宫颈上皮内瘤变及宫颈癌与人乳头瘤病毒感染的关系探讨

任守凤

宫颈癌是最常见的妇科恶性肿瘤之一，在女性恶性肿瘤中发病率仅次于乳腺癌，全球每年新发人数约四十七万，死亡人数约二十三万［1］。目前我国的宫颈癌发病呈总体下降但年轻患者增加的趋势。分子流行病学研究已经证实：人乳头瘤病毒(HPV)的感染与宫颈癌有着十分密切的关系。宫颈癌的筛查可以降低宫颈癌发生的危险，却不能阻止HPV的感染。宫颈癌发病率高居女性恶性肿瘤榜首，人乳头状瘤病毒(HPV)感染在宫颈癌发生及发展过程中起重要作用，与宫颈癌的发生有极为显著的关连，90%以上宫颈癌伴有高危型HPV感染，高危型人乳头瘤病毒持续感染是宫颈癌前病变和宫颈癌的重要发病诱因，HPV的感染发生先于宫颈癌，它是宫颈癌前病变和宫颈癌发生的必要生物学条件［2］。因此，本文采用杂交捕获Ⅱ代方法，定量检测宫颈上皮内瘤变及宫颈癌HPV DNA的负荷量，进一步探讨HPV感染与宫颈癌前病变及宫颈癌的相关性，对于宫颈癌的预防及治疗都有重要意义。

1 资料与方法

1.1 一般资料 以2007年6月至2009年5月于本院就诊的宫颈病变患者390例为研究对象，其中正常宫颈组织69例;宫颈上皮内瘤病变215例，其中CINⅠ69例，CINⅡ72例，CINⅢ74例;宫颈癌106例。

所选研究对象年龄均在25岁以上(25～65岁，平均年龄32.6岁)、有三年以上性生活史、无妇科病变手术史、无放化疗病史。

1.2 方法 采用杂交捕获Ⅱ代(hybrid captureII，HC2)方法，行高危型HPV DNA检测，对HPV阳性者行阴道镜下活检，最终以组织病理学诊断为金标准。

1.2.1 HPVDNA检测标本采集 ①采集标本前24 h内禁止性生活、阴道检查、阴道灌洗及用药，无阴道冲洗及阴道上药。②用特制取材毛刷插人宫颈口内1～1.5 cm处，顺时针或逆时针旋转5圈，停留20 s采集宫颈脱落细胞。③将毛刷上的标本洗脱于有保存液的采集管中。

1.2.2 杂交捕获实验检测方法 采用Digene公司提供的杂交捕获Ⅱ代(HC2)HPV DNA检测系统进行检测，试剂采用Digene公司提供的高危型HPV DNA试剂盒，检测探针包括13 种 HPV DNA 亚型，即 16，18，31，33，35，39，45，51，56，58，59，68 型。

1.2.3 阴道镜下活检查 对阴道镜下有白色病变、镶嵌、腺体开口、异型血管等可疑病变部位进行定点活检，对镜下正常者行常规移行带区3，6，9，12四点活检，活检组织送病理。

1.2.4 结果判定 在DML2000系统上判读，HPV DNA含量超过1 pg/ml即RLU/CO比值大于1为阳性，HPVDNA阳性病例与所检病例的百分比;按HPV DNA含量分成5组，分别为：HPV ＜ 1、1≤HPV≤100、101≤HPV ≤500、501≤HPV ≤1 000、HPV ＞1 000［3］。

1.2.5 统计学方法 采用SPSS 14.0软件进行统计学处理，各组间的比较采用χ2分析，P＜0.05差异有统计学意义。

2 结果

2.1 高危型HPV DNA在宫颈各实验组中的检出率 在宫颈正常组中的检出率为31.83%，在CIN组中的检出率为67.90%，在宫颈鳞癌组中的检出率为97.17%。可见，高危型HPV检出率随着宫颈病变程度的加重而逐渐升高，三组间比较有统计学意义(P＜0.001)，详见表1。

