不同剂量白果外种皮粗制剂杀灭钉螺效果比较与分析

汪江节,杨小红,沈玉华,吴云龙

(1.安徽大学 化学化工学院，安徽 合肥 230000；2.池州学院 工程材料实验中心，安徽 池州 247000；3.池州市血防站，安徽 池州 247000)

不同剂量白果外种皮粗制剂杀灭钉螺效果比较与分析

汪江节1,2,杨小红2,沈玉华1,吴云龙3

(1.安徽大学 化学化工学院，安徽 合肥 230000；2.池州学院 工程材料实验中心，安徽 池州 247000；3.池州市血防站，安徽 池州 247000)

植物灭螺现已成为人们竞相研究的热点。本文采取当地盛产的白果树的白果外种皮，配制成不同浓度粗制剂，分别利用WHO“杀螺剂实验室终筛方法”中的浸杀法观察室内灭螺效果、湿地喷洒法观察室外环境的灭螺效果，并设置了氯硝柳胺、水的对照组，初步探索出白果外种皮粗制剂系列剂量随时间的杀灭钉螺效果的关系，实验结果表明：白果外种皮粗制剂有较好的灭螺效果，具有高效、低毒的特点，有进一步配伍或复合成灭螺药物的研究价值。

白果；外种皮；钉螺；杀灭钉螺；效果

世界卫生组织的报告称，血吸虫病在全世界74个国家中流行，6亿多人口受到威胁，血吸虫病也是严重危害我国人民身体健康的五大寄生虫病之一。长江流域的血吸虫多为日本血吸虫，而钉螺（Oncomelania hupensis）是日本血吸虫的唯一中间宿主，杀灭钉螺是公认的防治血吸虫病最有效的方法[1]。安徽省池州地区，区域内大部分是易于钉螺生存的水域环境，是我国有史以来血吸虫病重灾区，目前血吸虫病防治形势依然不容乐观，预防和控制血吸虫病流行的有效方法之一仍然是杀灭钉螺[2]。目前，我国主要采取的灭螺方法有物理灭螺及化学灭螺及生物灭螺。但物理方法灭螺费工费时往往是事倍功半、化学药物例如WHO指定药物氯硝柳胺灭螺见效快，但价格较高、对环境存在污染，同时对水生动物鱼、虾等也产生了毒害。相比而言，近年来，植物灭螺被人们普遍认为是费用较低，对环境无污染的灭螺新方法，引起了研究者的极大兴趣。现已发现近百种可用于灭螺的植物，如油茶、桉树、樟树、夹竹桃、紫云英、山红木等[3]。其中，银杏树含有的银杏酸类物质就被发现有较好的灭螺效应，仰榴青，吴向阳[4]等在这方面已展开一些初步研究，杨小明[3]课题组也报道了银杏外种皮石油醚提取物灭螺效应，但其真实的灭螺效果还处在一个定性分析研究的阶段，银杏 （Ginkgo biloba）为银杏科（Ginkoaceae）银杏属植物，又名白果树、公孙树、鸭脚通。占全世界的80%以上银杏是在中国的山东、江苏、河南、安徽、浙江、湖北、广西等地区，这些地区的银杏产量约占全国的70%。是世界上银杏的主产区[5]。尤其是在安徽省池州地区，白果树分布更为广泛和丰富，当地老百姓经常利用白果的外种皮浸泡液，直接用于抗菌、杀虫，也有用于田间灭螺，虽然也有一定的效果，但往往实际效果并不理想，同时还污染了环境。如何充分利用这一地方特色植物灭螺资源，有效提高灭螺效果，改善和治理池州地区的血吸虫疫灾环境，这为我们地方院校开展此项研究，提出了具有现实意义和学术价值的课题。本研究进行了白果外种皮粗制剂对钉螺的灭杀效果研究，通过室内不同剂量、不同时间的浸泡杀灭钉螺实验；不同剂量、不同时间的浸泡与仿生态喷洒对比实验；浸泡逃逸对比实验。实验结果表明：白果外种皮粗制剂有较好的灭螺效果，具有高效、低毒的特点，改变了化学药物氯硝柳胺高成本、高污染的不足，有望进一步配伍优化或与相关纳米材料复合成灭螺药物，具有很高的研究应用推广价值。

