骨髓涂片和印片细胞学对成熟淋巴细胞肿瘤的诊断价值

郑 静 浙江省监狱中心医院检验科 杭州 310016

卢兴国 龚旭波 朱 蕾 浙江大学附属第二医院血液科

骨髓涂片细胞学检查是血液病诊断的主要方法，但其由于细胞增生程度常受细胞间吸附力、细胞与间质黏着力、有无纤维化等因素的影响，而不能客观反映造血全貌，造成骨髓涂片形态诊断与骨髓印片、切片诊断上的差异[1]。骨髓切片虽是评估有核细胞的金标准，但检查复杂和费时，又不能与骨髓涂片同步检查[2]。骨髓印片和切片所显示细胞量差异程度不大，常比骨髓涂片细胞量为多，能较真实地反映骨髓增生状态，有利于提高疾病的诊断率。我们在应用骨髓印片细胞学检验中发现，骨髓涂片细胞学检验诊断成熟B淋巴组织肿瘤有明显欠缺，而骨髓印片则在检查有核细胞量、淋巴细胞百分比和淋巴细胞组织学结构方面，明显优于骨髓涂片，容易作出快速的形态学诊断。现将结果报道如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料 成熟B淋巴细胞肿瘤患者36例，均为浙江大学医学院附属第二医院2007年9月—2010年9月期间住院和门诊的初诊患者，男20例，女16例，年龄37～78岁，中位年龄62岁。每例同步做血片、骨髓涂片、骨髓印片和骨髓切片检查，并以骨髓切片为金标准而作出确诊，均符合成熟淋巴细胞肿瘤的诊断标准。

1.2 观察指标 观察每例患者骨髓涂片和骨髓印片有核细胞量和淋巴细胞百分比，观察骨髓印片淋巴细胞分布组织结构性概貌，并分析这些指标对成熟淋巴细胞肿瘤诊断的影响。

1.3 观察方法 骨髓印片和骨髓涂片均用Wright-Giemsa染色，以10个油镜视野（Olympus CX31显微镜）平均有核细胞数计数分级法比较有核细胞量[4]；分类计数500有核细胞，计算淋巴细胞百分比；骨髓印片组织概貌，参考组织学特征[5]分为散在性间质型、簇状结节型、间质-结节型、浸润弥散型。

1.4 统计学方法 采用SPSSl3.0统计软件包进行数据处理分析。计量资料以（） 表示，组间比较采用t检验，计数资料组间比较采用χ2检验。

2 结果

2.1 骨髓涂片与骨髓印片有核细胞量比较 36例成熟淋巴细胞肿瘤骨髓印片和骨髓涂片有核细胞量比较，骨髓涂片中有核细胞减少16例（44%），骨髓印片检查未见减少病例；一般有核细胞量病例，骨髓涂片多于骨髓印片，但差异无统计学意义（χ2=1.424，P＞0.05）；骨髓印片有核细胞增多病例显著多于骨髓涂片（χ2=23.063，P＜0.01），见表 1。

表1 36例成熟淋巴细胞肿瘤骨髓涂片与骨髓印片有核细胞量比较 例（%）

2.2 骨髓涂片与骨髓印片淋巴细胞百分比 骨髓涂片淋巴细胞在正常范围（10%～25%）者4例（11.1%），骨髓印片未见1例。淋巴细胞比例明显增高病例，骨髓印片多于骨髓涂片，但差异无统计学意义（P＞0.05）。见表 1。骨髓涂片淋巴细胞均值（62.64±22.48）%，骨髓印片为（72.83±20.35）%，后者高于前者（t=2.016，P＜0.05）。

2.3 骨髓印片组织结构概貌 骨髓涂片上淋巴细胞均呈散在性分布，不能观察。骨髓印片淋巴细胞分布以弥散型最多（58.3%），结节型和间质-结节型各占20%左右。

2.4 骨髓涂片与骨髓印片细胞学诊断的符合率 骨髓涂片细胞学检查符合诊断者仅占52.7%，骨髓印片细胞学检查由于有核细胞丰富，淋巴细胞比例高，及显示的组织结构性概貌，细胞学检查诊断符合率达100%。骨髓印片与涂片对诊断的影响差异有统计学意义（χ2=22.255，P＜0.01）。

2.5 骨髓涂片细胞学特征 骨髓涂片作出诊断19例，其中16例为慢性淋巴细胞白血病，骨髓涂片细胞象具有慢性淋巴细胞白血病基本特征及典型特征；3例为小细胞性淋巴瘤骨髓侵犯患者，结合临床有该病史和近期病情加重，有成熟淋巴细胞肿瘤细胞学的基本特征。骨髓涂片不能作出诊断的17例中，误诊再障4例，造血减低4例，判为骨髓稀释5例。

