调经祛斑片治疗黄褐斑的实验研究

文建军 陈兴元

黄褐斑，是一种获得性色素沉着皮肤病，多发于青年女性，表现为色素对称性沉着，轻者淡黄色或浅褐色，点片状散布于面颊两侧。

1 材料与方法

1.1 实验动物及分组方法

昆明种小鼠72只，均为雌性，体重（20±2）g。随机分成6组：正常对照组（A）、模型组（B）、低剂量调经祛斑片组（C）、中剂量调经祛斑片组（D）、高剂量调经祛斑片组（E）、阳性对照组（F），每组12只，分笼喂养。实验动物由河南省实验动物中心提供。

1.2 动物模型制作

①脱毛：先用剪刀剪去鼠背上的粗毛，再用电动剃须刀将剩余的绒毛剔除干净，使背部皮肤充分暴露，剃毛面积2cm×2cm。每周脱毛1次，脱毛后用温清水洗净。②紫外线照射：将装有实验小鼠的笼子放在SS—03P型光疗仪灯具正下方的2cm处，紫外线剂量设定为120µw/cm2照射时间为20min/d，连续照射8周，达到文献所叙述的剂量。每周使用紫外线辐照度监视计检测紫外线光疗仪辐照强度1次。

1.3 实验药物

调经祛斑片（河南灵佑药业有限公司提供，国药准字Z20080446.20090103-2）。成份为：黄芪、菟丝子、墨旱莲、女贞子、枸杞子、当归、白芍、何首乌等。将原药片粉碎，加热提取。制成煎剂，分为低、中、高剂量制剂。①空白组：蒸馏水0.2mL／10g体重灌服；②模型组：同正常组；③调经祛斑片低剂量组：以16%调经祛斑片水溶液0.2mL／10g体重（相当于人临床用量的5倍）体重灌服；④调经祛斑片高剂量组：1倍于调经祛斑片低剂量组的剂量；⑤调经祛斑片高剂量组：2倍于调经祛斑片低剂量的剂量；⑥阳性对照组：以20.6%百消丹水溶液0.2mL／10g体重（相当于人临床用量的2倍）灌服。

1.4 取材方法

1.4.1 取材

实验第16周末，小鼠背部器械脱毛，面积为2cm×1cm.断颈处死全部小鼠后，立即取下背部脱毛处全层皮肤，冷冻于-70℃冰箱内保存待测。

1.4.2 应肤组织匀浆的钳备

每组小鼠皮肤组织标本取0.5g，在冰生理盐水中漂洗，除去血液，滤纸拭干，用眼科小剪剪碎组织块，倒入匀浆器中进行匀浆管中，用量筒量取4.5mL，冷生理盐水，倒入匀浆器中进行匀浆；以400r／min的速度离心10min，取上清液进行指标涮定。

1.5 指标测定

皮肤及血液中SOD括性的测定采用黄嘌呤氧化醇法，皮肤组织的丙二醛含量采用硫代巴比妥酸法。SOD、MDA（批号：20091222）测定试剂盒，均购于河南医学生物工程研究所。

2 结果

2.1 调经祛斑片对紫外线照射致黑色素沉着模型小鼠皮肤中SOD活性的影响

紫外线照射后，照射皮肤组织SOD活性下降，模型组皮肤组织及血液中SOD含量下降与各用药组之间存在非常显著性差异与模型组相比。在皮肤及血液中，中药中剂量组SOD含量明显升高（P＜0.01），各给药组之间无显著性差异（P＞0.05），见表1。

表1 各组实验动物皮肤及血清中SOD活性的影响（x-土s)

2.2 各组实验动物皮肤及血液中MDA含量酌影响

模型组小鼠经紫外线照射后，血液及皮肤中MDA含量明显升高，模型组MDA含量的升高与各用药组之间存在显著性差异，与模型组相比。中药中剂量组SOD含量明显下降（P＜0.01），各给药组之间无显著性差异（P＞0.05）见表2。

表2 各组实验动物皮肤及血清中MDA含量的影响（±s）

表2 各组实验动物皮肤及血清中MDA含量的影响（±s）

注：与摸型组相比.*P＜0.05，**P＜0.01

组别 n 皮肤中MDA（nmol/mgprol） 血清中MDA（nmol/mL）空白组 12 41.01±5.40** 5.80±0.81**模型组 10 61.30±5.00 6.70±0.86中药低剂量组 9 52.29±4.42* 6.40±0.73*中药中剂量组 10 43.62±6.80** 5.90±0.90**中药高剂量组 10 52.91±4.50* 6.10±0.90*阳性对照组 12 42.94±6.40** 5.80±0.90**

3 讨论

祖国医学认为，黄褐斑是全身性疾病的一种局部反应，多与气血、脏腑功能失调有关。本组实验经过长期临床观察发现，该病以肝气郁结和气滞血瘀型的为多，故认为“无瘀不成斑”。所以调经祛斑片具有疏肝解郁、活血化瘀、祛斑养颜之功。

现代医学认为，弥漫性过度色素沉着，常伴内分泌失调，在垂体分泌促肾上腺皮质激素时，也分泌过量的黑色素细胞刺激素，因而皮肤黑色加深。色素过多的原因之一是由于皮肤黑色素产生过多，而酪氨酸酶在黑色素生物合成过程中起着极为重要的作用。酪氨酸酶是黑色素代谢中的关键酶，对酪氨酸酶活性调节可直接影响黑色素的合成。研究表明，调经祛斑片对酪氨酸酶活性有显著抑制作用，能降低“黄褐斑”大鼠皮肤、肝脏中酪氨酸含量，这可能是调经祛斑片治疗黄褐斑的药理学基础之一。

模型组小鼠皮肤组织及血液中SOD活性明显降低。MDA含量明显增加， 调经祛斑片低、中、高剂量组的皮肤及血液中SOD和MDA含量与正常组动物比较无显著性差异，与模型组比较，调经祛斑片低、中、高组的皮肤及血液中SOD活性明显增高且有显著差异，调经祛斑片低、中、高剂量组的皮肤组织中MDA含量则明显降低。调经祛斑片提取液对紫外线照射引起的小鼠黄褐斑病理模型具有明显的保护和治疗作用。

以上研究还表明，调经祛斑片毒性小，安全可靠，临床疗效肯定，值得进一步研究、开发利用、临床分析。

［1］ 扬智荣，张丽宏，黄昕红.加碱滋水清肝饮对皮肤SOD及脂褐质的调节作用[J].中国美容医学，2005，14（4）：485-487

［2］ 陈奇.中药药理实验方法学[M].北京：人民卫生出版社，2000.305