1 材料与方法

1.1 钉螺

钉螺由池州市血防所协调，青阳县血吸虫病防治站配合，采自青阳县杨田镇，1年内未经化学药物接触的现场钉螺。采取的钉螺带回实验室潮湿土壤饲养，饲养的土壤来自钉螺采取地，饲养添加的水来杨田镇自然湖水，经实验室适应性饲养5天，挑选健康、活力强，6-8螺旋的成螺用于试验。

1.2 白果外种皮试液制备

白果采自石台县兰关、七里等乡镇，用白露后自然成熟的鲜果外皮（去果核），晒干后用粉碎机研成粉末，常规方法装瓶，用保鲜膜密封，室温存贮保管备用。临用时按所需浓度比例精确称取干粉加入自然清河水。

1.3 试验方法

试验采用WHO“杀螺剂实验室终筛方法”中的浸泡法，并略加改进。基本操作方法是：将配制好药液置于100ml烧杯中，每组投放钉螺 60只 （每袋20只×3袋），于 24、48及 72h各取出 1袋（20只），去氯水 （烧杯盛装自来水在阳光下放1天以上）冲洗3次，于表面皿上用少量去氯水微浸饲养条件（20℃）下放置3h无活动后，显微镜下计钉螺死亡数（判定死亡标准：4×10倍显微镜下观察，未见活动、用针刺其软体无反应者判为死亡）。

钉螺上爬试验：在室内室温下，用50ml白色小烧杯，分别配5种不同浓度的药液20ml，各小烧杯中放入健康活钉螺20只，并加盖纱布防止钉螺爬出来，投螺后观察钉螺上爬情况。

喷洒灭螺实验：在实验地环境下，按实验剂量直接喷洒，上用尼龙网盖住，每天观察，分别于5天，10天，15天后取出一份，用去氯水冲洗 3次，于表面皿上用少量去氯水微浸饲养条件（20℃）下放置 3h无活动后，显微镜下计钉螺死亡数。

2 结果与讨论

2.1 室内浸杀灭钉螺效果

室温在18-22℃，用白果外皮干粉剂和白果皮浸出液在相应浓度下浸泡钉螺后，各种浓度对钉螺的死亡率均可达60-100%，见表1。

表1 白果皮粗制剂不同剂量浸杀法灭螺效果

用不同溶剂提取白果外种皮有效成分银杏酸，浸杀钉螺效果不尽相同，其中以干粉混悬液效果一般，水提取物效果更佳。干粉和水提取物浸杀效果相对氯硝柳胺较差，灭螺有效成分含量较低，有必要提纯,纯度越高其杀螺效果越好[6]。室温下，干粉混悬液浸泡3d、5d以后钉螺死亡率达60%以上，其确切杀螺效果及机理有待进一步研究。

存在问题：气温过低可能是影响因素，应选择室温大于20℃进行；效果考核死活鉴定可能存在少量人为判断因素，应饲养后锤击鉴定；粉剂难以均匀可能是影响因素，是否再打细，并过目筛分离。试验均以氯硝柳胺为对照。本研究与氯硝柳胺实验室杀螺试验结果一致，实验方法可信。

2.2 钉螺上爬试验

表2 钉螺上爬试验结果

为确定白果外种皮的实验室灭螺效果，作者采用WHO“杀螺剂实验室终筛方法”中的浸杀试验、上爬试验。白果外种皮干粉的水溶液有效的抑制钉螺的上爬实验，此实验结果说明若白果外种皮干粉的制剂用于野外现场实验，能有效的控制钉螺的逃逸问题，增加药物的有效作用时间，提高灭螺效果。如果采用干粉河流湖泊现场灭螺，,其有效成分因流失而降低实际效果，变质腐烂物也可能将污染水质。