3 讨 论

骨髓印片是将骨髓组织直接在载玻片上印制，干扰因素较骨髓穿刺并将骨髓液制成涂片时明显减少，故在一般情况下，骨髓印片的有核细胞量要高于骨髓涂片。良好的骨髓活检组织印片还显示组织结构的一些特征，不但在评估有核细胞量上优于骨髓涂片，而且通过印在标本中的瘤细胞组织浸润结构，更利于对疾病作出评估和诊断[6]。至今，血液形态学仍是血液病诊断的基础和基本项目[7]，尤其是一些以细胞量多少为主要诊断依据的血液病，如再障、造血减低、脾功能亢进、骨髓增殖性肿瘤、继发性造血细胞增多等，骨髓有核细胞量的可靠评估尤其重要；在造血肿瘤中，如浆细胞骨髓瘤、急性白血病骨髓检查细胞量的减少也会影响诊断[8]。

成熟B淋巴细胞肿瘤是常见的恶性肿瘤，与细胞形态学相关的常见类型有慢性淋巴细胞白血病、小细胞淋巴瘤、淋巴浆细胞淋巴瘤、克隆性B淋巴细胞增多症、滤泡淋巴瘤等。本文对36例成熟B淋巴细胞肿瘤进行骨髓涂片和骨髓印片细胞学同步观察，表明骨髓涂片的有核细胞量明显少于骨髓印片，尤其是细胞明显减少者。显然，骨髓涂片细胞量的评估不足，可影响疾病诊断。观察骨髓涂片淋巴细胞百分比虽然也有一定差异，但明显不如有核细胞显著，因为在细胞学分析中，某一成熟细胞百分比变化的意义不及有核细胞量的变化敏感。观察骨髓印片淋巴细胞分布的组织特性，36例成熟淋巴细胞肿瘤，一半以上淋巴细胞呈弥散型分布，这是肿瘤细胞浸润替代造血组织的表现，结节型和混合型常为肿瘤细胞浸润的早中期表现，这些均是瘤细胞生长的共性，难以在骨髓涂片中见到。骨髓印片的这一特点，以及比骨髓涂片有核细胞为多的优势，使成熟淋巴细胞肿瘤诊断较骨髓涂片更为容易。

我们认为，对于成熟淋巴细胞肿瘤，尤其是淋巴浆细胞淋巴瘤、单克隆B淋巴细胞增多症或慢性淋巴细胞白血病早期病人的诊断中，单一的骨髓涂片细胞学检查有明显的欠缺，极易造成漏诊和误诊。骨髓印片细胞学检查简便、实用、快速，是弥补骨髓涂片细胞学某些不足的最佳方法，两者同步检查可以明显提高细胞形态学的诊断，在非慢性淋巴细胞白血病的成熟淋巴B细胞肿瘤中的诊断价值尤其凸显。

［1］ Pasquale D，Chikkappa G.Comparative evaluation of bone marrow aspirate particle smears，biopsy imprints，and biopsy sections［J］.Am J Hematol，1986；22：381-389.

［2］Lee SH，Erber WN，Porwit A，et al.ICSH guidelines for the standardization of bone marrow specimens and reports［J］.Int J Lab Hematol，2008，30：349-364.

［3］Swerdlow SH，Campo E，Harris NL，et al.World Health Organization Classification of Tumors Pathology and genetics of tumors of haematopoietic and lymphoid tissues.4th ed［M］.Lyon：IARC press，2008：179-261

［4］Lu XG，Huang LS，Xu XH，et al.Application of bone marrow biopsy imprint in evaluating cellularity［J］.Zhejiang Da Xue Xue Bao Yi Xue Ban，2006，35：331-335.

［5］Rozman C，Hemadez-Nieto L，Monserrat E，et al.Prognostic significance of bone-marrow patterns in chronic lymphocytic leukemia［J］.Br J Haematol，1981，47：529-537.

［6］James LP,Stass SA,Schumacher HR.Value of imprint preparations of bone marrow biopsies in hematologic diagnosis［J］.Cancer，1980，46：173-177.

［7］Chee CE,Kumar S,Larson Dr,et al.The importance of bone marrow examination in determining complete response to therapy in patients with multiple myeloma［J］.Blood，2009，114：2617-2618.

［8］卢兴国.造血和淋巴组织肿瘤现代诊断学［M］.北京：科学出版社，2005：26-42.