产ESBLs大肠埃希菌耐药性与抗菌药物使用量的相关性分析

刘玲玲（江苏连云港市第二人民医院，连云港市 222023）

大肠埃希菌是造成医院感染的主要致病菌，近几年来，该细菌对广谱抗菌药物耐药率明显增加，其中重要原因是产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）菌株增加。ESBLs可导致细菌对多种抗菌药物耐药，甚至是多重耐药，造成临床治疗上的困难以及经济费用加重。据文献报道[1]，抗菌药物使用的种类和数量多少与细菌耐药性密切相关。因此，笔者对我院2004－2010年产ESBLs大肠埃希菌年耐药率的变化与6种抗菌药物的年用量之间的相关性进行研究，以期为临床正确选择与合理使用抗菌药物提供依据。

1 材料与方法

1.1 菌株

2004－2010年我院临床分离的产ESBLs大肠埃希菌采用API细菌鉴定系统鉴定，质控菌为大肠埃希菌ATCC25922。

1.2 抗菌药物纸片

抗菌药物纸片E试验条均为英国Oxoid公司产品。

1.3 药敏试验

采用纸片扩散法（K-B法），试验结果按美国临床实验室标准化协会（CLSI）2007年标准解释[2]，按CLSI2005年版推荐的ESBLs纸片筛选法和酶抑制剂增强纸片确证法标准测定大肠埃希菌中产ESBLs株。

1.4 抗菌药物用量

用Excel2003统计阿米卡星、氨曲南、哌拉西林/他唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦、头孢他啶、亚胺培南/西司他丁6种药物2004－2010年每年的DDDs，并与细菌耐药率进行相关性分析。

1.5 数据处理

1.5.1 耐药率：采用世界卫生组织细菌耐药性监测网提供的WHONET5.4软件分别统计每年各药的产ESBLs大肠埃希菌耐药率。

1.5.2 限定日剂量（DDD）值：根据世界卫生组织药物经济学合作中心编制的《药品的解剖学、治疗学、化学分类索引及规定日剂量》（2003年版）和2010年版《中国药典·临床用药须知》（化学药和生物制品卷）。

1.5.3 用药频度（DDDs）：DDDs＝某药品年销量/该药品DDD。DDDs值越大，反映该药的选择倾向性越大，用量越大。

1.6 统计学处理

以各年细菌耐药率与用药频度为2个不同的变量，用SPSS 13.0统计软件Spearman测定法进行相关性分析。

2 结果

2.1 抗菌药物的使用情况

7年来6种抗菌药物的DDDs均呈上升趋势，其中2010年DDDs的上升幅度大小依次为哌拉西林/他唑巴坦＞头孢哌酮/舒巴坦＞亚胺培南/西司他丁＞头孢他啶＞氨曲南，而阿米卡星呈下降趋势，详见表1。

表1 2004－2010年6种抗菌药物的DDDs（千日）统计Tab 1 DDDs of 6 kinds of antibacterial drugs from 2004 to 2010（1 000 days）

2.2 产ESBLs大肠埃希菌耐药率的变化

6种抗菌药物产ESBLs大肠埃希菌耐药率从2004年到2010年均有所下降，但亚胺培南/西司他丁下降不明显，详见表2。

表2 2004－2010年产ESBLs大肠埃希菌耐药率变化（%%）Tab 2 Drug resistance of ESBLs producing E.coli from 2004 to 2010（%%）

2.3 4种抗菌药物耐药率与氨基糖苷类用药频率存在相关性

阿米卡星DDDs与大肠埃希菌对阿米卡星、氨曲南、头孢哌酮/舒巴坦、头孢他啶耐药率的变化呈显著正相关（r分别为0.821、0.821、0.857、0.893，P＜0.05）；大肠埃希菌对阿米卡星耐药率与大肠埃希菌对氨曲南、头孢哌酮/舒巴坦、头孢他啶耐药率呈显著正相关（r分别为0.786、0.946、0.929，P＜0.05）；大肠埃希菌对头孢他啶耐药率与大肠埃希菌对氨曲南、头孢哌酮/舒巴坦耐药率呈显著正相关（r分别为0.929、0.857，P＜0.05）。氨曲南、哌拉西林/他唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦、头孢他啶、亚胺培南/西司他丁用量与大肠埃希菌对各药耐药性无相关性。