2.2 高危型HPV DNA在CIN各组的检出率在CIN I组为46.78%，CINⅡ组为59.32%，CINⅢ组为96.01%。可见，高危型HPV DNA检出率随着CIN级别增高而增高，三组间比较有统计学意义(P＜0.001)，详见表2。

表1 高危型HPV DNA在各组中的检出率

表2 高危型HPV DNA在CIN各组中的检出率

根据研究结果显示：高危型HPV DNA在宫颈正常组、CIN组、宫颈癌三组间的检出率比较有高度统计学意义(P＜0.001);高危型HPV DNA在CINI组、CINⅡ组、CINⅢ组三组间检出率比较也有高度统计学意义(P＜0.001)。

3 讨论

宫颈癌(Cervical cancer)是发生于子宫颈鳞状上皮或腺上皮的一种癌。尽管宫颈癌的发生是多因素共同作用的结果，然而它的病因主要与高危型HPV感染有关。近40年由于宫颈细胞学筛查的普遍应用，使宫颈癌和癌前病变得以早期发现和治疗，宫颈癌的发病率和死亡率已有明显下降［4］。

HPV感染对于宫颈癌进展来说是一个必要但不是充分的前提条件。灵敏的HPV核酸检测对于肿瘤进展的评估是非常有价值的。细胞涂片为ASC-US女性中，如果HPV核酸检测为阴性，肿瘤进展的危险性则非常低。一般而言，这类女性应半年或更短的间隔重复进行宫颈细胞学检查。持续的HPV感染是CIN2以及CIN3进展的分子标记。与其他HPV型别相比，HPV16感染持续更长的时间，连续5年的持续感染对于CIN3形成来说具有40%的风险。曾经认为较早开始性生活史以及多性伴史等是CIN2或CIN3以及宫颈癌进展的高危因素，现在则必须把这一概念转变成：持续的高危型HPV感染是最重要的危险因子。CIN3即是肿瘤的起始点。CIN2可以代表带有HPV感染的严重的细胞学变化，这里的HPV感染可以最终消退，也可以持续以形成疾病进展。CIN3女性人群中的中值年龄为27～30岁，20～25岁以下女性具有较快的CIN2以及CIN3的进展，经常是HPV新发感染后几个月就可以形成。宫颈筛查中检出的浸润癌女性的年龄比CIN2女性高出10年或更多［5］。

2006年和2007年默沙东以及葛兰素史克的HPV预防性疫苗先后上市，开启了人类主动预防常见肿瘤的时代。但同时HPV预防性疫苗的安全性问题一直受到广泛的关注。应该指出，即使将来我们可以使用HPV的预防性疫苗和治疗性疫苗，疫苗免疫策略无法替代宫颈癌的早期筛查措施［5］。本文提示HPV阳性患者，宫颈上皮内瘤变患病率明显高于普通人群，故对于高危型HPV感染者，应定期随访，并尽量行阴道镜检查［6］。

［1］Andrawiss M1．Cervical cancer vaccines available in 2007.1 drug DiscovToday，2005，10(14) ：9492-9501．

［2］Papillo JI，Zarka MA，St John TL.Evaluation of the thinPrepPap test in clinical practice：A seven month 163142 case experience in northern Vermont.，Acia Cytol，1998，42(1)：203-208．

［3］黄志宏，等.人乳头状瘤病毒负荷量与宫颈癌及宫颈癌前病变的相关研究．中国妇幼保健，2006，21(11)：1557-1559．

［4］乐杰．宫颈癌．妇产科学.第7版．北京：人民卫生出版社，2008，1：263．

［5］廖秦平，刘朝晖，等．宫颈人乳头瘤病毒感染及相关疾病的诊治．中国宫颈感染性疾病诊治策略，2009，2：17-19．

［6］龙再秋，贾海清，等.高危性人乳头瘤病毒阳性临床意义探讨.中国实用妇科与产科杂志，2009，25(11)：868．