血清表皮生长因子检测在类风湿关节炎患者中的临床研究

张斌国 栾清欣

类风湿关节炎(rheumatoid arthritis，RA)是常见的自身免疫性疾病之一，可累及多器官系统，主要侵犯关节滑膜，表现为滑膜组织的异常增生，大量炎性细胞浸润及软骨与骨的进行性破坏。研究表明表皮生长因子(epidermal growth factor，EGF)具有刺激多种组织和细胞分裂、增殖和分化的作用［1］。多种细胞因子参与了RA的发病与演变，Koichiro等［2］报告RA患者滑膜液中EGF升高。本实验通过检测RA患者与正常人血清中EGF水平的变化，探讨EGF在诊断RA中的意义及其在RA发病过程中可能起到的作用。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择2010年1月至6月在我院住院的初治RA患者36例，所有患者均符合1987年美国风湿病学会(ACR)修订的RA分类标准、既往未服用过激素或改善病情药物。其中男5例，女31例。年龄24～59岁，平均(49.49±8.01)岁。依照患者双手X线的检查结果将RA患者分为单纯骨质疏松组(Ⅰ～Ⅱ级)和骨质破坏组(Ⅲ～Ⅳ级):单纯骨质疏松组平均病程为(5.86±1.35)个月;骨质破坏组平均病程为(10.67±3.58)个月。20例正常健康对照者均来自我院体检中心健康体检者，其中男4例，女16例。年龄20～64岁，平均(51.46±13.24)岁。各组在年龄、性别等方面均无统计学差异。

1.2 方法 抽取清晨空腹静脉血3 ml，离心后取上清液，置于PC管中-20℃保存，同批次检测。血清EGF水平测定采用双抗体夹心ELISA法，试剂盒由美国Rapid Bio Lab公司提供，严格按照试剂盒说明书的程序进行操作。全自动酶免分析仪(瑞士Hamilton公司 MicroLab STAR IVD ELISA型-8通道)450 nm处测OD值，绘制标准曲线，计算EGF浓度值。分别采用免疫比浊法、琼脂扩散法、魏氏法检测类风湿因子(RF)，C反应蛋白(CRP)，红细胞沉降率(ESR)。异常值判定均参考同期该项检查的正常值。并收集整理患者其他临床资料做对比。

2 结果

2.1 两组血清EGF水平的比较(见表1) RA患者血清EGF水平显著高于正常对照组，差异有统计学意义(P＜0.05)。

表1 RA患者与正常对照组血清EGF水平(±s)

表1 RA患者与正常对照组血清EGF水平(±s)

组别 例数 EGF(pg/ml)20 52.58±2.6036 110.15±9.12对照组RA组

2.2 RA患者单纯骨质疏松组与骨质破坏组血清EGF水平的比较(见表2)骨质破坏组血清EGF水平显著高于单纯骨质疏松组，差异有统计学意义(P＜0.05)。

表2 RA患者单纯骨质疏松组与骨质破坏组血清EGF水平

2.3 RA患者血清EGF水平与临床类风湿活动指标之间的相关性 血清EGF水平与RF、ESR及CRP之间无明显相关性(r=0.06，P ＞0.05;r=0.25，P ＞0.05;r=0.26，P ＞0.05)。

3 讨论

类风湿性关节炎(Rheumatoid arthritis，简写RA)又称类风湿，是一种常见病、多发病，目前公认是一种自身免疫性疾病。可能与内分泌、营养、地理、职业、心理和社会环境的差异、细菌和病毒感染及遗传因素等方面有关系。各种细胞因子和趋化因子在RA的发病过程中发挥着重要作用。

目前对于RA的研究主要集中于滑膜细胞的类肿瘤性研究。人们注意到RA滑膜中存在过量的细胞因子、受体和与其有同源性的癌基因产物，它们可能作用于滑膜细胞信号传导途径的不同部位，导致持续的信号传导，从而引起RA滑膜细胞的无限制增生［3］。该病好发于手、腕、足等小关节，以手的近端指间关节、腕关节、足的庶趾关节最为常见，反复发作，呈对称分布。早期有关节红肿热痛和功能障碍，晚期关节可出现不同程度的僵硬畸形，并伴有骨和骨骼肌的萎缩，极易致残。从病理改变的角度来看，类风湿性关节种主要累及关节滑膜(以后可波及到关节软骨、骨组织、关节韧带和肌键)，其次为浆膜、心、肺及眼等结缔组织的广泛性炎症性疾病。

表皮生长因子(EGF)由53个氨基酸组成，相对分子质量为6054u，是1959年在神经生长因子研究过程偶然被发现的。它具广泛生物学效应，是强有力的促细胞分裂因子，能加速蛋白质、DNA和RNA的合成，能刺激体内或体外培养的多种组织和细胞的分裂、增生、分化［1］。因其具有强有力的促细胞分裂、增殖及分化作用，近年成为肿瘤及创伤愈合等研究的热点。由于类风湿关节炎病理表现为滑膜组织的异常增生，所以近年来，其与类风湿关节炎发病关系的研究逐渐受到关注［4］。有研究报道RA的关节液及滑膜组织中EGF的含量高于骨关节炎(osteoarthritis，OA)［5］。Farahat等研究 EGF与其他的细胞因子的关系，表明RA患者滑膜组织中IL-1α、IL-1β、IL-δ、TNF-α、GM-CSF 与 EGF 的表达均高于 OA。说明EGF与上述细胞因子同时参与了RA的病理过程。目前国内外对采用免疫组化方法检测RA滑膜及滑液中EGF表达的研究报道较多［6，7］，对血清中EGF的水平变化与RA发病机制关系的研究较少。

本研究表明健康人血清中EGF表达较少，而RA患者血清中的EGF水平则显著升高。骨质破坏组的EGF水平明显高于单纯骨质疏松组，故推测EGF可能参与了RA的发病过程，并且一定程度上提示EGF在RA的关节破坏中发挥着重要作用。血清EGF的水平与患者的RF，ESR，CRP等临床类风湿活动指标没有明显相关性，表明EGF与疾病的活动性无关。本研究提示EGF在诊断RA患者中有一定的临床价值，可能部分地参与RA的关节骨质破坏过程。然而EGF所致的关节骨质破坏的机制还不清楚，还有待于进一步研究。可以作为RA诊断手段的有益补充，因此具有广泛的临床应用和研究前景。

［1］宋丹，方秀.表皮生长因子的研究进展.解剖科学进展，2002，8(4):390-342.

［2］Koichiro S，Shinichi K，Masayuki S，et al.Involvement of ErbB22 in rheumatoid synovial cell growth.Arthritis Rheum，2001，44(2):260-271.

［3］燕太强，吕厚山，药立波.类风湿关节炎滑膜细胞酪氨酸激酶信号传导系统.中华风湿病学杂志，1999，3(2):121-123.

［4］Lui KE，Panchal AS，Santhanagopal A，et al.Epidermal growth factor stimulates proton efflux from chondrocytic cells.J Cell Physiol，2002，192(1):102-112.

［5］Farahat MN，Yanni G，Poston R，et al.Cytokine expression in synovial membranes of patients with rheumatoid arthritis and osteoarthritis.Ann Rheum Dis，1993，52:870-875.

［6］林星，郑斌生，林玲，等.类风湿关节炎表皮生长因子及β2微球蛋白的测定.现代诊断与治疗，2004，15(6):327-328.

［7］燕太强，吕厚山，药立波，等.表皮生长因子对类风湿关节炎滑膜细胞的作用.中华风湿病学杂志，2000，4(5):270-273.