临床常见非发酵菌的耐药性分析

段 穷,李雪梅,王茂楠

(1.吉林省人民医院检验科细菌室,吉林 长春 130021;2.深圳市血液中心;3.吉林省人民医院 肛肠科）

非发酵菌指一大群不能利用葡萄糖或仅能以氧化形式利用葡萄糖的、专性需氧、无芽胞的革兰氏阴性杆菌。广泛分布于自然界、人体皮肤、医院等环境。主要包括假单胞菌属、不动杆菌属、黄杆菌属、产碱菌属等。大多为条件致病菌。随着近年来广谱抗菌素、免疫抑制剂、肿瘤化疗等药物的广泛应用,此类细菌从住院病人的痰、尿、血液、体液标本中的分离率日渐增高,已成为引起院内感染的重要致病菌[1]。尤其是铜绿假单胞菌(PAE）及鲍曼不动杆菌(ABA）,其多重耐药给临床治疗感染带来极大困难。为此,对我院2005年-2010年临床分离的铜绿假单胞菌及鲍曼不动杆菌的耐药性进行分析,为临床合理使用抗菌素提供依据。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 菌株来源 2005年-2010年吉林省人民医院临床分离的条件致病菌共7 063株,其中铜绿假单胞菌(PAE）1219株,占17.3%,占所有分离细菌的第二位,鲍曼不动杆菌(ABA）707株,占10%,占所有分离细菌的第四位。在分离出PAE和ABA标本中痰及咽拭子标本4 582份,占64.9%,脓液标本1 325份,占18.8%,血液标本586份,占8.3%,尿液标本200份,占2.8%,其它标本370份,占5.2%。

1.1.2 抗菌药物及培养基 哌拉西林/三唑巴坦(TZP）、头孢噻肟(CTX）、头孢他啶(CAZ）、头孢吡肟(FEP）、氨曲南(ATM）、头孢哌酮/舒巴坦(SCF）、亚胺培南(IMP）、美罗培南(MEM）、阿米卡星(AK）、环丙沙星(CIP）、复方新诺明(SXT）、米诺环素(MH）等药敏纸片、血琼脂平皿、巧克力色平皿、M-H药敏平皿均购自广洲迪景公司(均为OXOID公司产品）。

1.2 方法

1.2.1 细菌培养 痰标本用血琼脂平皿、巧克力色平皿、中国兰平皿、中国兰平皿做分离培养,其余标本用血琼脂平皿、中国兰平皿做分离培养,无菌体液标本另加脑心浸液肉汤做增菌培养。血琼脂平皿、巧克力色平皿、放在CO2孵箱中培养,中国兰平皿放在普通孵箱中培养。

1.2.2 鉴定及补充实验 用法国梅里埃公司的VITEK32的NFC及GNI+卡鉴定细菌到种,所有报鲍曼不动杆菌/醋酸钙不动杆菌复合菌的加做10%乳糖及42℃生长实验,如两实验均阳性,则为鲍曼不动杆菌[2]。

1.2.3 药敏实验 跟据美国CLSI2008版所规定的标准做药敏实验,质控菌株为大肠埃希菌ATCC25922、大肠杆菌ATCC35218及铜绿假单胞菌ATCC27853,为北京协和医院检验科徐英春主任赠送。

1.2.4 药敏分析 采用WHONET5.4版本进行数据分析。

2 结果

结果见表1及表2,可以看出,从2005年到2010年PAE及ABA的分离株数在逐年上升且耐药率也在上升,其中亚胺培南(IMP）及美罗培南(MEM）的耐药率上升最快。PAE对亚胺培南(IMP）2010年的耐药率达到30%左右,与其它地区差不多[3],对美罗培南(MEM）达到了27.5%,而阿米卡星(AK））耐药率还没到20%,头孢他啶(CAZ）的耐药率为24%,环丙沙星(CIP）耐药率为24%,也还可以,但头孢噻肟(CTX）,氨曲南(ATM）,复方新诺明(SXT）的耐药率都很高。对ABA来说,最敏感的是头孢哌酮/舒巴坦(SCF）,其次为亚胺培南(IPM）,美罗培南(MEM）,米诺环素(MH）。而对头孢噻肟(CTX）,头孢他啶(CAZ）,头孢吡肟(FEP）、氨曲南(ATM）等三、四代头孢及单环β-内酰胺类抗菌素的耐药率很高。

3 讨论

铜绿假单胞菌是临床常见的重要的条件致病菌,因其具有天然的和后天获得的耐药性,可对多种抗菌素耐药,近年来随着碳青霉烯类抗菌素的广泛应用,铜绿假单胞菌对碳青霉烯类抗菌素特别是亚胺培南的耐药率大幅上升[4]。我院临床分离的铜绿假单胞菌对亚胺培南的耐药率从2005年的4.6%上升到2010年的29.5%。

表1 2005年-2010年铜绿假单胞菌(PAE）的耐药率(%）

表2 2005年-2010年鲍曼不动杆菌(ABA）的耐药率

鲍曼不动杆菌是院内感染的重要病原体之一,近年来,许多医院鲍曼不动杆菌的分离率在逐年上升,仅次于假单胞菌和大肠埃希菌。同时,多重耐药的鲍曼不动杆菌已成为医院感染的重要病原菌。在其复杂耐药机制中,产β内酰胺酶是其主要耐药机制。鲍曼不动杆菌不仅产超广谱β内酰胺酶、AmpC酶,还有产碳青霉烯酶的鲍曼不动杆菌[5]。我院近年来多次出现多重耐药甚至全耐药株,给临床治疗带来很大困难。据Pfaller[6]等报道,2000年美国15所医学中心的资料显示,不动杆菌对碳青霉烯类抗菌素耐药率为19%-22%。因舒巴坦与大多数β-内酰胺类不同,它直接作用于细菌的PBP2(作用靶位不同）,显示对不动杆菌独特的杀菌能力[7],同时它还抑制多种β-内酰胺酶,这些可能是含舒巴坦的抗菌素对不动杆菌仍有较好活性的原因之一,在我院亚胺培南对鲍曼不动杆菌的敏感率仅次于头孢哌酮/舒巴坦而居第二位。

[1]杨 青,徐小微,俞云松,等.碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌流行病学及碳青霉烯酶类型的研究[J].中华检验医学杂志,2003,26(6）:342.

[2]朱德妹,汪 复,张婴元.2005年上海地区细菌耐药性监测[J].中国感染与化疗杂志,2006,6:371.

[3]汪复执笔,2006年中国CHINET细菌耐药性监测[J].中国感染与化疗杂志,2008,8(1）:1.

[4]杨 莉,韩立中,孙景勇,等.仅黏菌素敏感的多重耐药铜绿假单胞菌分子流行病学研究[J].上海交通大学学报(医学版）,2006,26(11）:1298.

[5]Pfaller MA,Jones RN,Biedendach DJ,et al.Antimicrobial resistance trends in medical center using carbapenems:report of 1999 and 2000 results from the MYSTIC program(USA）[J].Diagn Microbiol Infect Dis,2001,41(4）:177.

[6]Wisplinghoff H,Edmond MB,Pfaller MA,et al.Nosocomial bloodstream infections caused by Acinetobacterspecies in United States hospitals:clinical features,molecular epidemiology,and antimicrobial susceptibility[J].Clin Infect Dis,2000,31(3）:690.

[7]张婴元,张敬德,周 乐,等.头孢哌酮-舒巴坦体外抗菌作用研究[J].中华内科杂志,1995,34(10）:676.