硫磺联用TMP抗菌作用的实验研究

涂可斌，余声文

(1.咸宁市咸安区妇幼保健院，湖北 咸宁 437000;2.湖北省中医院)

硫磺性热味酸，有毒。外用可治疗疥癣、湿疹等皮肤病，常作为油膏或外洗剂、搽剂。三甲氧苄氨嘧啶(TMP)是一种广谱抗菌增效剂，临床上常与磺胺类药联用以增强磺胺类药的抗菌作用。为了探讨TMP对硫磺抗菌活性的影响，我们采用琼脂稀释法对比研究了硫磺、TMP及硫磺与TMP联用对6种不同细菌的体外抗菌作用。

1 材料与方法

1.1 实验材料

1.1.1 药品

硫磺取自湖北省中医院中药库。TMP购自湖北民康制药厂，批号19980621。

1.1.2 供试液配制

称取硫磺0.5g极细粉，加入无菌肉汤10ml，微热使溶，即得硫磺供试药液;称取50mgTMP于试管中，加入无菌肉汤10ml，摇匀即得TMP供试药液;在另一份硫磺供试药液中，再加入TMP50mg，微热使溶，即得硫磺与TMP复方供试药液。

1.1.3 菌种

①大肠杆菌;②伤寒杆菌;③绿脓杆菌;④水弧菌;⑤金黄色葡萄球菌;⑥志贺氏痢疾杆菌(以上菌种购自武汉大学微生物典藏中心)。

1.2 方法

采用试管内药液稀释法(二倍稀释法)试验［1］，取无菌20ml敞口试管3排，每排15管编号排列，每排的第1管分别为上述3种供试药液管。除每排的第1、14管外，其余各管中均加入无菌肉汤5ml，然后从第1管供试药液中量取5ml加至第2管中，混匀，同法依次稀释至第8管，混匀后吸出5ml于第14管中。每排的第14管作无菌阴性对照管，第15管作无药阳性对照管。然后于各管中加5ml热无菌肉蛋白胨琼脂，摇匀，趁热依次倾入到同一型号的无菌培养皿中，放置使琼脂冷凝。除第14号培养皿外，1～15号培养皿分别划分为6个近等的区域，并分别编号，然后在每个区域中分别用生化毛细管加入6种经16h培养的各含菌培养液(约5.5 亿个细菌/ml)10μl，37℃培养 20h左右，以细菌生长的状况作为判断指针，观察抗菌作用结果。

1.3 抗菌作用判断标准

无抗菌作用指接种区可见大片细菌生长;抑菌作用指接种区可见极少量细菌点状生长;具抗菌作用指接种区光滑无可见菌落。

2 结果

为便于直观比较分析，实验结果以抗菌作用最大稀释试管号表示。1～13管药物稀释倍数依次为原浓度的 1/2、1/4、1/8、1/16、1/32、1/64、1/128、1/256、1/512、1/1024、1/2048、1/4096、1/8192。0:表示第1管(1/2倍原浓度)即无抗菌作用;±:表示从第1至该管均呈抑菌作用。各供试液抗菌作用结果见表1。

表1 各供试液抗菌作用结果(试管号)

3 讨论

实验结果表明，在本文实验条件下，对大肠杆菌，硫磺与TMP在1∶2稀释度时均无抗菌作用，但硫磺联用TMP后抗菌活性较单用硫磺或TMP时大大增强，客观上两者联用增加了硫磺和TMP的抗大肠杆菌作用;对伤寒杆菌，硫磺与TMP在1∶2稀释度时均不显示抗菌作用，两者联用，抗菌活性较单用硫磺或TMP均大大增强;对绿脓杆菌，硫磺在1∶2稀释度时不显示抗菌作用，TMP却有较强的抗菌作用，两者联用后作用与TMP单用时一致，但相对于硫磺而言仍是增强;对水弧菌，硫磺有较弱的抗菌作用，TMP有一定的抑菌作用，两者联用后，抗菌活性较单用硫磺增大32倍;对金葡菌，硫磺有弱的抗菌活性，TMP为较强的抑菌作用，两者联用后，抗菌活性较单用硫磺增大64倍;对痢疾杆菌，硫磺有较弱的抗菌作用，TMP在1∶2稀释度时不显示抗菌作用，两者联用，抗菌活性较单用硫磺增大32倍。以上结果表明，硫磺联用TMP后，对实验的6种细菌抗菌活性均大大增强，说明硫磺与TMP联用具协同作用。

临床上常将硫磺制成油膏或外洗剂、搽剂，从本实验硫磺联用TMP对金葡菌、绿脓杆菌等抗菌活性的增加，可以推断将TMP加入硫磺，其疗效将更佳，此观点有待临床进一步验证。