中药古方(射干麻黄汤)与经验方(哮宁口服液)的比较实验

张舒锦，程媛，李涓，郭蓉晓

小儿支气管哮喘是临床上的常见病、多发病，发 病率逐年上升，严重影响患儿的身心健康，危害患儿及其家庭的生活质量。西医认为哮喘是以气道炎症、气道高反应性为特征的疾病，治疗药物包括吸入型皮质激素、支气管扩张剂等［1］。由于应用西药后会出现一些不良反应［2］，故许多患者仍希望采用中药治疗。

“射干麻黄汤”是临床上治疗小儿支气管哮喘的古方，为了优化其疗效，我院刘小凡教授根据中药理论，以其为基础，针对婴幼儿生理病理特点优化组方，研制出哮宁口服液，并作为医院制剂在临床应用，取得了较好的疗效［3］。本课题通过动物实验(抗变态反应、平喘、止咳和化痰实验)，对射干麻黄汤和哮宁口服液的药理作用进行比较。

1 材料与方法

1.1 试验药物

哮宁口服液(批准文号:川药制字Z20070639)，每毫升相当于生药2.0 g;射干麻黄汤，每毫升相当于生药3 g，均由成都中医药大学附属医院药剂科提供。地塞米松片，0.75 mg/片，广东华南药业集团有限公司，批号060801;氨茶碱注射液，0.25 g/2mL，陕西省西安妇幼制药厂，批号060419;氯化铵，0.3 g/片，天津力生制药厂，批号061202;磷酸可待因，15 mg/片，青海制药厂出品，批号060907。

1.2 试剂

酚红，25 g/瓶，郑州中天实验仪器有限公司，批号061107;磷酸组织胺，1 g/瓶，上海三杰生物技术有限公司，批号060511;氨水，分析纯，成都化学试剂厂，批号 060212，500 mL/瓶。

1.3 动物

豚鼠，400～500 g，四川省实验动物专委会养殖场提供(合格证:SCXK(川)2006－14);昆明种小鼠，成都中医药大学实验动物研究中心提供(合格证:SCXK(川)2006－11)。

1.4 方法

1.4 .1 对卵蛋白致敏豚鼠的保护作用

豚鼠36只，雌雄兼有，按体重、性别随机分为4组:生理盐水组、地塞米松组(3 mg·kg－1)、哮宁口服液组(40 g生药/kg)、射干麻黄汤组(45 g生药/kg)。其中哮宁口服液和射干麻黄汤均为临床给药量的20倍。每鼠后腿肌注5%卵蛋白液1 mL/只，同时腹腔注射相同剂量以致敏［4］。致敏后第4天灌胃给药，每天一次，连续10天。于末次给药后1 h，分批放入喷雾装置，用5%卵蛋白液持续喷雾10 min，每批4只，每组1只。记录豚鼠出现呼吸困难的潜伏期及发生跌倒休克的动物数，10分钟未出现喘息的动物按10分钟计。喷雾完后，击昏豚鼠，股动脉放血，气管插管，用0.9%氯化钠液(37℃，pH=7.4)5 mL缓缓从气管注入，停留3分钟，回抽灌注液，重复一次，混合灌注液，用全自动生化分析仪测定白蛋白含量。豚鼠出现呼吸因难的潜伏期和白蛋白含量结果以t检验进行组间比较;发生跌倒休克的动物数用卡方检验进行组间差异比较。

1.4 .2 对豚鼠离体气管平滑肌的影响

木棰猛击豚鼠头部致死，迅速切开颈部皮肤，分离气管，从甲状软骨下至气管下端分叉处将整段气管剪下，放入盛有营养液的培养皿中，将气管剪成螺旋条状，然后固定在盛有Krebs－Henseleit溶液的麦氏溶槽内，37℃保温供氧，以肌张力倍感器通过二导生理记录仪描记［时间常敏［S］DC，滤波(HZ)10，灵敏度(mv·cm－1)0.5，走纸速度 0.5 mm·s－1］。调节初始张力为2 g，稳定30 min后开始实验。实验分为4组:生理盐水组、氨茶碱组(3.12×10－4g·mL－1)、哮宁口服液组(2.00×10－2g·mL－1)、射干麻黄汤组(3.00×10－2g·mL－1)。分别观察药液对正常气管平滑肌和加入磷酸组织胺(终浓度为1.67×10－6g·mL－1)后的气管平滑肌张力的影响，记录给药后 1、2、3、4、6、8、10、12分钟曲线下降幅度，以曲线下降mm数进行组间显著性比较。

