气相色谱法测定复方丹参片中冰片的含量及含量均匀度

黄 捷， 吴桂凡

(广西食品药品检验所，广西南宁 530021)

复方丹参片是由三七、丹参、冰片三味药加工而成的片剂，具有活血化瘀、理气止痛的功效［1］580。其中丹参祛瘀止痛，活血通经，清心除烦［1］70，三七散瘀止血，消肿定痛［1］11，冰片开窍醒神，清热止痛［1］136，三味药相辅相成，缺一不可。复方丹参片中丹参和三七的成分定量测定研究文献较多［2-4］，且已采用指纹图谱的方法进行了控制研究，而冰片定量测定报道较少［5-6］，冰片在处方中投料量较少［7-8］，且具有挥发性，在生产总混不易混匀，为考察本品中冰片的含量均匀度，特制定本法，从而达到控制本品中冰片的含量均匀度，经试验研究选用气相色谱法来测定本品中冰片的含量，方法可行，质量可控。

1 仪器与试药

日本岛津公司2010气相色谱仪，FID检测器;龙脑对照品(中国药品生物制品检定所提供，批号:110881-200706，含量以99.2%计，供含量测定用);异龙脑对照品(中国药品生物制品检定所提供，批号:1512-200201，供含量测定用);其余试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱 DB-WAX(柱长 30 m，内径 0.53 mm，膜厚度0.25 μm)，进样口温度180℃，检测器温度200℃，柱温135℃，进样量为 1 μL，分流比5 ∶1。

2.2 对照品溶液的制备

取水杨酸甲酯适量，精密称定，加乙酸乙酯制成每1 mL含5 mg的溶液，作为内标溶液。另取龙脑对照品和异龙脑对照品各10 mg，置20 mL量瓶中，加乙酸乙酯使溶解并稀释至刻度。精密量取5 mL，至10 mL量瓶中，加内标溶液1 mL，加乙酸乙酯至刻度，摇匀即得。

2.3 供试品溶液的制备

取本品10片，糖衣片除去包衣，研细，精密称取0.3 g，置10 mL量瓶中，加乙酸乙酯8 mL，超声处理(功率320 W，频率40 kHz)30 min，放冷，加内标溶液1 mL，加乙酸乙酯至刻度，摇匀，滤过，即得。

2.4 线性关系考察

2.4.1 对照品贮备液制备 精密称取龙脑对照品30.40 mg，异龙脑对照品26.45 mg，置20 mL量瓶中，加乙酸乙酯溶解并稀释至刻度，摇匀，即得(浓度为1.037 mg/mL)。

2.4.2 线性测定 分别精密吸取2.2项的对照品溶液0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、8.0 mL 至10 mL 量瓶中，加乙酸乙酯稀释至刻度，摇匀。进样1 μL。

结果得龙脑回归方程为:Y=17.3X－0.094 8(n=6，r=0.999 7)。

异龙脑回归方程为:Y=17.2X－0.083 7(n=6，r=0.999 7)。

结果表明:龙脑在进样量为7.6～121.6 ng范围内时，进样量与龙脑峰面积呈良好的线性关系。异龙脑在进样量为6.6～105.8 ng范围内时，进样量与异龙脑峰面积呈良好的线性关系。

2.5 精密度试验

对同一供试品溶液，按正文拟订的色谱条件，连续测定6次。结果6次测定平均含龙脑为2.392 0 mg/片，RSD为0.31%(n=6)，异龙脑为 1.403 8 mg/片，RSD 为 0.38%(n=6)，试验表明，本法的精密度较好。

2.6 重复性试验

对同一批样品，按定量测定的方法平行测定6份，结果含龙脑平均值为2.383 8 mg/片，RSD 为 0.79%(n=6)，含异龙脑平均值为1.394 7 mg/片，RSD为0.81%(n=6)，结果表明，本法的重现性较好。

2.7 稳定性考察

对同一供试品溶液，每隔一定时间测定一次，共测定4次，试验表明，在25 h内，被测物稳定。

2.8 加样回收率测定

2.8.1 对照品贮备液的制备 精密称取龙脑对照品14.98 mg，异龙脑对照品10.01 mg，置25 mL量瓶中，加乙酸乙酯溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品贮备液。

2.8.2 回收率的测定 取已测定的样品(龙脑7.645 mg/g，异龙脑 4.473 mg/g)9 份，称取约0.15 g，精密称定，置10 mL量瓶中，第1～3份精密加入对照品贮备液1 mL，第4～6份精密加入对照品贮备液2 mL，第7～9份精密加入对照品贮备液3 mL，照供试品溶液项下的方法制备、测定。结果表明，用本法测定龙脑、异龙脑的量，回收率符合规定。结果见表 1，表 2。

表1 龙脑加样回收试验结果

图1 GC色谱图

表2 异龙脑加样回收试验结果

2.9 干扰试验

按处方量比例称取除冰片外其余药味，按制法制成阴性样品，照供试品溶液制备项下的方法提取，测定。结果在龙脑和异龙脑峰相应的保留时间无干扰峰，表明处方中其它成分对测定无影响，见图1。

2.10 样品的测定

取5批样品，按2.3项下方法制备供试品溶液，平行测定2份，计算冰片的含量，结果见表3。

表3 5批样品冰片测定结果

2.11 样品含量均匀度

取本品1片，糖衣片除去包衣，研细，置10 mL量瓶中，用乙酸乙酯8 mL分次洗涤研钵，洗涤液并入量瓶中，超声处理30 min，放冷，加内标溶液1 mL，加乙酸乙酯至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，按样品的定量测定方法测定冰片含量均匀度，结果见表4。

3 讨论

3.1 内标的选择

表4 5批样品含量均匀度测定结果

取水杨酸甲酯和异丙醇，各加乙酸乙酯配制成每1 mL含5 mg，做为内标溶液。按上述方法测试，结果水杨酸甲酯出峰时间(24 min)和龙脑峰(18 min)较接近，峰面积大小也较合适，而异丙醇在35 min都未出峰，故内标溶剂选择水杨酸甲酯。

3.2 不同厂家，不同的批号之间，冰片的含量差异较大，冰片的均匀度均较差，处方中冰片投药量较少，每片只有8 mg，从均匀度的测定结果提示对于少量、易挥发的冰片，与大量的中药浸膏较难混合均匀，结果冰片损失和均匀度出现较大差异。从测定样品结果反映出复方丹参片中冰片的含量和均匀度均有必要进一步制定标准进行质量控制。

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