反相高效液相色谱法分析辅酶Q10

党 伟，李 丹，李晓磊

(1.吉林农业大学 食品科学与工程学院，长春 130118;2.长春大学 生物科学技术学院，长春 130022)

反相高效液相色谱法分析辅酶Q10

党 伟1，李 丹2，李晓磊2

(1.吉林农业大学 食品科学与工程学院，长春 130118;2.长春大学 生物科学技术学院，长春 130022)

本实验应用色谱技术，建立了辅酶Q10的检测方法。采用反相高效液相色谱法，以十八烷基硅烷键合硅胶为固定相，以无水乙醇－甲醇(1:1)为流动相;柱温35℃，检测波长275nm。结果表明:辅酶Q10的含量为6mg/g。

辅酶Q10;反相高效液相色谱法;检测

0 引言

辅酶Q10是一种脂溶性抗氧化剂，是人类生命不可缺少的重要元素之一，它既能激活人体细胞和细胞能量的营养，还能保持膜质流动性，增强人体非特异性免疫功能［1，2］。医学上广泛用于心血管系统疾病、病毒性肝炎、抗衰老等［3］。近年来，国内外广泛将其用于营养保健品及食品添加剂。本文参照中华人民共和国药典(2005年版)［4］“辅酶Q10胶囊”规定的方法检测，用高效液相色谱法(HPLC)法检测辅酶Q10。

1 仪器与药品

岛津LA-20AD高效液相色谱仪;

CoQ10对照品，Sigma公司;辅酶Q10胶囊，购于长春欧亚集团有限公司;无水乙醇为色谱纯。

2 实验方法

2.1 色谱条件

紫外检测器，检测波长275nm;C18色谱柱，Waters Nova－Pak C18(粒径μm，150mm*3.9mm，沃特世公司，美国马萨诸塞州米尔福德);流动相，甲醇－无水乙醇(1:1);流速0.8mL/min;柱温35℃;进样体积20μL。

2.2 标准溶液的配制

精密称取100mg辅酶Q10标准品，加无水乙醇适量溶解，冷却后，定容至100mL棕色容量瓶中，在避光条件下于冰箱中冷冻保存。

2.3 药品的预处理

避光操作。精密称取1.5g(约相当于辅酶Q1020mg)，加无水乙醇适量，置50℃水浴中振摇溶解，放冷后，移至100mL棕色容量瓶中，加无水乙醇至刻度，摇匀，在3000r/min下离心5min，去上清液，经0.45μm孔径的微孔滤膜(聚四氟乙烯，丰源过滤设备有限公司，浙江省海宁市)过滤后，所得滤液用于反相高效液相色谱分析。

2.4 药品含量的测定

采用外标法定量。

3 结果与讨论

3.1 标准品辅酶Q10

标准品辅酶Q10经C18色谱柱分离得到色谱图见图1。图1的结果表明:标准品辅酶Q10的保留时间为 23.75min，峰面积为 5676042.5。

图1 标准品辅酶Q10高效液相色谱图标准品辅酶Q10:23.75min

3.2 辅酶Q10胶囊

辅酶Q10胶囊经C18色谱柱分离得到色谱图见图2。图2的结果表明:辅酶Q10胶囊的保留时间为23.761 min，峰面积为514662.4。按峰面积外标法计算其含量。

图2 辅酶Q10胶囊高效液相色谱图辅酶Q10胶囊:23.761min

3.3 结论

采用国标法处理辅酶Q10胶囊样品，再利用反相高效液相色谱法可以准确分析计算辅酶Q10胶囊的辅酶Q10含量为6mg/g。

此种方法操作简单，定量精确，检出限高，适用于辅酶Q10胶囊中微量辅酶Q10的检测。

［1］ KOMMURU T R，KHAN M A，ASHRAF MA，et al.A simplified chromatographic method for quantitative determination of coenzyme Q10 in dog plasma［J］.Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis，1998，16:1037 －1040.

［2］ GROSSI G，BARGOSSI A M，FIORELLA P L，et al.Improved high-performance liquid chromatographic method for the determination of coenzyme Q10 in plasma［J］.JChromatogr，1992，593:217 －226.

［3］ 张继忠，迟莉丽，沈亚领.辅酶Q10的生产及在医学领域中的应用［J］.上海应用技术学院学报，2004，4(4):10－12.

［4］ 中华人民共和国卫生部药典委员会.卫生部药品标准、抗生素生化药品注释［S］.1989.94－98.

Analysis of Coenzyme Q10 byReversed-Phase High-Performance Liquid Chromatography

DANG Wei1，LI Dan2，LI Xiao-lei2

(1.College of Food Science and Engineering，Jilin Agricultural University，Changchun 130118，China;2.Bio-Scientific and Technical College，Changchun University，Changchun 130022，China)

This experiment establishes a method for detecting coenzyme Q10 by using chromatographic technique.The best chromatographic conditions are stationary phase C18 column，mobile phase alcohol-methanol(1:1)with column temperature 35℃ and detection wavelength 275 nm.The results show that the content of coenzyme Q10 is 6mg/g.

coenzyme Q10;RP-HPLC;detection

TS218

A

1009－3907(2011)12－0086－02

2011-09-28

党伟(1985-)，女，吉林双辽人，硕士研究生，主要从事食品生物技术的研究。李丹(1972-)，男，内蒙古赤峰人，教授，博士，主要从事食品科学方面研究。

责任编辑:钟 声