and running control group respectively. The changes of Glu, Lactic Acid LD were measured before, after and 30min after running respectively. The BUN and liver glycogen and muscle glycogen were measured after running.ResultsCompared with the running group, each dosage group of the embryoid of D.officinale could increase the Glu content as well as reduce Lactic Acid LD content after running 30 min in rat. Middle-dose group and high-dose group can obviously reduce the BUN content and retain the liver glycogen and muscle glycogen content.ConclusionThe embryoid of D．officinale had the effect of anti-fatigue on rat.

DendrobiumcandidumWal1．ExLind1.(D．officinale); embryoid; rat; running; anti-fatigue

辛 甜(1986-)，女，硕士研究生.Tel: (021)81883187,E-mail:todayenglish@sina.com.

翟延君.Tel：(0411)87586003，E-mail:lnzyzyj@sohu.com.储智勇.Tel: (021)81883188,E-mail:zhiyongchu@tom.com.

R961

A

1006-0111(2010)01-0021-03