12种中草药对耐药与非耐药菌株抑菌活性的对比研究

阮殿清,史默怡,李建志,杨丽珍,王亚贤

(1.木兰县疾病控制中心,黑龙江 木兰 151900;2.黑龙江中医药大学,黑龙江 哈尔滨 150040)

有很多中药具有抗菌消炎的功效,更令人欣喜的是细菌不易对中药产生耐药性,因为中药成分复杂,单味药中也往往同时含有多种成分,能作用于细菌代谢的多个环节,因此较抗生素不易产生耐药性。我国有着丰富的中草药资源,药用植物种类约为11 020种,其中极少部分作抑菌、抗菌活性研究[1]。

1 实验材料

1.1 仪器 电热恒温培养箱(D NP-9082,杭州汇尔仪器设备有限公司);医用超净工作台(S W-C J-1F D,常州诺基仪器有限公司);分析天平(XP6,瑞士)。

1.2 菌株来源 金黄色葡萄球菌、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌、肠球菌、耐万古霉素肠球菌均从 2010年3～8月黑龙江中医药大学附属第一医院不同的临床病人标本中分离,实验前对菌种进行了形态,染色性,生化反应和抗原性鉴定。

1.3 实验中药 五倍子、黄连、大黄、黄柏、黄芩、赤芍、白头翁、射干、地丁、败酱草、金银花、鱼腥草。

1.4 方法

1.4.1 中药提取液的制备 中药原药均由黑龙江中医药大学附属第一医院药房提供。采用二次煮沸法[2-3]。称取中药黄连 300g,加入蒸馏水 1 000mL,浸泡 20min,强火加热煮沸,文火煎煮 30min,搅拌,过滤;药渣再加入蒸馏水 250m L按上法煎熬、过滤;两次药液合并浓缩成 300mL,调pH值至 7.4～7.6,并置离心管中,以 4 000r/min离心 10min;将中药原液以高压蒸气灭菌 8磅 20min灭菌后即为实验药液(1m L药液相当于原药材 1g)。

1.4.2 菌液制备 在无菌条件下,用接种环分别将金黄色葡萄球菌、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌、肠球菌、耐万古霉素肠球菌等 4种细菌,分别接种于琼脂斜面培养基,37℃培养 24h,传种于无菌肉汤培养基中培养18h,再传种于无菌肉汤培养基中培养 6h后,用前将菌液浓度 1∶1 000稀释。

2 实验方法与结果

采用中药抗菌试验试管法[4]测定药物的最低抑菌浓度。见表 1,表 2,表 3。

表2 12种中药对金黄色葡萄球菌和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌抑菌活性对比

表3 12种中药对肠球菌和耐万古霉素肠球菌抑菌活性对比

3 讨论

由结果可知,五倍子、黄连、大黄、黄柏、黄芩、赤芍、白头翁、射干、地丁、败酱草、金银花、鱼腥草等 12种中草药对金黄色葡萄球菌、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌、肠球菌、耐万古霉素肠球菌等 4种菌株均有不同程度抑制活性,其中五倍子、黄连、大黄、黄柏、黄芩对金黄色葡萄球菌和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌有较强的抑菌作用;五倍子、黄连、黄柏、白头翁、大黄、败酱草对肠球菌和耐万古霉素肠球菌有较强的抑菌活性,而且从表中我们可以看到,中药对耐药菌株和非耐药菌株抑菌活性无明显差异。本文所述的 12种中草药皆为常用的内服药物,可为临床治疗各种感染性疾病提供参考。

[1]段劲生,王梅,胡本进.中草药源杀菌剂的研究进展[J].安徽农业科学,2007,35(3):755,788.

[2]陈奇.中药药理研究方法[M].北京:人民卫生出版社,1991:259-262.

[3]黄通旺,杨灏强,庞珊.抑制 β-内酰胺酶的中草药筛选研究[J].汕头大学学报,2000,15(2):46-49.

[4]杜思邈,马丽强,孙俊杰,等.苦参提取物体外抗菌实验研究[J].中医药学报,2010,38(3):74-76.