精子顶体酶活性定量检测与男性不育病例分析

董树林 曲文玉 王立名 王蔓 何家梅

20世纪90年代初开始了对精子顶体酶与男性不育关系的研究，认为顶体酶与精子能否穿越卵细胞透明带有关，顶体酶含量低则精子穿过卵细胞透明带的能力下降，因而影响受孕、IUI和IVF的成功率。但是一直以来，精液常规分析(CASA)都是被用来作为男性生育能力的主要指标。虽然过去有许多研究表明，精液中精子数量及活动精子的百分率与自然妊娠率在统计学上有显著的相关性，但临床上大约有三分之一男性不育患者的精液常规分析结果正常或接近正常。因此仅仅依靠精液常规分析(CASA)的结果来预测男性生育状况是比较片面的。正常受孕过程是精子在女性生殖道运动到输卵管的壶腹部与卵子相遇，识别并诱发顶体反应，精子与卵子融合形成早期胚胎，最后是受精卵的种植，在受精过程中每个环节出现异常都会导致不育。而精液常规检查(CASA)最主要指标为精子浓度和精子运动能力。所以，对男性不育患者检查要慎重，特别是不育时间超过1年的男性人群，除了检查精液常规(CASA)外，还应做精子功能检测试验。如:精子顶体酶活性定量，钙离子诱发顶体反应，精子-透明质结合实验，精子DNA碎片，精子核蛋白染色等。本文通过对精子顶体酶活性定量实验与临床男性不育病例分析，就精子顶体酶活性定量异常与男性不育的关系进行探讨。

1 资料与方法

1.1 标本来源统计我院男科门诊2011年7月至9月间395例男性不育患者(不育时间均1年以上)进行精子顶体酶活性定量检测。

1.2 实验原理与结果标准精子顶体内存在精氨酸酰胺酶，其活性可反应顶体酶全部活性，精氨酸酰胺酶以N-9-苯甲酸-DL-精氨酸-P-硝酰基苯胺为底物，分解产生有色产物-硝酰基苯胺，通过测定该产物量可推算出精氨酸酰胺酶的活性，试剂盒为深圳华康生物医学工程有限公司生产的精子顶体酶活性定量检测试剂盒。按照WHO推荐的改良Kennedy法，准确检测人精子中精子顶体酶活性，更真实的应用于精子顶体酶活性的评价。精子顶体酶活性定量标准:参考值48.2uIU-218.7uIU/106精子。

顶体酶存在于精子顶体内膜及赤道膜上，它是受精过程中的蛋白水解酶，通常以活性形式存在，当精子头部进入卵透明带时，顶体酶原被活化为顶体酶，水解卵透明带使精子穿过卵透明带最终与卵子融合。

2 结果

所选395例病例均为夫妇不孕不育1年以上的男性，且无精液液化异常，精子浓度大于10×106/ml以上。精子浓度、活动率及精子顶体酶活性定量检测统计列表1如下:

表1 部分精液常规与顶体酶活性相关性统计

3 讨论

通过病例统计不难发现常规精液检查(CASA)的精子浓度、活动率及活力正常，精子顶体酶活性定量异常比率3.8%[1]，也就是说只通过精液常规检查(CASA)，顶体酶活性定量检测一项漏诊比率3.8%。精子浓度大于10×106/ml，活动率及活力正常顶体酶活性定量异常为4.8%;值得注意的是精子浓度大于10×106/ml，精子活动率或活力异常，即少弱精子症患者顶体酶活性定量异常率占21.0%[2]。因此，提示男科医生除精液常规检查(CASA)外，不可忽视精子顶体酶活性定量检测等其他精子功能检查。

顶体酶活性可反应精子质量的一个方面，顶体酶活性的不足可导致不育，临床精子存活率低，死精子症以及严重生殖系统感染。特别是解脲支原体严重感染可造成精子顶体酶活性降低。此外，更具有意义的是通过常规精液检查(CASA)正常，难以鉴别不孕不育原因者，存在顶体酶活性低的情况。顶体酶活性定量是判断男性精子功能和生育力强弱的重要评价指标之一，通过检测也为辅助生殖(IUI、IVF和ICSI)治疗方案的实施提供更可靠的依据。

[1]黄宇烽，许瑞吉.男科诊断学.第二军医大学出版社，1999:158-163.

[2]熊承良，吴明章，周继红，等.主编.人类精子学.湖北科学技术出版社，2002:427-428.