血细胞分析仪与显微镜直接计数法检测嗜酸性粒细胞的比较

陈佳利 郑少丽 吴雪霞 张坤波

(广东省饶平县人民医院 广东饶平 515700)

手工法计数嗜酸性粒细胞,操作繁琐,费时,费力,结果重复性差,已不能完全满足临床需要。血细胞计数仪近年来在国内各地各类医院应用越来越多,本文对五分类血细胞分析仪与显微镜直接计数法计数嗜酸性粒细胞进行比较,以了解仪器对嗜酸性粒细胞计数的准确性,报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择我院住院及门诊患者120例、空腹采静脉血2mL,注入含EDTA·K2的真空管(由广州阳普医疗科技股份有限公司提供)内,立即轻轻颠倒混匀(8～10次)。

1.2 仪器

中国迈瑞公司的BC5800;OLYMPUS CX21显微镜;美国雅培公司的CD3700;改良Neubauer血细胞计数板。

1.3 试剂

由珠海贝索生物技术有限公司提供CD3700试剂;BC5800为深圳迈瑞公司配套试剂,按《全国临床检验操作规程》(第3版)的方法配制[1]嗜酸性粒细胞稀释液。

1.4 方法

1.4.1 准确度测定 采集抗凝静脉血标本120例,先用CD3700和BC5800分别测定嗜酸性粒细胞绝对值,再用显微镜直接计数,计数由2名有经验的检验技师进行,每人每份样本分别计数2次。

1.4.2 精密度测定 选择高、中、低值嗜酸性粒细胞值不同的抗凝静脉血标本各1份,先分别用CD3700和BC5800将每份标本重复计数10次;显微镜直接计数法严格按照《全国临床检验操作规程》(第3版)由2名检验技师进行,每人每份标本重复计数10次,算出各自的CV。

表1 五分类血细胞分析仪与手工法测定不同值的嗜酸性粒细胞的结果比较(±s)

表1 五分类血细胞分析仪与手工法测定不同值的嗜酸性粒细胞的结果比较(±s)

方法 高值 中值 低值 平均CV(%)(×109/L) CV(%) (×109/L) CV(%) (×109/L) CV(%)CD3700 4.502±0.041 0.83 1.135±0.020 1.77 0.181±0.05 4.03 2.21 BC5800 4.332±0.042 0.96 1.112±0.022 1.95 0.186±0.03 3.91 2.27显微镜直接计数法 4.649±0.316 6.79 1.098±0.092 8.72 0.189±0.02 10.58 8.71

1.5 统计

数据采用SPSS 11.03统计软件进行统计分析。数据以(s)表示,配对t检验,P＜0.05为有差异,P＜0.01为差异显著。

2 结果

2.1 测定结果比较

精密度高、中、低值的3份标本精密度测定结果表明CD3700和BC5800对嗜酸性粒细胞绝对值计数的精密度明显高于手工计数,见表1。

2.2 相关性

本组120例患者嗜酸性粒细胞结果CD3700、BC5800和显微镜直接计数法检测分别是0.66、0.61、0.74×109/L;S分别是0.63、0.73、0.77×109/L。差异无统计学意义(P＞0.05);CD3700和BC5800的相关系数(r)为0.98,差异有统计学意义(P＜0.01),表明这2台仪器的相关性较好。

3 讨论

血液嗜酸性粒细胞计数是某些传染性疾病、寄生虫病、过敏性疾病、大面积烧伤及血液病等疾病诊断、治疗及预后观察的一项重要指标[2]。传统的直接计数法操作费时费力,还受所用仪器的精密度与清洁度、稀释液及样本加样量的准确性、样本放置时间以及操作人员的技术熟练程度等诸多因素的影响。CD3700五分类全自动血细胞分析仪是利用0°和10°散射光将白细胞以胞浆内容物复杂性和细胞体积为X轴和Y轴绘制白细胞散点图,同时利用90°消偏振光将嗜酸性粒细胞从WBC群中区分开来[3]。BC5800,采用半导体激光散射结合细胞化学染色技术,嗜酸性粒细胞特有的嗜酸性颗粒使它更易区别于其它白细胞;浮动聚类分类技术,提高散点图边界识别能力,使白细胞分类更准确,而自定义复检规则,提高仪器对异常样本的筛查效率。使嗜酸性粒细胞检测更加准确。而本实验这2种方法检测的嗜酸性粒细胞结果比[4]略低,可能与所检查的对象有关。由此可见,CD3700和BC5800方法具有良好的相关性,CV值较小,且嗜酸性粒细胞绝对值较低,其原因为全自动进样方式,操作标准化,人为误差得以减少。手工直接计数法CV值较大,其原因可能是仪器分析上万个细胞与人工镜检计数200个细胞相比误差较大,同时还受操作人员技术熟练程度的影响。五分类血细胞分析仪和显微镜直接计数测定的结果差异无显著性,说明它们具有很高的准确度。CD3700和BC5800这2台仪器计数嗜酸性粒细胞绝对值呈正相关,与文献报道相符[5]。

由此可见,嗜酸性粒细胞五分类血细胞分析仪CD3700和BC5800所得结果与手工法直接计数密切相关,具有准确性高,重复性好,操作简单,检测速度快,便于大批量检测等优点。在保证使用合格试剂和仪器性能稳定的条件下,五分类血细胞分析仪较高的精密度和高准确性是实验室测定嗜酸性粒细胞可靠理想的仪器,可取代手工法,满足临床需要,值得推广。

[1] 叶应妩,王毓三,申子瑜.全国临床检验操作规程[M].第3版,南京：东南大学出版社,2006：136.

[2] 王波,赖明,熊元,等.CELL-DYN3700全自动血细胞分析仪嗜酸性粒细胞绝对值的评价[J].检验医学与临床,2006,3(6)：143～144.

[3] 范华杰,凌励,周道银.全自动血液分析仪Sysmex X E -2100与Abbott CD-3700的比较分析[J].检验医学,2006,21(2)：164～166.

[4] 徐金花,林赛玲,张丽娟,等.血细胞分析仪与显微镜直接计数法测定嗜酸性粒细胞的比较[J].检验医学与临床,2009,6(21)：1805～1806.

[5] 费中海,李君安,唐中,等.BC5500计数嗜酸性粒细胞绝对值的可信性分析[J].中国误诊学杂志,2008,28(10)：6854～6855.