3 讨论

3.1 我院抗菌药物使用情况分析

由表1可见，医院连续7年来阿米卡星DDDs减少，酶抑制复合制剂如哌拉西林/他唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦的DDDs大大增加，而头孢他啶、氨曲南、亚胺培南/西司他丁DDDs增加不显著。由表2可知，6种药物产ESBLs大肠埃希菌耐药率均有所下降，这可能与2004年我国颁布了《抗菌药物合理使用指导原则》及我省卫生厅也颁布《抗菌药物合理使用指导原则》有关，另外也与我院2004年后使用头霉素的用量增加有关。

3.2 氨基糖苷类抗生素耐药机制分析

土耳其的一项研究显示，对氨基糖苷类抗生素耐药的革兰阴性菌（主要为克雷伯菌属、肠杆菌属和大肠埃希菌）中，最常见的耐药机制为产AAC（3）-Ⅱ、AAC（6′）-Ⅰ 和AN T（2″）-Ⅰ酶。在3大类氨基糖苷钝化酶中均选取革兰阴性菌中常见的钝化酶基因型进行检测，发现以氨基乙酰转移酶（AAC类）基因型为主，主要为AAC（6′）-Ⅰ、AAC（3）-Ⅱ和AAC（3）-Ⅰ基因。根据氨基糖苷类抗生素的耐药性分为3种耐药表型，即G-T型、G型和G-T-A型，其中G-T型占多数且全部检出AAC（3）-Ⅱ基因，这与孔海深等[3]报道的结果相类似。以上诸多研究表明，产AAC（3）-Ⅱ是大肠埃希菌对氨基糖苷类抗生素耐药中最常见的耐药机制之一[4]。Patterson等[5]认为，氨基糖苷类修饰酶基因与ESBLs基因可在同一整合子上，表现出多重耐药，认为这2个基因很可能会同时随质粒传播耐药性，因此临床应避免单独使用此类抗生素，必要时可联合用药。

3.3 抗菌药物使用量与大肠埃希菌的耐药率相关性

本文研究发现，阿米卡星DDDs与大肠埃希菌的耐药率显著相关，这与文献报道相符[6]。大肠埃希菌对头孢他啶耐药率与大肠埃希菌对氨曲南、头孢哌酮/舒巴坦耐药率呈显著正相关。提示临床应注意控制氨基糖苷类药物使用频度，防止产生ESBLs耐药。

3.4 抗菌药物临床使用建议

细菌耐药性的发展取决于多种因素，药物自身的特点如药动学、抗菌活性、作用机制、耐药机制等对耐药性无疑是起决定性作用，但某种药或某类药的使用频度、临床用药管理模式等也影响耐药性。因此，很有必要通过有规律的轮换、限制使用抗菌药物使用频率，来降低多种药物的耐药性，才可达到延长抗菌药物的使用寿命、使抗菌药物的利用更加科学与合理的目的。

[1]皮大茂，李广银，陈庆宪，等.β-内酰胺类抗生素用量与常见革兰阴性杆菌耐药性的相关性分析[J].重庆医学，2006，35（1）：57.

[2]National Comm ittee for Clinical Laboratory Standards.2007.Performance standardsforantimicrobial susceptibility testing documentM100-S17[S].National Comm ittee for Clinical Laboratory Standards.

[3]孔海深，李雪芬，王菊芳，等.大肠埃希菌氨基糖苷酰基转移酶基因型研究[J].浙江大学学报（医学版），2006，35（1）：83.

[4]姚 蕾，陈 琼，胡昌勤，等.64株大肠埃希菌对氨基糖苷类抗生素的耐药表型与钝化酶基因型的分析[J].中华微生物学和免疫学杂志，2005，25（9）：727.

[5]Patterson JE.Extended spectrum beta-lactamases：a therapeutic dilemma[J].Pediatr InfectDis，2002，21（10）：957.

[6]张晓梅，王家平，糜祖皇.80株大肠埃希菌耐药性及氨基糖苷类修饰酶基因分析[J].江苏大学学报（医学版），2006，16（3）：246.