壮药黄根对肝纤维化大鼠肝脏纤维增生程度的影响

杨增艳 韦金育 张青青 韦 涛

广西民族医药研究院，广西 南宁 530001

黄根为茜草科植物南山花Prismatomeris connata Y．Z．Ruan．的根。具有利湿退黄，强筋壮骨，祛瘀生新，凉血止血等功效，可用于风湿骨痛，跌打损伤，白血病，矽肺，牙龈出血，尿路感染的治疗［1］。在广西壮族民间常用黄根治疗急、慢性肝炎。本课题组通过研究黄根对肝纤维化大鼠模型的病理学改变，进而观察其抗肝纤维化作用。

1 实验材料

1.1 实验动物

Wistar大鼠60只，SPF级，体重203±13.1g，雌雄各半。购自广西医科大学动物实验中心。饲养于20～25℃，相对湿度60±10%环境中。

1.2 实验药物

黄根醇提物，本院提取。临用时蒸馏水调制所需浓度。秋水仙碱，云南昊帮制药有限公司生产。批号:090920。用研钵研成粉末，蒸馏水溶解并稀释至实验所需浓度，临用摇匀。

1.3 实验仪器

BS224S型电子天平 (北京赛多利斯);AMS－18A全自动生化分析仪 (北京奥普森);SW－261－79型电热恒温水浴箱 (上海医疗器械厂)。

2 实验方法

2.1 造模方法

首次大鼠皮下注射纯CCl45ml/kg体重，以后改为皮下注射CCl440%花生油溶液3ml/kg体重，每3天1次，共6周。喂正常固体饲料，自由饮水［2］。

2.2 药效实验

Wistar大鼠60只，随机分为6组:黄根高剂量组、黄根中剂量组、黄根低剂量组、空白组、模型组、秋水同碱组，每组10只。自造模第1天起，黄根高、中、低剂组分别按5.6g(生药)/Kg、2.8g(生药)/Kg、1.4g(生药)/Kg剂量给药，秋水仙碱组按0.2mg/Kg剂量给药。空白组、模型组分别予等体积蒸馏水，每天灌胃1次，共6周。各组末次给药后禁食12小时，称重，经戊巴比妥钠腹腔注射麻醉，取大鼠右小叶肝脏，剪取约0.5厘米厚度肝组织，中性甲醛缓冲液固定，石蜡包埋，切片为5μm厚度。经多级酒精脱水，二甲苯透明，作HE染色，天狼猩红染色，光镜下拍摄病理组织照片，观察纤维组织增生程度的变化情况［3］。

3 实验结果

3.1 大鼠肝组织病理学照片

空白组大鼠肝组织中肝小叶结构清晰完整，肝细胞索排列整齐，无肝细胞变怀坏死，无炎细胞浸润，无纤维增生 (见图1)。模型组大鼠肝组织可见肝细胞排列紊乱，肝细胞空泡样变性、坏死，汇管区大量纤维组织增生并有散在炎性细胞浸润，部分大鼠可见纤维组织增生延伸到肝小叶，分隔肝小叶形成假小叶 (见图2)。阳性药组和高剂量组大鼠肝细胞变性坏死减轻，部分大鼠可见假小叶(见图3－4);中剂量组和低剂量组大鼠肝细胞变性、坏死仍较明显，汇管区纤维组织增生，部分大鼠可见假小叶(见图5－6)。

3.2 大鼠肝组织胶原纤维增生的影响

表3 各组大鼠组织胶原纤维增生程度分级比较情况 (各组n=10)

光镜下观察，纤维组织增生情况以“++++”为最严重，“－”为无纤维增生［4］。正常组大鼠肝组织切片显示无肝纤维化形成，模型组纤维增生明显，说明模型已造模成功。高剂量组和模型组对肝纤维化大鼠均有改善，可明显降低大鼠纤维增生程度 (P＜0.01)。各组的Riddit分析的R值见表3。

4 讨论

病理学是用自然科学的方法，研究疾病的病因、发病机制、形态结构、功能和代谢等方面的改变，揭示疾病的发生发展规律，从而阐明疾病本质的医学科学［5］。在肝纤维化发生发展过程中，观察肝细胞的功能代谢和形态结构变化，更有助于探讨抗肝纤维化的作用机理和作用规律。本实验的病理学结果表明:黄根高剂量组大鼠肝细胞变性坏死程度减轻，提示黄根具抗肝纤维化作用。但有关黄根抗肝纤维化的作用机制，还有待今后更进一步的研究。

［1］梁启成，钟鸣．中国壮药学［M］．广西民族出版社，2005．

［2］钟鸣，黄琳芸，余胜民，等．排钱草对大鼠实验性肝纤维化的影响［J］．中西医结合肝病杂志，1999，9(4):22．

［3］孙设宗，唐微，张红梅．等．云芝多糖对小鼠实验性肝损伤保护作用的研究［J］．中国现代医学杂志，2008，18(9):1217．

［4］中国中西医结合学会肝病专业委员会．肝纤维化中西医结合诊疗指南［J］．中国中西医结合杂志，2006，26(11):1052．

［5］杨燕初，孟冬月．病理学［M］．人民军医出版社，2007．