1.4 .3 对氨水诱发小鼠咳嗽的影响

昆明种小鼠一批，雌雄各半，体重20±2 g。实验装置自制。实验前一天进行筛选，将小鼠置于玻璃罩内，迅速加入0.8 mL浓氨水加热蒸发，1 min后将小鼠取出，观察2 min内各鼠咳嗽次数，选出咳嗽5～30次的小鼠48只，按其咳嗽次数多少随机分为4个组:生理盐水组、可待因组(0.03 g·kg－1)、哮宁口服液组(40 g生药/kg)、射干麻黄汤组(45 g生药/kg)。其中哮宁口服液和射干麻黄汤均为临床给药量的20倍。灌胃给药，每天一次，连续3天。末次给药后1 h，同法进行引咳试验(分批进行，每批每组各1只)，比较各组小鼠咳嗽次数，结果以t检验进行组间比较。

1.4 .4 祛痰作用研究

昆明种小鼠48只，雌雄各半，体重20±2 g，按性别，体重随机分为4个组:生理盐水组、氯化铵组(1 g·kg－1)、哮宁口服液组(40 g生药/kg)、射干麻黄汤组(45 g生药/kg)。其中哮宁口服液和射干麻黄汤均为临床给药量的20倍。禁食不禁水12 h后，灌胃给药，40 min后腹腔注射0.5%酚红溶液0.5 mL。30 min后处死小鼠，分离气管，将7号针插入气管约0.6 cm，结扎固定，用注射器吸取5%NaHCO3溶液0.8 mL，来回抽洗三次，同法再灌洗两次，将三次灌洗液合并，取此灌洗液1.5 mL，加入适量40%三氯醋酸沉淀蛋白，离心，取上清液加入10%NaOH 0.15 mL碱化显色，置721型分光光度计510 nm比色，测定灌洗液的OD值，结果以t检验进行组间比较。

2 结果

2.1 对卵蛋白致敏豚鼠的保护作用

表1结果显示，哮宁口服液40 g生药/kg和射干麻黄汤45 g生药/kg灌胃给予豚鼠，均能明显延长卵蛋白致敏豚鼠出现呼吸困难的潜伏期，与对照组比较有显著性差异(P＜0.05)，图1显示射干麻黄汤还能显著降低气道白蛋白含量，与对照组比较有显著性差异(P＜0.05)。哮宁口服液组和射干麻黄汤组发生跌倒休克的动物数与对照组比较均无显著性差异，但跌倒的动物数有减少的趋势。表明两药可以减少炎症状态时气道微血管的渗漏，减轻哮喘发作的程度，对过敏性哮喘的动物有一定保护作用。

哮宁口服液与射干麻黄汤相比，出现呼吸困难潜伏期时间、白蛋白含量和发生跌倒休克的动物数均无显著性差异(p＞0.05)，说明哮宁口服液对卵蛋白致敏豚鼠的保护作用与射干麻黄汤相当。

表1 对卵蛋白致敏豚鼠的保护作用

图1 对卵蛋白致敏豚鼠的保护作用

2.2 对豚鼠离体气管平滑肌的影响

图2、图3结果显示，哮宁口服液和射干麻黄汤可明显使正常和组胺致痉的豚鼠气管螺旋条松驰，与对照组相比均有显著性差异(p＜0.01)。在1～4 min内随时间的延长，哮宁口服液使正常和组胺致痉的豚鼠气管螺旋条松驰的作用增强;在4～12min内松弛作用达到并一直维持在阈值。表明两药均能降低气管平滑肌紧张度。

