两种检测胆红素的指标评价黄疸疗效的比较

韩升波

干化学和湿化学是临床常用的两种检测生物化学参数的机器，在这里我们主要探讨强生VITROS 350和OLIMPUS AU640两种机器关于胆红素的检测对于临床评价病理性黄疸的过程及疗效的作用大小。

1 机器与方法

1.1 机器与试剂强生VITROS 350，试剂为强生干化学胆红素干片，检测总胆红素方法为重氮法，检测结合和非结合胆红素用的是胆红素组分-分光光度法(以HPLC方法参考方法)，质控为强生专用质控。OLIMPUS AU640，试剂为日本合光纯药工业株式会社生产的胆红素试剂，总胆红素和直接胆红素都是用重氮法检测，间接胆红素为计算所得，质控用的是伯乐质控。

1.2 标本来源收集病房不同疾病高胆红素患者90例(阻塞性黄疸患者30例、溶血性黄疸患者30例，肝病性黄疸30例)，治疗前和治疗后各检测一次。都选取早晨空腹静脉抽血3～5 ml，15 min之内离心分取血清。标本无脂血和溶血，-80°C冰冻保存集中测定。

1.3 实验方法测定过程及参数设置均按照说明书执行，严格按照SOP文件操作。全部数据用统计软件分析，做治疗后和治疗前两种机器检测数据对比。

2 实验过程及结果

2.1 两台机器线性范围评价分别用定值的低浓度血清Ⅰ和高浓度血清Ⅱ，相互稀释(比如3Ⅰ+1Ⅱ，2Ⅰ+2Ⅱ，1Ⅰ+3Ⅱ)成五个不同浓度梯度，以TBIL为例测试五个值，以理论值为X轴，以测试值为Y轴，统计分析得VITROS 350机器，r2=0.9994斜率为0.9885;OLIMPUS AU640机器，r2=0.9956斜率为1.0101;评价标准为相关系数r2＞0.95，斜率在0.97-1.03范围内。两台机器r2和斜率都在要求内。

2.2 方法学对比用两台机器相同条件下分别检测180例(治疗前90例和治疗后90例)标本。用OLIMPUS AU640检测的是总胆红素(TBIL)、间接胆红素(IBIL)、直接胆红素(DBIL);用VITROS 350检测的时总胆红素、BU、BC;BU对应间接胆红素，BC对应直接胆红素。选取40个标本，10个高值、20个中间值、10个低值，以VITROS 350检测的值为X轴，以OLIMPUS AU640检测的值为Y轴进行方法学对比分析得到:总胆红素为r2=0.9854＞0.95、偏移值小于CLIA'88允许误差的1/2;间接胆红素和BU之间r2=0.8543＜0.95、偏移值大于CLIA'88允许误差的1/2，同一标本两者有差异;直接胆红素和BC之间r2=0.7532＜0.95、偏移值大于CLIA'88允许误差的1/2，同一标本两者差异较大。

2.3 阻塞性黄疸患者治疗后TBIL、IBIL、DBIL都比治疗前下降，BU、BC也下降，但100%BC比DBIL下降更加显著。溶血性黄疸患者治疗后TBIL、IBIL、DBIL比治疗前下降，但90%BU、70%BC下降都比IBIL、DBIL下降更加明显;肝病性黄疸患者治疗后TBIL、IBIL、DBIL比治疗前下降，但52%BU、60%BC下降也略比IBIL、DBIL下降明显。

3 讨论

在OLIMPUS AU640检测胆红素时用的时重氮法，检测的总胆红素中包含的组分有结合胆红素，未结合胆红素和δ-胆红素，在检测时，重氮试剂直接与结合胆红素和δ-胆红素反应，但不能直接测定未结合胆红素(Bu)浓度[1]。对于这些重氮化学法，一旦知道总胆红素和直接胆红素的测定值，便可计算出未结合胆红素(Bu)值(间接胆红素=总胆红素-直接胆红素)。此方法虽然是一种可行的替代测定方法，但必须认识到确定两种被测组分时的偏差和误差，可能导致计算出的间接胆红素出现较大的误差[2]。

使用VITROS350干化学分析仪，可直接测定总胆红素(TBIL)、间接胆红素(Bu)和直接胆红素(Bc)浓度。并且在测定BC时仅仅只是结合胆红素，不测定δ-胆红素(OLIMPUS AU640检测直接胆红素时包括结合胆红素和δ-胆红素)。由于在VITROS化学分析仪上直接测定未结合胆红素(Bu)，从而在使用VITROS结合未结合胆红素(BuBc)干片确定未结合胆红素(Bu)浓度时可以使分析误差更低。所以在用干化学检测的BU比湿化学检测的IBIL在病理性黄疸时更加准确。

δ-胆红素(δ-BIL)，它是一种白蛋白和胆红素间非酶促反应形成的共价结合物。δ胆红素的反应性与结合胆红素相似，在血中含量极低。一旦进入血液循环，它会慢慢地与白蛋白结合而成为δ胆红素[3]。δ胆红素在血清中的存在时间与白蛋白的半衰期相关，为2～3周。在BC的检测中，由于BC在正常人体内从肝脏到肠道，随肠道排出体外，所以正常人体内几乎没有BC，而在阻塞性黄疸的时候由于肠道阻塞，导致大量BC回流入血，引起BC升高，直接胆红素(DBIL)也升高。但是经过治疗阻塞疏通之后，BC随肠道排出，立刻就下降，对于疾病疗效的反映比DBIL灵敏。溶血性黄疸时由于体内未结合胆红素的大量增加，导致结合胆红素和δ-胆红素轻度升高，而肝病性黄疸时，由于肝细胞病变引起的未结合和结合胆红素及δ-胆红素都增加，治疗后由于干化学和湿化学测试项目实际物质的不同，就导致干化学评价的更好。

以上结果及分析表明，在实际工作中，对于病理性黄疸的检测，采用干化学的BU，BC检测来评价病情要比采用湿生化的IBIL、DBIL检测来评价要更加准确，灵敏。

[1]周新，涂植光.临床生物化学和生物化学检验.第3版.北京:人民卫生出版社，2003.

[2]姚勇.强生干化学分析仪定标的使用经验.中外健康文摘·医药月刊，2007，8.

[3]杨志娜，田卫东，李安均，等.Olmpus AU640全自动生化分析的维护与保养.中国疗养医学，2010，19(3):264-265.