2.3 白果外种皮制剂不同剂量喷洒灭螺效果

表3 白果皮粗制剂不同剂量喷洒法灭螺效果

实验试用地的选择有可能是实验的一个影响因素；实验潮湿泥土的采集比较自然田间地头的自然环境对实验结果的判断有一定的影响因素；在药物剂量上，实验环境能控制有效药物成分的流失，而自然环境下，药物剂量难以人为有效控制；这些因素都能在一定程度上影响或改变实际的灭螺效果，应在实验及分析数据中予以考虑。

3 结论

以上实验结果表明：白果外种皮粗制剂有较好的灭螺效果，具有高效、低毒的特点，改变了化学药物氯硝柳胺高成本、高污染的不足，但更深的灭螺机理和配伍优化尚有待进一步探索，如何科学地提取提取白果外种皮有效灭螺成份与其它材料复合成灭螺药物[7]，无疑将具有很高的研究应用推广价值。相信此项研究对充分开发我市山区白果树丰富的植物资源，为防治当地血吸虫传播，将发挥其重要的社会意义和经济价值。

[1]Yuan Y,Xu XJ,Dong HF，etc.Transmission control of schistosom iasis japonica:implementaion and evaluation of different snail contrd interventions[J].ActaTropica，2005,96:191-197.

[2]Souza CP. Molluscicide control of snail vectors of schistosomiasis ［J］.Mem Inst Oswaldo Cruz Rio de Janeiro，1995，90（2）：165-168.

[3]陈盛霞,杨小明,吴亮，等.银杏外种皮提取物杀灭钉螺效果的研究[J].中国寄生虫学与寄生虫病杂志,2007,25(1):45-48.

[4]吴向阳,仰榴青,陈钧,等.银杏外种皮不同提取部位灭螺活性的研究[J].中国中药杂志,2007,32(8):740 741.

[5]于清萍，宁营.银杏叶提取物的研究进展及市场概况[J].上海医药,2010(8):342-343.

[6]Tripathi SM,Singh DK.Molluscicidal activity of punica granatum bark and canna indica root[J].Braz J Med Biol Res,2000,33:1351-1355.

[7]Yang XM,Chen J,Qian ZY,etc.Study of the antibacterial activity of ginkgo biloba acids[J].J Chin Herbal Med,2002,25:651-653.

The Analytical and Comparative Results of Eliminating Oncomelania with Different Doses of Ginkgo Exocarp

Wang Jiangjie1,2,Yang Xiaohong2,Shen Yuhua1,Wu Yunlong3
(1.College of Chemistry and Chemical Engineering,Anhui University,Hefei,Anhui 230000；2.Engineering Material Testing Center,Chizhou College,Chizhou,Anhui 247000；3.Chizhou Schistosomiasis Prevention Station,Chizhou,Anhui 247000)

The killing oncomelania effect of indoor and wetland outdoor spray is observed by means of WHO“molluscicide final screening laboratory methods” with different concentrations of produced fruit of local ginkgo exocarp.The paper explores the relationship of killing oncomelania time and dosage of ginkgo exocarp series to set niclosamide and the water control group,and demonstrate that the use of thick ginkgo exocarp molluscicidal agents has better results to killing oncomelania with high efficiency and low toxicity characteristics.This result has given potential research on the compatibility of the drug and the compound of killing oncomelania.Key Words:Gingo;Ginkgo Exocarp;Effect of Killing Oncomelania;Effect

TQ041

A

1674-1102(2011)03-0031-03

2010-12-29

国家自然科学基金（21071024，31070730）；安徽省科技计划项目（101402017）。

汪江节（1978-），男，安徽潜山人，池州学院化学与食品科学系讲师，硕士，主要从事生物无机复合纳米仿生材料的制备及生物效应研究。

[责任编辑：钱立武]