图2 对未经组胺作用的豚鼠离体平滑肌张力的影响

哮宁口服液和射干麻黄汤在相同时间点对豚鼠离体气管平滑肌的松弛作用无显著性差异。

图3 对经组胺作用的豚鼠离体平滑肌张力的影响

2.3 对氨水诱发小鼠咳嗽的影响

图4 结果显示，哮宁口服液(40 g生药/kg)和射干麻黄汤(45 g生药/kg)灌胃给予小鼠，均能明显减少氨水引咳小鼠的咳嗽次数，与对照组比较有显著性差异(P＜0.05、0.01)，表明哮宁口服液具有止咳作用。

哮宁口服液与射干麻黄汤相比，对氨水刺激小鼠2 min内咳嗽次数的影响无显著性差异，说明哮宁口服液的止咳作用与射干麻黄汤相当。

图4 对氮水刺激小鼠咳嗽的止咳作用

2.4 祛痰作用研究

图5结果显示，哮宁口服液(40 g生药/kg)能使小鼠呼吸道粘膜酚红的分泌量显著增加，与对照组比较有显著性差异(P＜0.05)。表明哮宁口服液具有祛痰作用。哮宁口服液与射干麻黄汤相比，对呼吸道分泌的酚红浓度无显著性差异，说明哮宁口服液和射干麻黄汤的祛痰作用相当。

图5 对小鼠的社痰作用

3 讨论

支气管哮喘是小儿常见的变态反应性疾病，诱因多为呼吸道感染。中医称哮病，多因感受外邪，或饮食情志等失调，诱动内伏于肺的痰饮，痰气阻塞，使肺气不得宣降，以突然出现呼吸喘促，喉间哮鸣有声为主要表现的肺系发作性疾病。

射干麻黄汤，出自《金匮要略》，为仲景首创，主治寒饮郁肺结喉证。现代可用于治疗哮喘、小儿支气管炎、支气管哮喘等，是化瘀、降气、平喘的良方。射干麻黄汤作为中药古方，采用剂型为传统汤剂，有吸收快、疗效好、应用历史悠久、应用范围广泛等优点。但是随着社会的进步，传统汤剂熬制过程费时、携带不方便、质量标准不明确等弊端日益明显，制约了中医药现代化的发展。

哮宁口服液以经方“射干麻黄汤”为基础，另加入地龙、枳壳、杏仁、黄芩、葶苈子等。方中麻黄、细辛解表温肺化饮，射干、紫菀、款冬花化痰平喘，枳壳降逆，地龙解痉平喘［6］。作为我院院内制剂应用多年，疗效显著。我们通过豚鼠致敏实验、豚鼠离体气管条实验、小鼠氨水引咳实验和小鼠酚红排出量测定实验证实了哮宁口服液具有明显的抗变态反应、平喘、止咳、祛痰的药理作用，且在剂量同为临床用量20倍的情况下，其动物试验的药效作用与射干麻黄汤相比无明显差异。与射干麻黄汤相比，哮宁口服液的制备过程操作简便、工艺稳定、质量可控。

综上所述，哮宁口服液与射干麻黄汤相比，抗变态反应、平喘、止咳、祛痰作用疗效相当，且体积小，服用、存储及运输方便，具有质量可控等优点，满足中药现代化的发展要求，很有发展前途。

［1］ 沈华浩，应英华．新版全球哮喘防治创议(GINA)方案的评价和解读［J］．临床内科杂志，2007，24(4):221．

［2］ 方雪娟，江逊，汪定成．哮喘儿童治疗依从性的调查分析与干预对策［J］．解放军护理杂志，2007，27(4):41．

［3］ 刘小凡，赵霞，郭蓉晓，等．哮宁口服液治疗小儿哮喘的临床观察——附:55例病例报告［J］．成都中医药大学学报，1999，22(4):12．

［4］ 徐叔云，卞如濂，陈修．药理实验方法学［M］．第3版，北京:人民卫生出版社，2002:1417．

［5］ 徐叔云，卞如濂，陈修．药理实验方法学［M］．第3版，北京:人民卫生出版社，2002:1368．

［6］ 刘小凡，郭蓉晓，孟晓露，等．哮宁口服液治疗小儿哮喘的临床与实验研究［J］．上海中医药杂志，2001，9:24．