止嗽立效丸的抗炎及调节免疫作用的实验研究

2011-08-08陈魁敏沈春红余秋颖

中国医药指南 2011年30期

关键词：足趾抗炎阿司匹林

陈魁敏沈春红郝伟余秋颖*

（1 沈阳医学院机能实验室，辽宁沈阳 110034；2 沈阳医学院沈洲医院，辽宁沈阳 110002）

止嗽立效丸是由麻黄、石膏、葶苈子、苦杏仁、甘草、婴粟壳所组成的中药复方制剂，具有止咳平喘、抗炎、提高机体免疫力的作用，临床应用疗效可靠。现将其抗炎、调节免疫力的实验报道如下。

1 实验材料

1.1 材料

止嗽立效丸由赤峰天奇制药有限公司提供，批号080713；消咳喘由哈尔滨松花江制药厂生产，批号061213；阿司匹林山东兴华制药厂生产；角叉菜胶由沈阳药科大学购入。

1.2 动物

昆明种小鼠，体质量l8～24g，Wistar大鼠，体质量150～200g，雌雄兼用，均由沈阳医学院实验动物研究中心提供。

2 方法与结果

2.1 小鼠二甲苯耳肿胀法

取小鼠50只，随机分成5组：生理盐水对照组，阿司匹林6g/kg和止嗽立效丸1.5、3.0、6.0g/kg组，空白对照组。止嗽立效丸组每天灌胃给药1次，连续2d。阿司匹林第2天灌胃给药1次，于第2天给药1h，右耳两面滴二甲苯0.05mL/只，致炎30min后颈椎脱白致死，用直径6mm打孔器取左右两面耳同一部位圆耳片，用分析天平称重，以两耳片重量之差为肿胀度进行t检验。结果：止嗽立效丸6g/kg组和阿司匹林6g/kg组对小鼠耳肿胀有抑制作用。结果见表1。

表1 止嗽立效丸对小鼠耳肿胀度的影响[n＝10，（±s）]

注：与对照组比较※P＜0.05，※※P＜0.01

组别剂量（g/kg）耳肿胀度（mg）等量生理盐水 9.18±1.28止嗽立效丸 1.5 9.43±2.19止嗽立效丸 3.0 8.56±1.32止嗽立效丸 6.0 6.34±2.33※阿司匹林 6.0 5.31±2.03※※

2.2 大鼠角叉菜胶致炎作用

取体质量200g左右大鼠40只，雌雄兼用，随机分为盐水对照组，阿司匹林已知药对照组，止嗽立效丸1.5、3.0、6.0g/kg剂量组。每组8只大鼠，禁食不禁水12h后，分别ig给予不同药物，给药后30min分别在大鼠右后肢足趾皮下注射1%角叉菜胶0.1mL/只致炎[1]。用玻璃容积法及足趾容积测量器测量各鼠致炎前和致炎后lh、2h、4h、6h的足趾容积，并计算出足趾肿胀度（致炎前后容积之差）。结果见表2。

表2 角又菜胶对大鼠足趾肿胀度的影响[n=8，（±s）]

注：与对照组比较※P＜0.05，※※P＜0.01

足趾肿胀度（mL）1h 2h 4h 6h等量生理盐水 16.7±6.71 18.8±2.55 19.3±0.84 18.3±2.34止嗽立效丸 1.5 13.2±40.7 16.5±6.06 16.3±8.97 15.4±2.23止嗽立效丸 3.0 14.8±2.15 13.1±10.0 13.6±7.42※ 12.2±5.67※止嗽立效丸 6.0 11.2±3.78※ 9.8±5.70※※ 13.2±6.73※ 12.1±3.348※※阿司匹林 6.0 9.50±5.89※ 9.90±4.64※※ 12.8±5.17※※ 10.6±5.96※※组别剂量(g/kg)

2.3 对小鼠中性粒细胞吞噬活性的影响

取健康小鼠50只，雌雄兼用，体质量18～42g，分组及给药量见表3，各组小鼠连续ig给予各不同药物7d，于第7天末次给药1h后眼眶取血备用，另于一清洁玻璃上滴肝素抗凝剂2滴及NBT染液2滴，37C孵育15min再于室温下放置15min，并轻轻混匀，在己制备好的载玻片上推成薄血涂片，干燥后用甲醇固定，Wright-Giensa染色，镜检，计数100个白细胞中有还原NBT呈紫色沉淀物的白细胞数。结果可见，止嗽立效丸对小鼠中性粒细胞的吞噬指数无明显影响，即止嗽立效丸具有无影响机体非特异性免疫功能的作用。结果见表3。

2.4 溶血空斑实验（PFC法）[1]

取小鼠50只，体质量18～22g，雌雄兼用，分组及给药剂量见表4，连卖ig给予不同药物7d，于给药第3天时间10%RSBC致敏小鼠0.2mL/只（含4×108个SRBC）ip，免疫4d后，处死小鼠，分离脾脏，剪碎，加入Hanks液2mL，混匀，过滤，1500r/min，离心10min，去上清液，Hanks液洗3次，将细胞沉淀悬于4.8mL Hanks液中，取0.2mL指示细胞悬液（SRBC+补体）+0.2mL（125×）脾细胞灌注小室用（l00µL/室），密封，37C培养30min，计数空斑，抗体产生细胞数=[脾细胞悬液总mL数（50mL）/注入小室脾细胞（mL）]×标本PFC数，实验结果与对照组比较进行统计学检查，结果可见，止嗽立效丸可使溶血空斑生成减少，具有降低体液免疫功能。结果见表4。